牛二利，吳文俊，王偉，李雪，朱申龍

（1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，浙江 杭州 310021；2.甘肅省林業(yè)科學(xué)研究院，甘肅 蘭州 730020）

油橄欖Olea europaea學(xué)名木樨欖，為木犀科Oleaceae木犀欖屬Olea常綠小喬木，是世界著名的果、油兼用經(jīng)濟(jì)林木，與油茶Camellia oleifera、油棕Elaeis guineensis和椰子Cocos nucifera并稱為世界四大木本油料樹(shù)種[1-2]。新鮮的油橄欖果實(shí)經(jīng)低溫冷榨方式獲取的橄欖油，富含單不飽和脂肪酸和抗氧化物等多種生物活性物質(zhì)，具有重要的營(yíng)養(yǎng)和醫(yī)療保健作用，深受消費(fèi)者青睞[3-5]。目前，除西班牙、意大利和希臘等傳統(tǒng)栽培國(guó)外，世界上已有40多個(gè)國(guó)家開(kāi)始推廣油橄欖[6-7]。中國(guó)于1964年開(kāi)始大規(guī)模引進(jìn)油橄欖，主要分布在甘肅、四川、云南等地[8-10]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，當(dāng)前全國(guó)橄欖油生產(chǎn)量約為國(guó)內(nèi)橄欖油消費(fèi)總量的10%，自主產(chǎn)能嚴(yán)重不足[11]。

油橄欖具有喜溫、喜光、耐旱、耐瘠和抗風(fēng)等特性，適宜在我國(guó)南方低丘緩坡上推廣種植[6,12-13]。然而，我國(guó)南方多為酸性紅壤，與油橄欖主產(chǎn)區(qū)中性偏堿的土壤條件存在差異，多數(shù)國(guó)際主栽品種對(duì)我國(guó)的環(huán)境呈現(xiàn)一定的不適應(yīng)性，發(fā)根少、葉片壽命短等現(xiàn)象普遍存在，大大阻礙了油橄欖在我國(guó)的進(jìn)一步推廣[14]。油橄欖品種共有2 000余個(gè)，其中主要栽培種有320個(gè)[10-11]，但酸性脅迫是其引種我國(guó)后遇到的新問(wèn)題，相關(guān)研究甚少，生產(chǎn)上暫采用深施石灰的方法改良土壤酸堿度[12]，但鑒于投資成本、生產(chǎn)效益和生態(tài)等的可持續(xù)問(wèn)題，篩選耐酸性強(qiáng)的優(yōu)良品種是最經(jīng)濟(jì)有效的解決方案。

