滕爽 呂青骎 包月紅 錢行 王瑋
摘 要:2020—2021年,實(shí)驗(yàn)室參加農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管司組織的畜禽產(chǎn)品中獸藥殘留檢測能力驗(yàn)證考核,提高了實(shí)驗(yàn)室對畜禽產(chǎn)品中獸藥殘留的檢測水平,實(shí)驗(yàn)室檢測能力得到了有效驗(yàn)證。在能力驗(yàn)證過程中,實(shí)驗(yàn)室在試驗(yàn)準(zhǔn)備、實(shí)施試驗(yàn)、結(jié)果報(bào)送環(huán)節(jié)中,從人員、儀器、材料、方法和環(huán)境等5方面著手,進(jìn)行檢測質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)室在考核雞肉中氟喹諾酮類獸藥殘留和豬肉中磺胺類獸藥殘留的項(xiàng)目中,均獲得滿意結(jié)果。實(shí)驗(yàn)室參加農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管司組織的畜禽產(chǎn)品中獸藥殘留檢測能力驗(yàn)證考核,檢測結(jié)果合格,表明實(shí)驗(yàn)室在能力驗(yàn)證試驗(yàn)過程中,其質(zhì)量控制方法有效、檢測能力較好。
關(guān)鍵詞:畜禽產(chǎn)品;獸藥殘留;能力驗(yàn)證;質(zhì)量控制
Research on the Quality Control of Participating Proficiency Testing of Veterinary Drug Residues in Livestock and Poultry Products by Testing Laboratory
TENG Shuang, LV Qingqin, BAO Yuehong, QIAN Hang, WANG Wei*
(College of Food Science and Technology/Supervision, Inspection and Testing Center for Quality of Meat-products (Nanjing) Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China)
Abstract: In order to improve the detection ability of veterinary drug residues in livestock and poultry products, and verify laboratory testing capability, the laboratory participated in the proficiency testing of veterinary drug residues in livestock and poultry products organized by the department of quality and safety supervision of agricultural products Ministry of Agriculture and rural Affairs from 2020 to 2021. During the proficiency testing, control method is carried out in the preparation, implementation process and results report from five aspects: personnel, instrument, material, method and environment. Satisfactory results were obtained for fluoroquinolones in chicken and sulfonamides in pork. The laboratory has passed the proficiency testing organized by the department of quality and safety supervision of agricultural products Ministry of Agriculture and rural Affairs, which proves that the quality control method is effective and the testing capability of the laboratory is good.
Keywords: livestock and poultry products; veterinary drug residue; proficiency testing; quality control
