陳東亮, 鐘 楚, 密 克, 簡(jiǎn)少芬, 繆劍華, 韋坤華*, 李林軒, 郭曉云
(1.廣西壯族自治區(qū)藥用植物園 廣西藥用資源保護(hù)與遺傳改良重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/廣西壯族自治區(qū)中藥資源智慧創(chuàng)制工程研究中心, 廣西 南寧 530023; 2.廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 經(jīng)濟(jì)作物研究所, 廣西 南寧 530007)
金毛狗脊〔Cibotiumbarometz(L.)J. Sm.〕別名金毛狗、金毛狗蕨、金狗脊、金毛獅子、猴毛頭、黃狗頭等,為蚌殼蕨科(Dicksoniaceae)金毛狗屬(Cibotium)多年生高大樹狀蕨類藥用植物[1]。其干燥的根莖即為中藥材狗脊(Rhizomacibotii),具有祛風(fēng)濕、補(bǔ)肝腎、強(qiáng)腰膝之功效,用于風(fēng)濕痹痛,腰膝酸軟,下肢無(wú)力等[2]。狗脊始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》[3],列為中品,記載為“味苦平,主腰背強(qiáng)、關(guān)機(jī)緩急、周痹、寒濕膝痛,頗利老人,一名百枝,生川谷”。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,金毛狗脊具有止血、抑菌、防治骨質(zhì)疏松、抗癌、保肝、抗風(fēng)濕、鎮(zhèn)痛等藥理活性[4]。除此之外,金毛狗脊還具有園林觀賞和食用價(jià)值[5-6]。由于金毛狗脊極大的利用價(jià)值,近年來(lái)對(duì)其野生資源的開(kāi)發(fā)備受關(guān)注,但在利用方面忽略金毛狗脊生長(zhǎng)繁殖及分布規(guī)律,呈無(wú)序亂挖現(xiàn)狀;加之金毛狗脊自身的內(nèi)部致瀕因子,導(dǎo)致其野生資源量正在不斷減少,已被列入《瀕危野生動(dòng)植物種國(guó)際貿(mào)易公約(附錄II)》(CITES 2016),同時(shí)被《國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)野生植物名錄(第一批)》列為國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物[7]。說(shuō)明目前對(duì)金毛狗脊植物資源的開(kāi)發(fā)和利用缺乏科學(xué)指導(dǎo),且保育意識(shí)淡薄。因此,加強(qiáng)金毛狗脊的保育研究,了解其資源現(xiàn)狀和瀕危原因,掌握其生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律、推動(dòng)金毛狗脊資源的遷地保育和回歸保育,減少對(duì)其野生資源的破壞,避免其資源枯竭,對(duì)實(shí)現(xiàn)金毛狗脊資源的可持續(xù)利用具有重要意義。