目前，油橄欖采用的育苗方式有扦插、嫁接和種子繁殖等。其中，扦插繁殖是主要方式[12]，對(duì)于產(chǎn)量高、品質(zhì)好但營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)狀況不佳的品種則多采用嫁接繁殖的方式，既可以縮短開(kāi)花結(jié)果周期，又可以解決抗性差的問(wèn)題[15]。目前，意大利、西班牙和阿根廷等國(guó)使用同一品種的實(shí)生苗嫁接無(wú)性系來(lái)繁殖苗木，大大提高了接穗的適應(yīng)性，使油橄欖種植面積迅速擴(kuò)大[16]。我國(guó)的育種專家們也對(duì)油橄欖有效砧木的選擇進(jìn)行了一系列的探索。研究發(fā)現(xiàn)，相較于白蠟Fraxinus chinensls、小葉女貞Ligustrum quihoui等，以‘佛奧’O.europaea‘Frantoio’和銹鱗木犀欖O.europaeasubsp.cuspidata為砧木的嫁接方式，其苗木的成活率和生長(zhǎng)狀況都較好[17-21]。同時(shí)，一些無(wú)性系砧木如‘城固31’‘城固32’‘九峰1’‘九峰4’等因?qū)Ξ?dāng)?shù)氐沫h(huán)境條件適應(yīng)性好、嫁接成活率高，已成為甘肅、四川等地嫁接砧木的主要品種[12]。進(jìn)一步研究表明，油橄欖與木犀科非木犀欖屬植物間嫁接多數(shù)不親和，與木樨欖屬非油橄欖種間嫁接雖成活率高，但常出現(xiàn)砧木、接穗生長(zhǎng)速度不一致的現(xiàn)象，而油橄欖品種間嫁接則具有較好的應(yīng)用價(jià)值[12]。由此，本研究對(duì)引進(jìn)的15個(gè)油橄欖品種進(jìn)行了耐酸性篩選，并通過(guò)不同嫁接組合比較試驗(yàn)，選擇成活率高的嫁接組合進(jìn)行大田試驗(yàn)，以期為油橄欖在我國(guó)南方紅壤區(qū)的進(jìn)一步繁育提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本研究以15個(gè)油橄欖品種為耐酸性試驗(yàn)材料（表1），分別為‘豆果’O.europaea‘Arbequina’、‘城固32’O.europaea‘Chenggu32’、‘科拉蒂’O.europaea‘Coratina’、‘費(fèi)切羅’O.europaea‘Fecciaro’、‘佛奧’、‘佛選’O.europaea‘Frantoio selezione’、‘I79’O.europaea‘I79’、‘柯基’O.europaea‘Koroneiki’、‘萊星’O.europaea‘Leccino’、‘尼Ⅰ’O.europaea‘Nichiskii Ⅰ’、‘貝?諾切拉’O.europaea‘Nocellara del belice’、‘諾洽蘭’O.europaea‘Nociara’、‘塔吉’O.europaea‘Taggiasca’、‘崢云’O.europaea‘Zen’、‘中欖’O.europaea‘Zhonglan’，其中，‘科拉蒂’‘費(fèi)切羅’‘佛奧’‘佛選’‘I79’‘萊星’‘貝?諾切拉’‘諾洽蘭’‘塔吉’和‘崢云’來(lái)源于意大利，‘城固32’和‘中欖’來(lái)源于中國(guó)，‘豆果’‘柯基’和‘尼Ⅰ’分別來(lái)源于西班牙、希臘和阿塞拜疆。所試材料均保存于浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院油橄欖種質(zhì)資源圃（杭州）內(nèi)，樹(shù)齡為5～ 6年，營(yíng)養(yǎng)狀況良好。

表1 油橄欖耐酸性試驗(yàn)品種及其來(lái)源Table 1 Cultivars and provenance of tested O.europaea

1.2 品種扦插生根率比較和耐酸性鑒定

1.2.1 扦插方法與生根率統(tǒng)計(jì) 品種扦插生根率和耐酸性鑒定均在浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院油橄欖種質(zhì)資源圃（杭州）完成。2012年11月下旬，選取各品種母樹(shù)上徑粗為0.2～ 0.4 cm的一年生半木質(zhì)化枝條，剪成長(zhǎng)度為8～ 10 cm的枝段作為插條，苗床基質(zhì)為珍珠巖，在扦插前2～ 3 d用0.3%的高錳酸鉀消毒，苗床設(shè)置在大棚中，單個(gè)苗床再用薄膜小拱棚覆蓋以提高苗床的溫度。各品種總扦插苗數(shù)量為500～ 1 000株。3個(gè)月后，統(tǒng)計(jì)各品種的生根苗數(shù)量，并按下式計(jì)算生根率：生根率=生根苗數(shù)量/總扦插苗數(shù)量×100%。

1.2.2 耐酸性水培試驗(yàn)鑒定 次年4月上旬，選擇各品種根系長(zhǎng)度為2～ 3 cm的扦插苗30株，移至pH為5.0的營(yíng)養(yǎng)液（表2）中進(jìn)行水培試驗(yàn)，并加入濃度為50 μmol·L-1鋁離子以鑒定不同品種的耐酸性。試驗(yàn)在26°C的恒溫光照培養(yǎng)室（16 h光照、8 h黑暗）中進(jìn)行，每周更換一次營(yíng)養(yǎng)液，培養(yǎng)1個(gè)月后測(cè)定各品種的新生根長(zhǎng)。其中，水培營(yíng)養(yǎng)液在霍格蘭營(yíng)養(yǎng)液的基礎(chǔ)上稍作修改[22]，見(jiàn)表2，并用NaOH或者HCl調(diào)節(jié)pH值。