能力驗(yàn)證(Proficiency Testing,PT)是利用實(shí)驗(yàn)室間比對,按照預(yù)先制定的準(zhǔn)則評價參加者的能力[1-4]。對于食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)來說,能力驗(yàn)證是重要的外部質(zhì)量評價活動和實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量監(jiān)控的重要手段,是實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可機(jī)構(gòu)和實(shí)驗(yàn)室用戶評定食品檢測實(shí)驗(yàn)室檢測能力的主要依據(jù)之一,也是食品檢測實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行自我評定的重要尺度[5-8]。食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)通過參加能力驗(yàn)證,可以全面檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的各方面工作,提升檢驗(yàn)人員的檢測能力和質(zhì)量體系的管理水平,為實(shí)驗(yàn)室提供評價其出具數(shù)據(jù)可靠性和有效性的客觀證據(jù)[9-14]。檢測實(shí)驗(yàn)室每年制定質(zhì)量控制計(jì)劃,定期參加能力驗(yàn)證,是保證檢測能力水平的重要手段,也是資質(zhì)認(rèn)定和機(jī)構(gòu)考核的必須要求。
隨著國民經(jīng)濟(jì)水平的提高,人們對畜禽產(chǎn)品的需求日益增多,在促進(jìn)我國畜禽養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的同時,因用藥不當(dāng)?shù)纫蛩?,獸藥殘留嚴(yán)重危害我國畜禽產(chǎn)品的質(zhì)量安全,并對消費(fèi)者的身體健康和生命安全造成了嚴(yán)重的危害[15-17]。獸藥主要包括抗生素類、驅(qū)腸蟲藥類、生長促進(jìn)劑類、抗原蟲藥類、滅錐蟲藥類、鎮(zhèn)靜劑類和β-腎上腺素能受體阻斷劑等七大類[18]。磺胺類(Sulfonamides,SAs)和氟喹諾酮類(Fluoroquinolones,F(xiàn)Qs)藥物,作為廣譜抗菌藥,因其具有抗菌譜廣、抗菌能力強(qiáng)、價格低廉等優(yōu)點(diǎn),已被廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)臨床和畜牧養(yǎng)殖業(yè)中[19-22]。飼養(yǎng)過程中濫用抗菌藥物,會在動物體內(nèi)造成藥物殘留,經(jīng)食物鏈進(jìn)入人體后,對人的身體健康造成嚴(yán)重危害,并導(dǎo)致許多細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性[23-27]。我國2019年發(fā)布的《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》(GB 31650—2019)中明確規(guī)定在動物性食品中的磺胺類、氟喹諾酮類獸藥最大殘留限量(Maximum Residue Limits,MRLs)[28]。目前檢測動物源性食品中的氟喹諾酮和磺胺的標(biāo)準(zhǔn)方法主要為液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(High Performance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry,HPLC-MS/MS),而HPLC法是目前常用的比較經(jīng)濟(jì)實(shí)用的檢測手段,既可滿足動物性食品中獸藥殘留的準(zhǔn)確定性、定量檢測,也由于價格因素配置普遍,更適用于各類基層檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室[29-36]。
為提升和強(qiáng)化檢測實(shí)驗(yàn)室對畜禽產(chǎn)品中的獸藥殘留檢測能力,本實(shí)驗(yàn)室連續(xù)多年參加農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管司組織的畜禽產(chǎn)品中的獸藥殘留能力驗(yàn)證??己隧?xiàng)目包括雞肉中的恩諾沙星(Enrofloxacin,ENR)、環(huán)丙沙星(Ciprofloxacin,CIP)、沙拉沙星(Sarafloxacin,SAR)和達(dá)氟沙星(Danofloxacin,DAN),豬肉中的磺胺二甲基嘧啶(Sulfamethazine,SM2)、磺胺間甲氧嘧啶(Sulfamonomethoxine,SMM)、磺胺甲噁唑(Sulfamethoxazole,SMZ)、磺胺二甲氧嘧啶(Sulfadimethoxine,SDM)和磺胺喹噁啉(Sulfamethoxazole,SQ)。本文就2020—2021年參加畜禽產(chǎn)品中的獸藥殘留能力驗(yàn)證過程、結(jié)果進(jìn)行分析,討論檢測過程中質(zhì)量控制的關(guān)鍵點(diǎn),總結(jié)能力驗(yàn)證過程中把握關(guān)鍵點(diǎn)獲得滿意結(jié)果的經(jīng)驗(yàn),以期為各級各類農(nóng)產(chǎn)品檢驗(yàn)檢測實(shí)驗(yàn)室通過能力驗(yàn)證和提升檢測質(zhì)量提供一定的路徑與參考。