金毛狗脊主產(chǎn)于我國(guó)云南、貴州、四川南部、廣西、廣東、福建、臺(tái)灣、海南島、浙江、江西和湖南南部(江華縣)。生于山麓溝邊及林下陰處酸性土上。印度、緬甸、泰國(guó)、印度支那、馬來(lái)亞、琉球及印度尼西亞都有分布[1]。為全面了解中藥狗脊的資源及使用現(xiàn)狀,楊成梓等[8]從2011年開(kāi)始,歷時(shí)5年,通過(guò)文獻(xiàn)調(diào)查、實(shí)地調(diào)查、質(zhì)量評(píng)價(jià)等方法,對(duì)我國(guó)主要狗脊產(chǎn)區(qū)的資源分布、面積、蘊(yùn)藏量及質(zhì)量評(píng)價(jià)作了長(zhǎng)期深入的研究,認(rèn)為中藥狗脊均來(lái)自于野生資源,主要分布于福建、廣西、貴州、云南、廣東、湖南、江西、四川、重慶、浙江等地,總面積約7 000 hm2,蘊(yùn)藏量5 000 t以上,年產(chǎn)狗脊850 t以上。目前狗脊的年使用量約為800 t,野生資源能較好地滿足藥用,產(chǎn)銷基本平衡,藥材價(jià)格基本穩(wěn)定。楊成梓等[8]研究認(rèn)為,雖然目前狗脊的資源基本能滿足用藥需求,但其野生資源受環(huán)境影響正逐年減少。余德會(huì)等[9]于2018年采用線路法、樣方法和最小面積法相結(jié)合,對(duì)位于貴州省黔東南州中部的雷公山自然保護(hù)區(qū)內(nèi)珍稀蕨類植物金毛狗脊資源量和生境進(jìn)行調(diào)查表明,金毛狗脊分布面積為46.16 hm2,共有2 583株,種群結(jié)構(gòu)以1年生植株最多,處于增長(zhǎng)型;金毛狗脊群落中有46科68屬77種,以單科單種占主要優(yōu)勢(shì)。
從各地調(diào)查取樣及市場(chǎng)抽樣結(jié)果顯示,所采集狗脊藥材基本符合藥典要求,但市場(chǎng)銷售飲片的合格率僅為56. 4%,市場(chǎng)流通飲片質(zhì)量參差不一,應(yīng)進(jìn)一步規(guī)范加工方法,保證用藥的安全有效。
2.1.1 根系不發(fā)達(dá) 由于金毛狗脊是樹狀蕨類植物,其地上部分比普通蕨類植物高大,因而需要消耗的水分和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)也比普通蕨類植物多,而擔(dān)負(fù)植株水分和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)供給的地下部分卻和普通蕨類植物一樣,是柔軟纖細(xì)、入土很淺的不定根,這種根系的吸收和運(yùn)輸能力有限,對(duì)金毛狗脊植株的生存能力是一種先天的限制[10]。
2.1.2 環(huán)境適應(yīng)能力差 金毛狗脊對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求較為苛刻,喜溫暖、潮濕、蔭蔽的環(huán)境,畏嚴(yán)寒,忌直射光照射??諝鉂穸纫嗽?0%~80%,生長(zhǎng)適溫16~22℃,宜在山麓溝邊及林下陰處酸性土上生長(zhǎng)。盡管金毛狗脊分布范圍廣,但種群卻少而小,且零星分散、相互隔離,不利于種群生存和繁衍。
2.1.3 自然繁殖率低 金毛狗脊在自然狀態(tài)下主要有孢子繁殖和分蘗繁殖2種方式,但由于孢子繁殖在經(jīng)歷配子體和孢子體2個(gè)階段時(shí)易受各種生態(tài)因子和人為因素的影響而導(dǎo)致繁殖率低。同時(shí),金毛狗脊自然狀態(tài)下產(chǎn)生的分蘗數(shù)量有限,且分蘗繁殖的本質(zhì)只是無(wú)性系遺傳物質(zhì)的轉(zhuǎn)移而不能產(chǎn)生有益變異,長(zhǎng)期的分蘗繁殖會(huì)導(dǎo)致后代生活力下降,必然會(huì)給種群的延續(xù)造成巨大威脅[11]。