表2 營(yíng)養(yǎng)液組成成分Table 2 Composition of nutrient solution

1.2.3 耐酸性盆栽試驗(yàn)鑒定 6月下旬，待扦插苗長(zhǎng)出2片新葉后，選擇各品種生長(zhǎng)一致的扦插苗30株移至營(yíng)養(yǎng)缽進(jìn)行盆栽試驗(yàn)。試驗(yàn)在大棚中進(jìn)行，于每日10:00—15:00進(jìn)行通風(fēng)和遮陰，每周澆水1～ 2次。其中，營(yíng)養(yǎng)缽為塑料材質(zhì)，高15 cm、口徑10 cm，每盆裝自然土約400 g，自然土取自浙江省武義縣，實(shí)測(cè)土壤pH=3.9。3個(gè)月后，測(cè)定各品種的成活率及苗高，按下式計(jì)算苗高相對(duì)生長(zhǎng)量：苗高相對(duì)生長(zhǎng)量=最終平均苗高－初始平均苗高。

1.3 嫁接試驗(yàn)和性狀調(diào)查

1.3.1 嫁接親和力比較 2014年3月，以‘崢云’和‘中欖’為砧木，以‘費(fèi)切羅’‘佛選’‘塔吉’‘佛奧’‘豆果’和‘尼Ⅰ’6個(gè)品種為接穗，在浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院油橄欖種質(zhì)資源圃（杭州）以嵌芽接方式完成各種組合的嫁接。砧木為2年生扦插苗，扦插前統(tǒng)一截干至高20 cm，接穗剪自各品種母樹(shù)一年生枝條，長(zhǎng)度為2～3 cm，保留2個(gè)芽，每個(gè)砧木嫁接1個(gè)接穗，每個(gè)組合嫁接30～ 100株。3個(gè)月后，統(tǒng)計(jì)嫁接成活率，并測(cè)量接穗高。

1.3.2 接穗葉片和光合分析 2016年3月，將嫁接苗移栽至田間，以同齡扦插苗為對(duì)照進(jìn)行不同嫁接組合的比較試驗(yàn)。其中，‘佛選’/‘崢云’、‘佛奧’/‘崢云’、‘佛選’/‘中欖’、‘佛奧’/‘中欖’（接穗/砧木）4個(gè)嫁接組合移栽至杭州市淳安縣試驗(yàn)基地，該地位于浙江省西部，為中低山脈，紫色土壤，排水良好，肥力中等，酸性強(qiáng)（pH=5.0～ 5.3）?！构?‘中欖’、‘尼Ⅰ’/‘中欖’2個(gè)嫁接組合移栽至麗水市松陽(yáng)縣試驗(yàn)基地，該地位于浙江省西南部山區(qū)，試驗(yàn)地自北向南呈緩坡下降，排水良好，土壤為黃筋泥，肥力差，酸性強(qiáng)（pH=4.3～ 4.5）。

相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定：（1）光合作用相關(guān)指標(biāo)和葉綠素含量測(cè)定。2018年9月，選擇晴朗天氣的10:00—12:00，對(duì)各嫁接苗及其對(duì)照（接穗苗，下同）葉片的光合作用相關(guān)指標(biāo)和葉綠素含量進(jìn)行測(cè)定。利用LI6400光合儀（LI-COR，美國(guó)）和葉綠素計(jì)SPAD-502Plus（柯尼卡美能達(dá)，中國(guó)）測(cè)定植物葉片的光合作用相關(guān)指標(biāo)和葉綠素含量，每個(gè)組合和對(duì)照品種固定3株生長(zhǎng)正常樣株，從每個(gè)樣株的向陽(yáng)面中隨機(jī)選取一年生枝條5個(gè)，再?gòu)拿總€(gè)選好的枝條中上部選取3片完全功能葉片進(jìn)行測(cè)定。（2）葉面積和葉片鮮質(zhì)量測(cè)定。采用超薄平臺(tái)式掃描儀LED InDirect Exposure 110（佳能，香港）和電子天平分別測(cè)定葉面積和葉片鮮質(zhì)量，每個(gè)組合測(cè)定3株樣樹(shù)，從每個(gè)樣株的向陽(yáng)面中隨機(jī)選取一年生枝條2個(gè)，再?gòu)拿總€(gè)選好的枝條中上部選取10片完全功能葉片進(jìn)行測(cè)定。（3）節(jié)間距測(cè)定。從每個(gè)組合中選取3株樣樹(shù)，從每株樣樹(shù)的向陽(yáng)面選取當(dāng)年新枝5個(gè)，再?gòu)拿總€(gè)枝條的中上部隨機(jī)選取5個(gè)節(jié)間進(jìn)行測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)處理和分析