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
豬肉(含磺胺類藥物)能力驗(yàn)證樣品、雞肉(含氟喹諾酮類藥物)能力驗(yàn)證樣品由中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供;磺胺類藥物陰性生鮮豬肉和氟喹諾酮類藥物陰性生鮮雞肉均由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部肉及肉制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心(南京)提供。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):恩諾沙星、環(huán)丙沙星、鹽酸沙拉沙星、甲磺酸達(dá)氟沙星、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺二甲氧嘧啶和磺胺喹噁啉(德國Dr. Ehrenstofer公司)。
乙腈、甲醇、正己烷(色譜純,美國Fisher公司);磷酸(H3PO4)、氫氧化鈉(NaOH)、三乙胺(C6H15N)、磷酸二氫鉀(KH2PO4)、冰乙酸(CH3COOH)、正丙醇(C3H7OH)和無水硫酸鈉(Na2SO4)(分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);實(shí)驗(yàn)用水均為一級水。
1.2 儀器與設(shè)備
2695高效液相色譜儀(配2489紫外檢測器、2475熒光檢測器)、堿性氧化鋁固相萃取柱(2 g/6 mL,美國Waters公司);XS105電子天平(感量0.01 mg,瑞士Mettler-Toledo公司);PRACTUM612-1CN電子天平(感量0.01 g)、advance EDI& pro VF純水儀、D-16C臺式冷凍離心機(jī)(德國Sartorious公司);VORTEX GENIUS3渦旋混勻器、HS 501數(shù)顯型混勻器(德國IKA公司);STAR A221 pH測定儀、Syncronis C18色譜柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)(美國Thermo公司);Bond Elut C18固相萃取柱(200 mg/3 mL,美國Agilent公司)。
1.3 實(shí)驗(yàn)方法
根據(jù)能力驗(yàn)證文件規(guī)定,各單位可自行選擇現(xiàn)行有效,且有檢測限和(或)定量限以及回收率規(guī)定的方法。因此,本實(shí)驗(yàn)室分別采用農(nóng)業(yè)部1025號公告-14-2008《動物性食品中氟喹諾酮類藥物殘留檢測 高效液相色譜法》和農(nóng)質(zhì)發(fā)〔2014〕5號文附件8《磺胺類藥物在動物可食性組織中殘留的高效液相色譜檢測方法》,進(jìn)行雞肉中氟喹諾酮類獸藥殘留和豬肉中磺胺類獸藥殘留考核。
1.3.1 氟喹諾酮類藥物殘留檢測前處理
稱取2.00 g樣品(精確到0.01 g)于50 mL離心管中(能力驗(yàn)證樣品使用領(lǐng)樣的離心管,無需轉(zhuǎn)移,以免損失和污染),加10.0 mL 0.1 mol/L磷酸鹽緩沖溶液(pH=7),渦旋振蕩1 min,使肉樣完全分散,超聲萃取5 min后,280 r/min中速振蕩20 min,4 ℃下10 000 r/min離心5 min,取上清液于另一新的50 mL離心管中。殘?jiān)屑尤?0.0 mL 0.1 mol/L的磷酸鹽緩沖溶液(pH=7),渦旋1 min,280 r/min中速振蕩10 min,4 ℃下10 000 r/min離心5 min,合并2次上清液,混勻,備用。
取5.00 mL上清液,經(jīng)過依次用2 mL甲醇、2 mL磷酸鹽緩沖溶液預(yù)洗的Bond Elut C18固相萃取柱;用1 mL一級水淋洗,擠干;再用2.00 mL?0.05 mol/L磷酸溶液∶三乙胺-乙腈(82∶18,v∶v)洗脫,擠干,收集洗脫液;經(jīng)0.45 μm濾膜過濾后作為試樣溶液。
1.3.2 磺胺類藥物殘留檢測前處理
稱取5.00 g樣品(精確到0.01 g)于50 mL離心管中(能力驗(yàn)證樣品使用領(lǐng)樣的離心管,無需轉(zhuǎn)移,以免損失和污染),加入4 g無水硫酸鈉,15 mL乙腈,渦旋1 min,使肉樣完全分散,混勻器上280 r/min振蕩20 min,4 ℃下8 000 r/min速度離心5 min,將上層溶液轉(zhuǎn)移至另一離心管中,下層殘?jiān)?5 mL乙腈,渦旋混勻1 min,4 ℃下8 000 r/min速度離心5 min,合并2次上清液于同一離心管中,加入10 mL正己烷,280 r/min振蕩5 min,4 ℃下8 000 r/min速度離心5 min,取下層液體,加入5 mL正丙醇,50 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干,加3 mL 95%乙腈溶液,渦旋混合1 min,超聲2 min,作為備用液。