2.2.1 野生資源過(guò)度且無(wú)序采挖 據(jù)張祖榮等[11]對(duì)重慶地區(qū)金毛狗脊野生資源調(diào)查發(fā)現(xiàn),改革開(kāi)放后,隨著生活水平的不斷提高和市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的迅速發(fā)展,對(duì)金毛狗脊的需求量也越來(lái)越大,私挖亂采現(xiàn)象嚴(yán)重,進(jìn)一步增加金毛狗脊野生資源滅絕的風(fēng)險(xiǎn)。楊成梓等[8]于2011—2015年對(duì)我國(guó)主要狗脊產(chǎn)區(qū)的資源調(diào)查發(fā)現(xiàn),在四川峨眉山等地隨處可見(jiàn)路邊兜賣金毛狗脊情況,造成當(dāng)?shù)刭Y源急劇減少;但在江西、廣西等地生長(zhǎng)20年左右的人工杉木林或馬尾松林內(nèi),卻存在大量的金毛狗脊無(wú)人采挖的情況。說(shuō)明目前人們是在忽略金毛狗脊生長(zhǎng)繁殖及分布規(guī)律的狀態(tài)下對(duì)其進(jìn)行無(wú)序亂挖。
2.2.2 生長(zhǎng)環(huán)境被破壞 人類頻繁的工業(yè)活動(dòng)對(duì)金毛狗脊野生生態(tài)環(huán)境造成嚴(yán)重破壞,極大威脅了金毛狗脊的生存和繁衍。
內(nèi)因和外因的共同作用加劇了藥用植物金毛狗脊的瀕危程度。因此,研究瀕危藥用植物金毛狗脊的就地保育、遷地保育和回歸保育對(duì)其可持續(xù)利用具有重要意義。
植物遷地保育是指把植物活體、器官和組織等轉(zhuǎn)移到自然生境之外來(lái)繁育生長(zhǎng)的一種保育方式,是植物多樣性保護(hù)的重要補(bǔ)充手段[12]。對(duì)于以殘存種群或由于自然、人為因素造成生境條件已經(jīng)發(fā)生改變的瀕危物種而言,遷地保育是必要且最為有效的措施。藥用植物園、藥用專類園、藥用植物種質(zhì)圃等是目前開(kāi)展藥用植物遷地保育的主要單位。將自然生境的藥用植物物種轉(zhuǎn)移到可控條件的地區(qū)保存,能方便地研究藥用植物的遺傳、繁殖、生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律,提取藥用植物有效成分,研究藥用植物藥效的形成與維持規(guī)律。這些規(guī)律對(duì)藥用植物保育起基礎(chǔ)支持作用。
3.1.1 引種馴化 野生植物變家種是實(shí)現(xiàn)野生藥用植物資源有效保護(hù)和可持續(xù)利用的有效途徑。里二等[13]率先對(duì)金毛狗脊的人工栽培方法及采收加工進(jìn)行了研究,但方法較為粗略,缺乏效果評(píng)價(jià)方面的深入研究。翁振翔[14]研究了金毛狗脊植株的塊莖在原生境腐殖土和MS培養(yǎng)基中的繁殖技術(shù),結(jié)果表明,使用原生境腐殖土來(lái)栽培金毛狗脊植株是可行的,涂草木灰的效果相對(duì)較好。吳文和等[15]從基質(zhì)配置、分株、栽植、苗床管理及繁殖環(huán)境的管理等方面較為完整地總結(jié)了金毛狗脊的人工栽培技術(shù),為金毛狗脊的人工栽培提供理論及實(shí)踐參考。目前,金毛狗脊的人工栽培技術(shù)尚處于摸索完善中。
確定中藥狗脊的基原種是藥用植物金毛狗脊引種的首要關(guān)注點(diǎn)?!吨腥A人民共和國(guó)藥典》(2020版)[2]規(guī)定,中藥狗脊的基原植物為蚌殼蕨科植物金毛狗脊﹝Cibotiumbarometz(L.)J. Sm.﹞。引種時(shí)容易和單芽狗脊蕨(Woodwardiaunigemmata(Makino)Nakai)混淆,引種時(shí)應(yīng)注意區(qū)分。