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及顯著性分析采用Microsoft Excel 2010和SPSS 13.0進(jìn)行，方差分析采用單因素分析法。

2 結(jié)果與分析

2.1 油橄欖耐酸砧木品種篩選

2.1.1 品種扦插生根力評(píng)價(jià) 由15個(gè)油橄欖品種嫩枝扦插3個(gè)月后的生根情況表明（圖1），15個(gè)品種的扦插生根率均介于22.5%～ 95.1%，平均為65.1%。其中，‘中欖’和‘尼Ⅰ’的生根力較強(qiáng)，其生根率分別達(dá)95.1%和94.7%，屬極易繁殖品種；‘佛奧’‘I79’‘豆果’‘崢云’‘塔吉’‘萊星’和‘貝?諾切拉’的生根率介于60.4%～ 88.7%，為容易繁殖品種；生根力較差的品種為‘諾洽蘭’‘柯基’‘費(fèi)切羅’‘佛選’和‘城固32’，其生根率平均為43.9%，為不易繁殖品種，‘科拉蒂’的生根力差，其生根率僅為22.5%，為極難繁殖品種。

圖1 不同油橄欖品種生根率比較Figure 1 Rooting rate of different cultivars

2.1.2 品種耐酸性評(píng)價(jià) 為了選擇適應(yīng)南方酸性土壤種植的油橄欖砧木品種，對(duì)各品種進(jìn)行耐酸性水培試驗(yàn)。由圖2表明，培養(yǎng)1個(gè)月后，各參試品種的成活率均為100%，新生根總長(zhǎng)介于12.69～ 31.22 cm，平均為19.03 cm。其中，‘中欖’的新生根總長(zhǎng)最長(zhǎng)，為31.22 cm，極顯著高于其他品種的（P<0.01），顯示出對(duì)酸鋁培養(yǎng)液較強(qiáng)的適應(yīng)性；其次為‘城固32’‘崢云’‘塔吉’和‘佛奧’，其新生根總長(zhǎng)分別為22.07、21.80、21.74和21.24 cm；‘柯基’的新生根總長(zhǎng)僅為12.69 cm，居所有參試品種的末位。

圖2 不同油橄欖品種酸性營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)1個(gè)月后新生根比較Figure 2 New roots of different cultivars after 1-month cultivation in acidic nutrient solution

同時(shí)，以酸性土壤（pH=3.9）對(duì)上述15個(gè)品種進(jìn)行盆栽試驗(yàn)，培育3個(gè)月后（圖3），發(fā)現(xiàn)各品種的成活率為56.7%～ 100%，平均為89.8%。其中，‘中欖’‘崢云’‘萊星’和‘諾洽蘭’的成活率均達(dá)100%，而‘佛選’‘塔吉’和‘佛奧’的成活率都低于80%，平均為67.5%，其余品種的成活率介于82.1%～ 96.7%。各參試品種的苗高相對(duì)生長(zhǎng)量平均為7.21 cm（1.97～ 15.38 cm），其中‘中欖’的苗高相對(duì)生長(zhǎng)量最大，為15.38 cm，‘塔吉’‘佛奧’‘佛選’和‘柯基’的苗高相對(duì)生長(zhǎng)量較小，介于1.97～ 4.03 cm，其余品種的苗高相對(duì)生長(zhǎng)量為中等，其苗高相對(duì)生長(zhǎng)量平均為8.10 cm。

圖3 不同油橄欖品種酸土培養(yǎng)3個(gè)月后成活率和苗高生長(zhǎng)量比較Figure 3 Survival rate and height increment of different cultivars after 3-month cultivation in acidic soil