將上述備用液全部經(jīng)過3 mL 95%乙腈溶液活化的堿性氧化鋁小柱,用5 mL 95%乙腈溶液洗滌雞心瓶后過柱,擠干;用10 mL 70%乙腈溶液洗脫,收集洗脫液;加入5 mL正丙醇,50 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干,加入2.00 mL乙腈∶甲醇∶水∶冰醋酸(2.0∶2.0∶9.0∶0.2,v∶v∶v∶v)溶解,渦旋混合1 min,過0.45 μm濾膜后,采用高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)測定。
1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
(1)氟喹諾酮標(biāo)準(zhǔn)儲備液。精密稱取恩諾沙星、環(huán)丙沙星、鹽酸沙拉沙星各50 mg(精確至0.01 mg),甲磺酸達(dá)氟沙星10 mg(精確至0.1 mg)于50 mL容量瓶中,用0.03 mol/L NaOH溶液溶解并稀釋定容,分別得到質(zhì)量濃度為1 mg/mL的恩諾沙星、環(huán)丙沙星、沙拉沙星和質(zhì)量濃度為0.2 mg/mL的達(dá)氟沙星的單支標(biāo)準(zhǔn)儲備液。
(2)氟喹諾酮混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。準(zhǔn)確移取質(zhì)量濃度為1 mg/mL的恩諾沙星、環(huán)丙沙星、沙拉沙星和質(zhì)量濃度為0.2 mg/mL的達(dá)氟沙星的標(biāo)準(zhǔn)儲備液各100 μL于100 mL容量瓶中,乙腈稀釋并定容,配制成質(zhì)量濃度為1.00 μg/mL的恩諾沙星、環(huán)丙沙星、沙拉沙星和質(zhì)量濃度為0.2 μg/mL的達(dá)氟沙星的氟喹諾酮混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。
(3)磺胺標(biāo)準(zhǔn)儲備液。精密稱取磺胺二甲基嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺二甲氧嘧啶和磺胺喹噁啉各10 mg(精確至0.01 mg)于10 mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀釋定容,分別得到質(zhì)量濃度為1 mg/mL的5種磺胺單支標(biāo)準(zhǔn)儲備液。
(4)磺胺混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。準(zhǔn)確移取5種磺胺儲備液100 μL于10 mL容量瓶中,甲醇稀釋并定容,得到質(zhì)量濃度為10 μg/mL的磺胺混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。
1.3.4 色譜條件方法建立
(1)氟喹諾酮類獸藥殘留的測定。流動相A:
0.05 mol/L磷酸溶液-三乙胺∶乙腈(82∶18,v∶v);流速:0.8 mL/min;熒光檢測器:激發(fā)波長280 nm;發(fā)射波長450 nm;進(jìn)樣量:20 μL;柱溫:30 ℃。
(2)磺胺類獸藥殘留的測定。流動相B:乙腈∶甲醇∶水∶冰醋酸(2.0∶2.0∶9.0∶0.2,v∶v∶v∶v);流速:1 mL/min;紫外檢測器:檢測波長270 nm;進(jìn)樣量:20 μL;柱溫:30 ℃。
1.3.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定
(1)氟喹諾酮標(biāo)準(zhǔn)曲線。準(zhǔn)確量取1.3.3中配制的恩諾沙星、環(huán)丙沙星、沙拉沙星和達(dá)氟沙星混合標(biāo)準(zhǔn)工作液,用流動相A將恩諾沙星、環(huán)丙沙星、沙拉沙星稀釋成質(zhì)量濃度為5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL和達(dá)氟沙星質(zhì)量濃度為1 ng/mL、2 ng/mL、4 ng/mL、10 ng/mL和20 ng/mL系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。
(2)磺胺標(biāo)準(zhǔn)曲線。準(zhǔn)確量取1.3.3中配制的適量磺胺混合標(biāo)準(zhǔn)工作液,用流動相B稀釋成質(zhì)量濃度為0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.50 μg/mL、1.00 μg/mL和5.00 μg/mL系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。