植物引種馴化時(shí)需注意引種地與其原生環(huán)境的相似性。雷勝勇[16]對(duì)環(huán)境因子分析發(fā)現(xiàn),金毛狗脊群落通常位于東北或西北坡向的水溝邊,土壤為酸性,土壤含水量和郁閉度較高;環(huán)境因子主成分分析結(jié)果表明,土壤含水量、含氮量、含鉀量和類型、海拔、郁閉度、坡向和坡度可以大致反映影響金毛狗脊群落的環(huán)境因子;TWINSAPN(雙向指示種)分析表明,區(qū)域相近的金毛狗脊群落較為相近,金毛狗脊的主要伴生物種為鐮羽復(fù)葉耳蕨、芒萁、里白、大葉排草、藎草和山姜;DCCA(去勢(shì)典范對(duì)應(yīng))分析表明,土壤含水量和海拔高度對(duì)金毛狗群落的影響較為顯著;金毛狗脊群落的物種多樣性相似度較高,土壤有機(jī)質(zhì)含量對(duì)物種多樣性的影響較為顯著。綜合看,環(huán)境因子中土壤含水量、含氮量、含鉀量、有機(jī)質(zhì)含量和海拔等對(duì)金毛狗脊群落和形態(tài)多樣性具有較大的影響。
3.1.2 繁育方式 金毛狗脊繁育有常規(guī)孢子繁育、分株繁育和無(wú)菌離體繁育3種方式。
1) 常規(guī)孢子繁育。金毛狗脊孢子產(chǎn)量大、易保存、繁殖系數(shù)大,以土壤為育苗基質(zhì),成本低且操作簡(jiǎn)單,幼苗對(duì)環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng),移栽后能很快恢復(fù)生長(zhǎng)。郭治友[17]研究金毛狗脊的孢子繁殖發(fā)現(xiàn),用經(jīng)過(guò)滅菌處理的酸性腐殖土作為基質(zhì),在自然光照和溫度條件下培養(yǎng)孢子體可快速批量生產(chǎn)出金毛狗脊種苗,但該方法未介紹其成苗率。張祖榮等[18]從重慶縉云山采集金毛狗脊孢子,消毒后分別播種于未經(jīng)消毒和經(jīng)過(guò)消毒處理的腐葉土、混合土和原生境土3種培養(yǎng)土上,在保證水分條件下通過(guò)單因子試驗(yàn)研究不同培養(yǎng)土、溫度(自然溫度、晝夜變溫和晝夜恒溫)和光照(自然光照、白天光照和晝夜光照)對(duì)金毛狗脊孢子繁殖的影響,結(jié)果表明,培養(yǎng)土以未經(jīng)消毒的原生境土最好,光照條件以自然散射光照最好,溫度條件則以當(dāng)?shù)刈匀粶囟茸詈?;原生境土作為移栽基質(zhì)可獲得較高幼苗成活率(達(dá)76.0%),但所有繁殖條件下金毛狗脊孢子繁殖從配子體到孢子體的轉(zhuǎn)化率均很低,最高的僅12.8%。可見(jiàn),從配子體受精到孢子體形成是金毛狗脊孢子繁殖過(guò)程的關(guān)鍵。蒲立立[19]研究認(rèn)為,在25℃、2 000~2 500 lx光照12 h條件下進(jìn)行培養(yǎng),金毛狗孢子萌發(fā)和配子體發(fā)育狀況均最好;混合土(營(yíng)養(yǎng)土︰腐殖土︰沙=1︰1︰1)是金毛狗脊孢子萌發(fā)和配子體發(fā)育的理想基質(zhì)。