2.2 不同接穗/砧木組合比較

2.2.1 不同嫁接組合成活率分析 以‘崢云’和‘中欖’兩個(gè)耐酸性和生根力強(qiáng)的品種為砧木，于2014年3月分別嫁接‘費(fèi)切羅’‘佛選’‘塔吉’‘佛奧’‘豆果’和‘尼Ⅰ’6個(gè)品種的接穗，3個(gè)月后統(tǒng)計(jì)并比較分析各嫁接組合的成活率，見(jiàn)表3。以‘崢云’為砧木，其不同組合嫁接成活率介于22.22%～ 82.00%，平均為61.52%，其中，以‘佛奧’/‘崢云’的嫁接成活率最高（82.00%），成活率最低的嫁接組合是‘尼Ⅰ’/‘崢云’（22.22%）；以‘中欖’為砧木的嫁接成活率介于27.78%～ 84.38%，平均為58.15%，其中，以‘塔吉’/‘中欖’的嫁接成活率最高，達(dá)84.38%，‘尼Ⅰ’/‘中欖’的嫁接成活率最低，僅為27.78%。

表3 不同嫁接組合油橄欖苗成活率和接穗高度比較Table 3 Survival rates and of scions height of different grafting combinations

同一接穗品種其嫁接成活率因砧木品種不同而異，以‘佛奧’‘費(fèi)切羅’或‘豆果’為接穗，以‘崢云’為砧木的嫁接苗的嫁接成活率高于以‘中欖’為砧木的嫁接苗的；而當(dāng)接穗為‘佛選’‘塔吉’或‘尼Ⅰ’時(shí)，則以‘中欖’為砧木的嫁接苗的成活率高于以‘崢云’為砧木的嫁接苗的成活率。

2.2.2 不同嫁接組合接穗生長(zhǎng)量比較 由表3可知，不同組合嫁接苗的接穗生長(zhǎng)量差異顯著。以‘崢云’為砧木的嫁接組合，接穗平均高度為30.40 cm，其中，‘佛奧’/‘崢云’組合的接穗高度最高，為39.08 cm，其次是‘費(fèi)切羅’/‘崢云’和‘豆果’/‘崢云’組合，其接穗高度分別為36.08 cm和34.58 cm，最低的是‘尼Ⅰ’/‘崢云’組合，其接穗高度，為20.00 cm。而以‘中欖’為砧木的嫁接組合，各組合接穗的平均高度為17.26 cm，其中，以‘佛奧’/‘中欖’組合的接穗高度最高，為27.03 cm，其次是‘塔吉’/‘中欖’組合，為20.24 cm，‘佛選’/‘中欖’組合的接穗高度最低，為12.09 cm?？傮w而言，以‘中欖’為砧木的嫁接苗的接穗高度均顯著低于以‘崢云’為砧木的相應(yīng)組合的（P<0.05），表明以‘崢云’為砧木的嫁接苗生長(zhǎng)速度較快。

2.3 嫁接對(duì)接穗營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)的影響

2.3.1 嫁接對(duì)接穗葉片生長(zhǎng)的影響 為研究嫁接對(duì)接穗營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)的影響，2016年3月，將‘佛選’/‘崢云’、‘佛奧’/‘崢云’、‘佛選’/‘中欖’、‘佛奧’/‘中欖’4個(gè)組合的嫁接苗和‘豆果’/‘中欖’、‘尼Ⅰ’/‘中欖’2個(gè)組合的嫁接苗分別移栽至土壤pH=5.0～ 5.3和pH=4.3～ 4.5的大田中，定植2年后測(cè)定各組合嫁接苗的葉片生長(zhǎng)和光合效應(yīng)等性狀。對(duì)砧木為‘崢云’和‘中欖’、接穗為‘佛奧’和‘佛選’4個(gè)組合嫁接苗的葉片性狀調(diào)查發(fā)現(xiàn)，除葉片鮮質(zhì)量外，嫁接苗的葉長(zhǎng)、葉寬、葉面積和節(jié)間距大小與其相應(yīng)接穗品種的扦插苗相比均有顯著的差異（P<0.05）（圖4、表4）?！疬x’/‘崢云’嫁接苗的平均葉寬為13.90 mm，較接穗品種‘佛選’的葉寬縮小5.70%；葉片長(zhǎng)寬比為3.74，較‘佛選’增加6.55%；葉面積為5.15 cm2，較‘佛選’縮小7.04%；節(jié)間距為1.85 cm，較‘佛選’縮小29.92%。‘佛選’/‘中欖’的葉長(zhǎng)為49.74 mm，較‘佛選’縮小3.88%；葉寬為13.65 mm，較‘佛選’縮小7.21%，葉片長(zhǎng)寬比為3.77，較‘佛選’增加7.41%，葉面積為4.83 cm2，較‘佛選’縮小12.82%，節(jié)間距為2.06 cm，較‘佛選’縮小21.97%。