以上溶液現(xiàn)用現(xiàn)配,以峰面積為縱坐標(biāo),對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),Empower軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.3.6 精密度和加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)
(1)精密度。畜禽產(chǎn)品中獸藥殘留能力驗(yàn)證考核樣品均為平行雙樣,在同等條件下進(jìn)行樣品處理,每個樣品重復(fù)測定3次,計(jì)算平均值,并根據(jù)平行樣品的檢測結(jié)果計(jì)算精密度。
(2)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)。在空白雞肉中分別添加
40 μg/kg、100 μg/kg共2個水平的氟喹諾酮類獸藥混合標(biāo)準(zhǔn)品,在空白豬肉中分別添加50 μg/kg、100 μg/kg2個水平的磺胺類獸藥混合標(biāo)準(zhǔn)品,每個濃度設(shè)3個平行,以平均回收率(Recovery)評價本批次試驗(yàn)的準(zhǔn)確度,并根據(jù)平行樣品的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(Relative Standard Deviation,RSD)評價精密度。
1.3.7 結(jié)果計(jì)算
根據(jù)保留時間定性,外標(biāo)法定量。試樣中氟喹諾酮類含量按式(1)計(jì)算:
(1)
式中:X為氟喹諾酮類殘留量,μg/kg;c為經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算氟喹諾酮?dú)埩舻臐舛?,ng/mL;m為樣品質(zhì)量,g。
試樣中磺胺類含量按式(2)計(jì)算:
1 000? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? (2)
式中:X為磺胺類殘留量,μg/kg;c為經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算磺胺殘留的濃度,μg/mL;m為樣品質(zhì)量,g。
計(jì)算結(jié)果需扣除空白值,測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示。
2 結(jié)果與分析
2.1 能力驗(yàn)證樣品測定
能力驗(yàn)證樣品經(jīng)前處理后上機(jī)檢測,按照1.3.5繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,氟喹諾酮類獸藥在5~100 ng/mL(其中達(dá)氟沙星1~20 ng/mL)、磺胺類獸藥在0.05~5.00 μg/mL,所有獸藥目標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)(Correlation Coefficient,R)均達(dá)到0.999,能夠準(zhǔn)確地進(jìn)行外標(biāo)法定量。由表1和表2可知,雞肉能力驗(yàn)證樣品中分別檢出恩諾沙星(60.0 μg/kg)和環(huán)丙沙星(70.0 μg/kg),RSD≤4.040%;豬肉能力驗(yàn)證樣品中分別檢出磺胺二甲氧嘧啶(110.0 μg/kg)和磺胺喹噁啉(105.0 μg/kg),RSD≤1.540%。
2.2 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)
為驗(yàn)證能力驗(yàn)證試驗(yàn)的準(zhǔn)確度和精密度,檢測考核樣時同批次進(jìn)行2個濃度水平的陽性添加試驗(yàn)。由表3和表4可知,雞肉中恩諾沙星回收率為85.0%~92.0%,RSD≤2.620%;環(huán)丙沙星回收率為84.0%~90.0%,RSD≤1.580%。豬肉中磺胺二甲氧嘧啶回收率為80.4%~92.0%,RSD≤3.810%;磺胺喹噁啉回收率為80.8%~91.8%,RSD≤4.460%。本試驗(yàn)獸藥殘留檢出的回收率均高于80%,RSD小于7.000%,滿足HPLC法檢測獸藥殘留的準(zhǔn)確度和精密度要求,檢測過程中準(zhǔn)確度較高。
3 討論與結(jié)論
3.1 質(zhì)量控制措施
為確保能力驗(yàn)證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,實(shí)驗(yàn)室在試驗(yàn)準(zhǔn)備、實(shí)施過程、結(jié)果報(bào)送中分別按照以下7個方面進(jìn)行質(zhì)量控制。
3.1.1 人員