鄭聽(tīng)等[20]研究不同基質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)液對(duì)金毛狗脊孢子萌發(fā)與幼苗生長(zhǎng)的影響,結(jié)果表明,用沃施園藝通用培養(yǎng)土作為基質(zhì)有利于原葉體和孢子體形成,夠促進(jìn)配子體生長(zhǎng),明顯縮短原葉體形成時(shí)間,加快幼孢子體生長(zhǎng);使用蘭花基質(zhì)種植金毛狗脊幼苗時(shí)幼苗新葉數(shù)最多,平均葉長(zhǎng)和葉寬最大;使用蘭花基質(zhì)和沃施園藝通用培養(yǎng)土種植時(shí)金毛狗葉數(shù)、葉長(zhǎng)和葉寬無(wú)顯著差異,說(shuō)明2種基質(zhì)都比較適于金毛狗脊幼苗種植,而使用田土和烤煙基質(zhì)種植時(shí)金毛狗長(zhǎng)勢(shì)較差;以珍珠巖為基質(zhì)種植金毛狗幼苗時(shí),各營(yíng)養(yǎng)液間葉數(shù)、葉長(zhǎng)和葉寬均無(wú)顯著性差異,長(zhǎng)勢(shì)較好,顯著優(yōu)于對(duì)照,說(shuō)明花卉植物營(yíng)養(yǎng)液、景美通用家庭園藝營(yíng)養(yǎng)液、通用營(yíng)養(yǎng)液以及云大中天植物營(yíng)養(yǎng)液對(duì)金毛狗脊幼苗生長(zhǎng)有較好的促進(jìn)作用。
2) 分株繁育。除用孢子進(jìn)行有性繁殖外,金毛狗脊還可通過(guò)根狀莖進(jìn)行無(wú)性繁殖即分株繁殖產(chǎn)生新的植株。分株繁殖具有操作方便、方法簡(jiǎn)單、管理粗放且能在短時(shí)間內(nèi)成苗的特點(diǎn),繁殖方法經(jīng)濟(jì)有效。吳文和等[15]認(rèn)為,將野生金毛狗脊植株分切成2~3株,每株帶有一定數(shù)量的不定根和葉片,對(duì)葉片進(jìn)行適當(dāng)修剪有利于成活;分株時(shí)于切口處涂上草木灰可殺菌及防止切口處受到感染,促進(jìn)切口愈合,且草木灰礦物質(zhì)含量高,有利于塊莖生長(zhǎng)吸收。蒲立立[19]對(duì)金毛狗脊分株繁殖技術(shù)研究發(fā)現(xiàn),金毛狗脊分株繁殖最佳時(shí)期是3月初,成苗率高達(dá)83.33%,長(zhǎng)勢(shì)好;4月初氣溫偏高,植物新陳代謝快,有機(jī)物積累較少并且切口不易愈合;選取長(zhǎng)為21~30 cm或粗3~6 cm的根莖分株時(shí),成苗率較高;根莖長(zhǎng)度在31~40 cm或粗11~14 cm時(shí)成苗率低。因此,在進(jìn)行金毛狗脊分株繁殖時(shí),選擇合適規(guī)格的根莖,有利于金毛狗脊的成活和生長(zhǎng)。蘇鈺琴等[21]選取金毛狗脊帶葉柄的根莖和帶生長(zhǎng)點(diǎn)的根莖浸泡于植物激素中,研究金毛狗脊分株繁殖效果,結(jié)果表明,金毛狗脊分株繁殖最佳方法是將塊莖切成帶頂芽的根莖,切塊大小為10 cm,用濃度為150 mg/L的NAA浸泡10 min,生根率為72%;或用濃度為300 mg/L的IBA浸泡10 min,生根率為71%。
3) 無(wú)菌離體繁育。目前,金毛狗脊無(wú)菌離體繁育均以孢子為外植體,因此其無(wú)菌離體繁育的本質(zhì)為孢子繁育。影響蕨類植物無(wú)菌培養(yǎng)的因素主要包括光照、溫度、無(wú)機(jī)鹽、糖類、貯藏時(shí)間、激素類物質(zhì)等。李雪等[22]以孢子為外植體進(jìn)行金毛狗脊無(wú)菌離體培養(yǎng)技術(shù)研究,建立金毛狗脊植株再生技術(shù)體系:孢子采用2%次氯酸鈉消毒10~12 min獲得無(wú)菌材料最佳;孢子萌發(fā)受培養(yǎng)基鹽離子影響很小,其平均萌發(fā)率為91.25%;形成原葉體需60~90 d;原葉體誘導(dǎo)孢子體最佳培養(yǎng)基為1/10MS,生成孢子體需80~110 d。