圖4 不同組合嫁接苗葉片的比較Figure 4 Scion leaves of different grafting combinations

表4 不同嫁接組合對(duì)油橄欖葉片生長(zhǎng)的影響Table 4 Effect of different grafting combinations on leaf growth of seedlings

同樣，‘佛奧’/‘崢云’嫁接苗的葉長(zhǎng)、葉寬、葉面積和節(jié)間距分別為45.30 cm、12.69 cm、4.53 cm2和2.23 cm，與其接穗品種‘佛奧’相比，分別縮小5.64%、4.66%、4.83%和10.08%，葉片長(zhǎng)寬比為3.56，比‘佛奧’增加6.27%?！饖W’/‘中欖’嫁接苗的葉長(zhǎng)、葉寬、葉面積和節(jié)間距分別為42.33 cm、12.51 cm、4.20 cm2和2.41 cm，較‘佛奧’分別縮小11.83%、6.01%、11.76%和2.82%，葉片長(zhǎng)寬比為3.52，較‘佛奧’增加了5.07%?？傮w來(lái)說(shuō)，以‘崢云’和‘中欖’為砧木嫁接后，接穗葉片的葉長(zhǎng)、葉寬、葉面積和節(jié)間距均趨向變小，且對(duì)于同一接穗以‘中欖’為砧木的嫁接組合變化幅度較‘崢云’更為顯著。

對(duì)以‘中欖’為砧木的另外2個(gè)嫁接組合‘豆果’/‘中欖’和‘尼Ⅰ’/‘中欖’的葉片性狀分析表明，與接穗品種相比，除葉片鮮質(zhì)量不變、葉片長(zhǎng)寬比有所減小外，其葉長(zhǎng)、葉寬、葉面積和節(jié)間距與其接穗品種的相應(yīng)指標(biāo)相比也都有不同程度的變小，進(jìn)一步驗(yàn)證了砧木品種對(duì)接穗葉片和節(jié)間距等性狀的影響（圖4、表4）?！构?‘中欖’嫁接苗的葉長(zhǎng)為37.83 mm，較接穗品種‘豆果’縮小9.24%，葉寬為11.38 cm，較‘豆果’縮小12.7%，葉片長(zhǎng)寬比為3.46，較‘豆果’縮小11.73%，葉面積為3.38 cm2，較‘豆果’縮小6.11%，節(jié)間距為1.58 cm，較‘豆果’縮小11.73%?！幄瘛?‘中欖’嫁接苗的葉長(zhǎng)、葉寬、葉片長(zhǎng)寬比、葉面積和節(jié)間距分別為30.48 cm、10.50 cm、2.69、2.65 cm2和1.70 cm，較‘尼Ⅰ’的相應(yīng)指標(biāo)分別縮小16.47%、1.04%、6.92%、14.24%和5.03%。