實(shí)驗(yàn)室人員需經(jīng)過培訓(xùn)和考核后方可上崗工作,并通過各類培訓(xùn)、內(nèi)部考核、質(zhì)量監(jiān)督等方式持續(xù)提高和考核其業(yè)務(wù)能力。實(shí)驗(yàn)室在多年能力驗(yàn)證的考核中采用骨干引領(lǐng)和以老帶新模式,不斷為實(shí)驗(yàn)室的持續(xù)發(fā)展培養(yǎng)人才。
3.1.2 儀器與耗材
能力驗(yàn)證試驗(yàn)中使用的液相色譜儀、電子天平、移液器等儀器,對于檢測結(jié)果有重要影響,必須在檢定校準(zhǔn)有效期內(nèi),可以正常使用。除常規(guī)儀器外,色譜柱作為HPLC法分離的核心,其型號的選擇也十分重要,有助于提高實(shí)驗(yàn)室分析效率。實(shí)驗(yàn)室在本項(xiàng)能力驗(yàn)證中選用Syncronis C18色譜柱(美國Thermo Fisher公司),其保留時間和峰面積的重現(xiàn)性優(yōu)異,能滿足HPLC法測定畜禽產(chǎn)品中獸藥殘留的檢測要求。此外,為保證能力驗(yàn)證中色譜柱的分離選擇性能,實(shí)驗(yàn)室的色譜柱專項(xiàng)專用。
3.1.3 樣品
能力驗(yàn)證考核樣品應(yīng)置于低溫、密封條件下保存。若收到樣品無法立即進(jìn)行檢測時,應(yīng)將其置于-20 ℃下儲存。試驗(yàn)中質(zhì)量控制需要進(jìn)行空白對照和陽性添加,實(shí)驗(yàn)室需準(zhǔn)備空白樣品作為空白基質(zhì)。實(shí)驗(yàn)室在能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)前應(yīng)對準(zhǔn)備的新鮮雞肉、豬肉空白基質(zhì)進(jìn)行儀器確證為陰性,同時還要確保試劑、環(huán)境、儀器設(shè)備對檢測結(jié)果無干擾,以確保能力驗(yàn)證工作的順利開展。
3.1.4 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
實(shí)驗(yàn)室為確保出具數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、公正性和權(quán)威性,應(yīng)使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行分析測定,可以量值溯源到國家基準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)室從保存期和穩(wěn)定性角度考慮,首選固體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),待使用時將其配制成標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液,再逐步稀釋成標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,以便獲得準(zhǔn)確的定量結(jié)果。此外,實(shí)驗(yàn)室在計(jì)算固體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制成標(biāo)準(zhǔn)儲備液的質(zhì)量濃度時,需以折鹽和含量后的藥物單體計(jì)算。
3.1.5 方法
實(shí)驗(yàn)室采用的檢測方法應(yīng)同時滿足適應(yīng)能力驗(yàn)證要求和本實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況。實(shí)驗(yàn)室在能力驗(yàn)證中為獲得穩(wěn)定和準(zhǔn)確的定量結(jié)果,在HPLC-MS/MS和HPLC方法中,選擇了可避免基質(zhì)效應(yīng)的HPLC法。
3.1.6 平行試驗(yàn)
平行試驗(yàn)結(jié)果是判斷檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的重要依據(jù)之一。本能力驗(yàn)證考核組織單位提供2個平行樣品,每個樣品經(jīng)前處理后上機(jī)測定,需重復(fù)測定3次,以獲得該樣品的檢測值,并計(jì)算RSD,以考察其精密度是否滿足檢測要求。
3.1.7 加標(biāo)回收
加標(biāo)回收檢測結(jié)果是判斷同批次其他樣品檢測質(zhì)量的依據(jù)。加標(biāo)回收試驗(yàn)一般在空白樣品中進(jìn)行添加,添加量為定量限(Limit of Quantitation,LOQ)1~5倍質(zhì)量濃度。實(shí)驗(yàn)室綜合考慮方法LOQ、MRLs和檢測線性范圍,雞肉中氟喹諾酮能力驗(yàn)證考核選擇2倍LOQ和MRLs進(jìn)行陽性添加,而豬肉中磺胺能力驗(yàn)證考核選擇1倍LOQ和MRLs進(jìn)行陽性添加。陽性添加樣品與考核樣品和空白對照樣品應(yīng)同時測定,其中空白對照可避免試驗(yàn)過程中的污染和干擾,而陽性添加可確保本批次試驗(yàn)的準(zhǔn)確度和精密度。