孢子體增殖培養(yǎng)基1/4MS+KT 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+卡拉膠4.5 g/L,pH 5.8;生根培養(yǎng)基為MS+0.1% AC+蔗糖30 g/L+卡拉膠4.5 g/L,pH 5.8;植株經(jīng)5~7 d煉苗后洗凈根部培養(yǎng)基,移栽于基質(zhì)為泥炭∶珍珠巖∶河沙∶苔蘚=4∶1∶1∶1的穴盤中,在濕度80%~95%,光強(qiáng)1 000~2 000 lx,溫度22~28℃的環(huán)境下生長(zhǎng)6周后成活率達(dá)98.67%。王益和[23]研究發(fā)現(xiàn),添加有2 mg/L GA的MS培養(yǎng)基(pH 6.5)有利于孢子萌發(fā)和原葉體形成;添加2 mg/L NAA或2 mg/L 2,4-D的馬鈴薯培養(yǎng)基(pH 7.0)有利于孢子體形成,并且生根多,有利于壯苗培育。蒲立立[19]采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)研究不同濃度無(wú)機(jī)鹽、蔗糖、GA3、6-BA和IAA對(duì)金毛狗脊孢子萌發(fā)和配子體發(fā)育的影響,結(jié)果表明,在金毛狗脊孢子萌發(fā)、配子體發(fā)育和幼孢子體形成一系列過(guò)程中,需要的無(wú)機(jī)鹽、蔗糖、GA3、6-BA和IAA濃度不一致,以1/8MS+3%蔗糖+0.04 mg/L 6-BA+0.02 mg/L IAA培養(yǎng)基為金毛狗脊孢子萌發(fā)的最佳培養(yǎng)基,1/2MS +3%蔗糖+0.04 mg/L GA3+0.04 mg/L 6-BA是實(shí)現(xiàn)金毛狗脊配子體向孢子體轉(zhuǎn)化的理想培養(yǎng)基。
回歸保育也稱再引入,是將人工繁殖體重新放回適合其生存的野生環(huán)境中,重建較為完善的生態(tài)系統(tǒng),提高生態(tài)系統(tǒng)生物多樣性及群落穩(wěn)定性,建立可自我維持的種群,是基于遷地保護(hù)的種質(zhì)保存和種苗繁育技術(shù)的一種珍稀瀕危植物保育方式,是聯(lián)系遷地保護(hù)與就地保護(hù)的重要橋梁,也是遷地保護(hù)的珍稀瀕危植物的最終歸宿[24]。金毛狗脊的回歸保育須根據(jù)其生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律、野生原種適生環(huán)境及瀕危原因綜合考慮回歸保育的類型、種苗質(zhì)量和最佳回歸時(shí)機(jī)、回歸適宜區(qū)域的選擇及回歸野外后的管理和監(jiān)控等方面,以制定適宜的回歸保育方案。
3.2.1 回歸保育類型 回歸保育主要有增強(qiáng)回歸、重建回歸和引種回歸3種類型[25]。增強(qiáng)回歸是在原有種群基礎(chǔ)上,通過(guò)回歸增加物種數(shù)量;重建回歸即選擇原來(lái)有分布但現(xiàn)在已經(jīng)消失的生境對(duì)物種進(jìn)行種植,其目的是通種群的釋放與管理,擴(kuò)大物種的分布范圍;引種回歸是將物種回歸到合適的生境中,而不清楚該生境原來(lái)是否有回歸物種的分布。由于金毛狗脊在我國(guó)地理分布較廣,遍及我國(guó)18個(gè)省、自治區(qū)和直轄市[26],但有些分布區(qū)原有種群數(shù)量減少或整個(gè)種群消失。因此可通過(guò)增強(qiáng)回歸在原有種群基礎(chǔ)上,增加金毛狗脊種群數(shù)量;通過(guò)重建回歸重新釋放金毛狗脊群體,回歸到原種群已消失的分布區(qū),以恢復(fù)原有金毛狗脊分布范圍??紤]到金毛狗脊資源現(xiàn)狀及回歸保育的資金和人力投入,對(duì)于主要分布區(qū)的金毛狗脊野生資源只須要限制亂采亂挖現(xiàn)象,保證現(xiàn)有資源正常更新和繁殖即可,至于引種回歸則意義不大。