2.3.2 嫁接對(duì)接穗光合效應(yīng)的影響 比較以‘崢云’和‘中欖’為砧木、‘佛奧’和‘佛選’為接穗的嫁接苗葉片的光合效應(yīng)顯示（表5），除葉片的葉綠素含量沒(méi)有顯著變化外，嫁接苗葉片的其他光合作用相關(guān)指標(biāo)與相應(yīng)的接穗品種苗相比呈現(xiàn)不同的變化趨勢(shì)。具體來(lái)看，采用同一品種的接穗，分別以‘崢云’和‘中欖’為砧木嫁接后苗木葉片的光合效應(yīng)不同?！疬x’/‘崢云’嫁接苗葉片的凈光合速率、氣孔導(dǎo)度、蒸騰速率分別為4.518 μmol·m-2·s-1、0.004 mol·m-2·s-1和0.185 mmol·m-2·s-1，均顯著低于接穗品種‘佛選’的相應(yīng)指標(biāo)（P<0.05），分別降低了15.51%、50.00%和36.64%，水分利用率則由19.127 μmol·mmol-1（‘佛選’）升高至26.294 μmol·mmol-1，提高了37.47%?！疬x’/‘中欖’嫁接苗葉片的蒸騰速率為0.234 mmol·m-2·s-1，較‘佛選’降低了19.86%；水分利用率為25.358 μmol·mmol-1，較‘佛選’提高了32.58%；其余性狀與‘佛選’間沒(méi)有顯著變化?！饖W’/‘崢云’嫁接苗葉片的光合效應(yīng)與接穗品種‘佛奧’相比沒(méi)有發(fā)生顯著變化?！饖W’/‘中欖’嫁接苗葉片的凈光合速率、光能利用率、氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率分別為4.829 μmol·m-2·s-1、0.010 μmol·mmol-1、0.007 mol·m-2·s-1和0.253 mmol·m-2·s-1，分別較‘佛奧’的相應(yīng)指標(biāo)提高了44.54%、42.86%、75.00%和61.15%，而水分利用率則為16.936 μmol·mmol-1，較‘佛奧’下降了20.95%。

表5 嫁接對(duì)油橄欖葉片光合作用的影響Table 5 Effect of different grafting combinations on photosynthesis of seedlings

觀測(cè)以‘中欖’為砧木的兩個(gè)嫁接組合‘豆果’/‘中欖’和‘尼Ⅰ’/‘中欖’嫁接苗葉片的光合效應(yīng)顯示，‘豆果’/‘中欖’嫁接苗的蒸騰速率為1.909 mmol·m-2·s-1，較‘豆果’降低了8.53%，其余指標(biāo)二者間無(wú)顯著差異?！幄瘛?‘中欖’嫁接苗葉片的氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率分別為0.025 mol·m-2·s-1和2.067 mmol·m-2·s-1，較‘尼Ⅰ’分別降低了37.50%和8.70%，水分利用率為0.006 μmol·mmol-1，較‘尼Ⅰ’增加了20%。

3 結(jié)論與討論

3.1 油橄欖耐酸砧木鑒定

從起源地小亞細(xì)亞到主產(chǎn)區(qū)地中海沿岸，油橄欖經(jīng)歷6 000余年的馴化和自然選擇后形成了耐瘠、耐旱、適宜中性至微堿性土壤的生長(zhǎng)特性[12]。因此，當(dāng)引入我國(guó)南方紅壤區(qū)種植時(shí)，酸性土壤脅迫致使多數(shù)油橄欖品種營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)弱、落葉嚴(yán)重、只開(kāi)花不結(jié)果[12]。當(dāng)前，國(guó)際上對(duì)于油橄欖耐酸種質(zhì)的評(píng)價(jià)與應(yīng)用尚未開(kāi)展系統(tǒng)性的研究，油橄欖數(shù)據(jù)庫(kù)（http://www.Oleadb.it/）中也沒(méi)有對(duì)品種耐酸性狀的鑒定記錄，暫無(wú)明確的鑒定方法和具體的耐酸品種可作參考。油橄欖屬于常綠小喬木，生長(zhǎng)周期長(zhǎng)，通過(guò)大田移栽鑒定耐酸品種不可控因素多且占地面積大、耗時(shí)費(fèi)力。本研究通過(guò)對(duì)不同品種的扦插苗進(jìn)行酸性營(yíng)養(yǎng)液脅迫處理，同時(shí)借助酸性土壤進(jìn)行盆栽試驗(yàn)，并分別以脅迫處理1個(gè)月后的根系相對(duì)生長(zhǎng)量及3個(gè)月后的苗木成活率和苗高相對(duì)生長(zhǎng)量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，明確了15個(gè)品種的耐酸性差異，篩選出耐酸優(yōu)質(zhì)砧木品種‘崢云’和‘中欖’，并為大規(guī)模評(píng)價(jià)油橄欖耐酸性奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。