3.2 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)室參加能力驗(yàn)證是一項(xiàng)綜合性考核工作,實(shí)驗(yàn)室在多年的能力驗(yàn)證工作中,通過梳理質(zhì)量控制的關(guān)鍵因素,并在實(shí)踐中予以驗(yàn)證,有效提升了實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量體系管理水平和檢測質(zhì)量,為實(shí)驗(yàn)室順利通過能力驗(yàn)證提供了正確路徑。本實(shí)驗(yàn)室自2015年來參加農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管司組織的畜禽產(chǎn)品中的獸藥殘留能力驗(yàn)證,以人員、儀器與耗材、樣品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、方法、平行試驗(yàn)和加標(biāo)回收檢測7個方面為抓手,在提高實(shí)驗(yàn)室的檢測質(zhì)量的同時,其能力驗(yàn)證也均獲得了滿意結(jié)果。
參考文獻(xiàn)
[1]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局,中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會.合格評定 能力驗(yàn)證的通用要求:GB/T 27043—2012[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2012.
[2]高占科,于惠莉.淺析校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室參加能力驗(yàn)證的策劃和實(shí)施[J].中國檢驗(yàn)檢測,2021,29(1):92-94.
[3]王奕琳,孫雷,尹暉,等.牛奶中氯霉素殘留量測定能力驗(yàn)證結(jié)果分析[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào),2021,12(2):685-689.
[4]李紅霞,劉彤彤,項(xiàng)新華,等.化妝品中二苯酮-3檢測能力驗(yàn)證研究[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào),2021,12(4):1531-1537.
[5]劉梅,尹相余.淺談能力驗(yàn)證的選擇及結(jié)果應(yīng)用[J].中國檢驗(yàn)檢測,2021,29(2):98-100.
[6]王琳玲,王煥新,柴平海.動物源性食品中磺胺類藥物殘留能力驗(yàn)證關(guān)鍵技術(shù)點(diǎn)分析[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào),2019,10(10):3155-3158.
[7]Laura S,Sandra S,Lorena Z,et al.The role of the external quality assessment[J].Biochemia Medica,2010,20(2):160-164.
[8]李丹丹,宋慶軍,孫秋香,等.淺談檢測實(shí)驗(yàn)室如何開展能力驗(yàn)證工作[J].中國檢驗(yàn)檢測,2022,30(1):92-93.
[9]王鶴佳,孫雷,仲鋒,等.畜禽產(chǎn)品中獸藥和違禁添加物殘留檢測能力驗(yàn)證工作現(xiàn)狀、問題及建議[J].農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全,2014(4):44-46.
[10]李俊峰.檢測實(shí)驗(yàn)室日常檢測中的質(zhì)量控制探討[J].分析試驗(yàn)室,2007(增刊1):52-54.
[11]王璐,劉瀟威,彭祎,等.我國農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測機(jī)構(gòu)農(nóng)藥殘留檢測能力驗(yàn)證現(xiàn)狀分析[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境與發(fā)展,2012,29(3):90-92.
[12]李文杰,倪建秀,張聰,等.水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物殘留檢測能力驗(yàn)證[J].現(xiàn)代食品,2021(5):202-208.
[13]唐亞利,劉彬麗,金紹明,等.肉糜中苯甲酸、山梨酸測定能力研究[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào),2019,10(1):95?101.
[14]張艷麗,劉宏偉,宋保軍,等.農(nóng)產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證過程中的質(zhì)量控制[J].分析儀器,2013(6):130?134.