3.2.2 適宜區(qū)域選擇 回歸保育適宜區(qū)域的選擇必須根據(jù)回歸物種的生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律、野生原種適生環(huán)境及瀕危原因綜合考慮。金毛狗脊生長(zhǎng)于我國(guó)亞熱帶和熱帶地區(qū),年平均氣溫14~17℃,1月平均氣溫3~6℃,7月平均氣溫24~28℃,年降水量1 100~1 300 mm,亞熱帶濕潤(rùn)溫暖氣候最適于其生長(zhǎng)。金毛狗脊喜酸性土壤,在紅壤、黃壤上均可生長(zhǎng),聚集叢生,生于海拔250~960 m以下的中山、低山的下部及溪溝,河谷兩側(cè)向上延伸一般不超過(guò)20 m,坡度10~60°。對(duì)適宜度要求極高,金毛狗脊是酸性土指示植物,栽培成活與否,很大程度上依賴于苗床土壤的適宜程度。苗床土壤首先要滿足偏酸性,pH 4.5左右[27],金毛狗脊主要分布于亞熱帶及熱帶地區(qū)灌木林下或溫濕草坡溝邊地帶,這些地方的土表落葉層厚、腐殖質(zhì)含量高,其原生境土壤具有肥沃疏松、有機(jī)質(zhì)含量高的特點(diǎn)。在進(jìn)行金毛狗脊回歸區(qū)域的選擇時(shí)應(yīng)優(yōu)先選擇與其野生原種生境特點(diǎn)相似的區(qū)域。為便于金毛狗回歸保育的實(shí)施及后期的管理和監(jiān)控,最好選在國(guó)家或各地方自然保護(hù)區(qū)、國(guó)有林場(chǎng)等區(qū)域內(nèi)。
3.2.3 種苗繁育 藥用植物跟一般非藥用植物不同,在回歸保育的同時(shí)要盡量保留其野生原種的生物學(xué)特性及其藥效遺傳特性。雖然通過(guò)常規(guī)孢子繁育、分株繁育和無(wú)菌離體繁育3種繁育方式都可獲得金毛狗脊實(shí)生苗,但由于回歸野外,除種苗用量大外還要求能較好地保持其遺傳特性。而常規(guī)孢子繁育在經(jīng)歷配子體和孢子體階段時(shí),容易受到各種生態(tài)因子和人為因素的影響而導(dǎo)致繁殖失??;分株繁育雖具有操作方便、方法簡(jiǎn)單、管理粗放并且能在短時(shí)間內(nèi)成苗的特點(diǎn),但其繁殖體是從野生原植株上機(jī)械分離下來(lái),不但對(duì)原野生植株有所損傷,而且數(shù)量有限??梢?jiàn)常規(guī)孢子繁育和分株繁育均無(wú)法滿足回歸所需大量種苗的要求。而金毛狗脊孢子無(wú)菌離體繁育不但有充足的外植體(孢子)來(lái)源,繁殖系數(shù)大,可規(guī)?;纾囵B(yǎng)條件人為可控,不受季節(jié)更替的限制,而且能較好地保持其遺傳特性。因此,建議通過(guò)無(wú)菌離體繁育的方式來(lái)獲得金毛狗脊回歸種苗。種源要求為金毛狗野生原種,苗木必須健壯無(wú)病蟲害,以保證正常生長(zhǎng)和避免對(duì)回歸生境的危害。無(wú)菌苗的繼代次數(shù)不宜太長(zhǎng),若在人工條件下已經(jīng)繁殖多代,會(huì)由于不易去馴化而失去一定的繁殖和自衛(wèi)能力,導(dǎo)致難以適應(yīng)野外惡劣環(huán)境而無(wú)法生存。無(wú)菌離體繁育的具體方法可參照李雪等[22]建立的金毛狗脊植株再生技術(shù)體系進(jìn)行。