3.2 油橄欖優(yōu)異嫁接組合篩選

嫁接是果樹(shù)常見(jiàn)的繁殖方法之一，也是果樹(shù)良種推廣應(yīng)用的重要手段[23-24]。趙麗芳等[24]通過(guò)高接換優(yōu)方法，以‘佛奧’為砧木、10個(gè)不同油橄欖品種為接穗進(jìn)行嫁接試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)油橄欖不同品種間的親和力差異較大。本試驗(yàn)中，以‘崢云’為砧木嫁接‘佛奧’‘費(fèi)切羅’和‘豆果’3個(gè)品種接穗的成活率高于以‘中欖’為砧木、相同接穗的嫁接組合；而以‘中欖’為砧木嫁接‘佛選’‘塔吉’和‘尼Ⅰ’的成活率高于以‘崢云’為砧木的嫁接組合，表明同一砧木品種與不同接穗品種嫁接成活率不一，同一接穗品種與不同砧木品種的嫁接成活率也不同，其內(nèi)在遺傳因素有待進(jìn)一步探究。此外，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，對(duì)于‘佛奧’，雖以‘崢云’和‘中欖’為砧木嫁接后成活率有所差異，但分別達(dá)到82.00%和73.81%，因此，這兩種嫁接組合均可加以利用。

3.3 嫁接對(duì)油橄欖接穗營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)的影響

油橄欖砧木和接穗之間的互作效應(yīng)已有報(bào)道。Nardini等[26]和Gasco等[27]發(fā)現(xiàn)‘萊星’有生長(zhǎng)旺盛（LW）和矮化（LD）2種砧木類型，以LD為砧木嫁接LW后接穗葉片的葉面積縮小、水勢(shì)增大。Tous等[28]通過(guò)對(duì)比不同砧木品種嫁接‘Arbequina IRTA-i?18?’發(fā)現(xiàn)，以‘Arbosana’‘Corbella’和‘Limoncillo’為砧木可以有效降低接穗的生長(zhǎng)勢(shì)，且果實(shí)性狀沒(méi)有發(fā)生變化。本試驗(yàn)比較了‘中欖’和‘崢云’2個(gè)砧木品種對(duì)不同油橄欖品種接穗的影響，嫁接后接穗高度、節(jié)間距和葉片大小均不同程度地變小，但相同接穗以‘中欖’為砧木比以‘崢云’為砧木的嫁接組合變化幅度更大，表明以‘崢云’為砧木的嫁接苗的生長(zhǎng)速率較以‘中欖’為砧木的嫁接苗更快。對(duì)嫁接苗葉片光合指標(biāo)的分析結(jié)果表明，嫁接對(duì)光合作用相關(guān)特征的影響則隨嫁接組合的不同而異，除‘佛選’/‘崢云’和‘佛奧’/‘中欖’嫁接苗的凈光合速率分別較接穗品種變小和變大外，其余組合嫁接苗的凈光合作用均無(wú)變化。在不影響或提高光合作用的前提下，氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率的減弱可以有效提高水分利用率，并進(jìn)一步提升油橄欖的抗旱性。而對(duì)于嫁接對(duì)接穗生殖生長(zhǎng)階段產(chǎn)量和含油率等的影響，需待苗木進(jìn)入初果期后進(jìn)行跟蹤調(diào)查。

本試驗(yàn)中‘中欖’和‘崢云’2個(gè)品種的生根力和耐酸性強(qiáng)，可用作酸性土壤地區(qū)的優(yōu)質(zhì)砧木；在所試驗(yàn)組合范圍內(nèi)，嫁接組合‘佛奧’/‘崢云’、‘費(fèi)切羅’/‘崢云’、‘豆果’/‘崢云’、‘塔吉’/‘中欖’、‘佛選’/‘中欖’、‘尼Ⅰ’/‘中欖’、‘佛奧’/‘中欖’適宜在我國(guó)南方紅壤區(qū)推廣。

致謝：感謝淳安千島湖愛(ài)葛農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)有限公司和浙江綠泉農(nóng)業(yè)科技開(kāi)發(fā)有限公司在油橄欖栽培等方面給予的幫助。