[15]段玉林,陳櫟巖,寧方堯,等.肉制品中重金屬及獸藥殘留現(xiàn)狀研究[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào),2021,12(8):3008-3015.
[16]張永新,劉恬.豬肉及其制品中獸藥殘留的分析與控制[J].肉類工業(yè),2020(11):36-39.
[17]徐玲萍.畜產(chǎn)品中磺胺類藥物殘留檢測能力驗(yàn)證結(jié)果分析[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào),2018,9(20):5517-5520.
[18]侯慧文.我國現(xiàn)階段獸藥殘留現(xiàn)狀及危害[J].畜牧獸醫(yī)科學(xué),2021(7):153-154.
[19]任丹丹,謝云峰,李少暉,等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定畜禽肉中17種磺胺類藥物殘留[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào),2018,9(4):858-863.
[20]靳紅果,張瑞,王穎,等.我國豬肉中磺胺類藥物的殘留特征分析[J].肉類研究,2017,31(10):31-35.
[21]段嫚雷,李蘭英,李杰,等.豬肉中磺胺類獸藥殘留基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)高準(zhǔn)確度定值方法[J].化學(xué)試劑,2019,41(3):263-269.
[22]張偉,張明霞,艾霞,等.高效液相色譜法同時測定豬肌肉中氟喹諾酮類和磺胺類藥物殘留[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2014(7):185-188.
[23]舒曉蓮,陳鷹,李杰.水產(chǎn)品中磺胺類藥物殘留量實(shí)驗(yàn)室間檢測能力的驗(yàn)證結(jié)果與分析[J].理化檢驗(yàn)(化學(xué)分冊),2018,54(11):1281-1286.
[24]馬立利,劉聰,高麗娟,等. 動物源性食品中獸藥殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)解析與能力驗(yàn)證工作探討[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào),2019,10(11):3236-3248.
[25]田雪珍,郭建幫,龐培.人畜共患病、獸藥殘留對動物性食品安全的影響[J].廣東畜牧獸醫(yī)科技,2016,41(6):27-30.
[26]宋博利.動物性食品中抗生素殘留及其控制對策[J].中國農(nóng)業(yè)信息,2014(11):82.
[27]彭椒華,方麗建.豬肉中5種磺胺類藥物殘留量測定:超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[J].畜牧獸醫(yī)科學(xué)(電子版),2020(9):1-3.
[28]中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部,國家衛(wèi)生健康委員會,國家市場監(jiān)督管理總局.食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量:GB 31650—2019[S]北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2019.
[29]高鵬飛,龔?fù)?,湯亞云,?牛、羊肉和牛、羊奶中獸藥殘留現(xiàn)狀分析及檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J].中國獸藥雜質(zhì),2022,56(1):77-85.
[30]李倩,王甲,張玉潔,等.動物性食品中氟喹諾酮類藥物殘留檢測方法研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào),2021,12(8):3016-3022.
[31]潘明飛,王俊平,方國臻,等.食品中農(nóng)獸藥殘留檢測新技術(shù)研究進(jìn)展[J].食品科學(xué),2014,35(15):277-282.
[32]王綪,金鑰,楊毅青,等.動物食品氟喹諾酮類藥殘檢測國內(nèi)外研究現(xiàn)狀[J].食品研究與開發(fā),2014,35(16):121-125.
[33]陳振桂,占春瑞,郭平,等.高效液相色譜法同時測定水產(chǎn)品中13種磺胺類藥物殘留的研究[J].食品科學(xué),2007(10):448-451.
[34]劉怡君,邊海濤,曲寶成,等.食品中磺胺類藥物檢測方法研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào),2017,8(9):3420-3430.
[35]楊坤,劉桂瓊,管春成,等.通過型固相萃取凈化-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測雞肉中23種磺胺類藥物殘留[J].食品工業(yè)科技,2021,42(18):284-291.
[36]王宏宇,武云龍,趙棟皓,等.固相萃取-超高效液相色譜法同時測定豬肉中22種磺胺類藥物殘留[J].中國動物檢疫,2021,38(7):105-111.