3.2.4 移栽 金毛狗脊移栽時(shí)間在早春為宜,選陰天移栽為最佳。選擇長(zhǎng)勢(shì)良好、株高10~15 cm、根系發(fā)達(dá)、無(wú)污染的健壯植株進(jìn)行定植。定栽時(shí)宜選擇帶基質(zhì)移栽,以利成活。覆土后注意壓實(shí),并澆足定根水,使根系及基質(zhì)與土壤緊密結(jié)合。覆土不宜過(guò)深或過(guò)淺,過(guò)深不利于根系生長(zhǎng),過(guò)淺則易導(dǎo)致幼苗干死,控制在5~8 cm為宜。
3.2.5 后期管護(hù)與監(jiān)測(cè) 定植后10~20 d,若無(wú)自然降雨則人工澆水1次,若發(fā)現(xiàn)有死苗須及時(shí)補(bǔ)植。注意防旱并勤除草松土,保持土壤濕潤(rùn)透氣,松土宜淺,以防傷主根。成活后減少澆水,以促進(jìn)幼苗根系入土伸長(zhǎng)、增粗,控制幼苗徒長(zhǎng)。同時(shí)注意排水,特別是在雨季和秋末,防止根系外露和爛根。待植株健壯生長(zhǎng)后每隔半年清除纏繞的枝蔓。
一系列內(nèi)因和外因的共同作用加劇藥用植物金毛狗脊的瀕危程度,為實(shí)現(xiàn)對(duì)金毛狗脊資源的可持續(xù)利用,對(duì)藥用植物金毛狗脊的保育學(xué)研究與實(shí)踐勢(shì)在必行。藥用植物的保育不同于一般植物,不僅要保護(hù)其野生原種免于瀕?;驕缃^,而且要注意保持其藥效不喪失。保護(hù)物種需要研究種群的生活條件和干擾對(duì)其生存能力的影響,保護(hù)藥效需要研究藥效成分積累動(dòng)態(tài)及各種環(huán)境和遺傳因子對(duì)成分積累的影響[28]。通過(guò)封禁、輪采及人工管理等就地保育手段可實(shí)現(xiàn)對(duì)金毛狗脊原始種群及生境的有效保護(hù),從而為遷地保育的原始材料來(lái)源提供保障,為回歸保育的生境選擇提供實(shí)體參考。而通過(guò)遷地保育能方便研究金毛狗脊的遺傳、繁殖、生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律,提取其有效成分,研究其藥效的形成與維持規(guī)律。
藥用植物需要在特定的環(huán)境下才能合成或積累藥用活性成分,有些藥用植物離開(kāi)原生境其藥效也會(huì)下降或消失。因此最終還需通過(guò)回歸保育,將人工繁殖體重新放回適合其生存的野生環(huán)境中,以增加金毛狗脊野生種群的數(shù)量,擴(kuò)大野生資源分布范圍,重建較為完善的生態(tài)系統(tǒng),提高生態(tài)系統(tǒng)生物多樣性及群落穩(wěn)定性,使其“源于自然,歸于自然”。此外,為保護(hù)金毛狗脊現(xiàn)有種群和將來(lái)回歸種群的生長(zhǎng)和正常繁殖,當(dāng)?shù)卣蛧?guó)家相關(guān)部門應(yīng)加大對(duì)其分布區(qū)的監(jiān)管力度,以鞏固其保育成果,最終實(shí)現(xiàn)對(duì)金毛狗脊資源的可持續(xù)利用。最后,還需對(duì)金毛狗脊保育效果進(jìn)行評(píng)價(jià)與反饋,了解保育策略實(shí)施后其分布區(qū)域、蘊(yùn)藏量、年允采量、市場(chǎng)供應(yīng)量等是否有所增加,是否能保持其原有的遺傳特征、化學(xué)特征和藥效特征等。