李立濤，賀麗敏，許長新，焦蕊，王英杰，郭勇，劉師源

（河北省農(nóng)林科學(xué)院昌黎果樹研究所，河北 昌黎 066600）

中華甲蟲蒲螨（Pyemotes zhonghuajiaYu，Zhang& He）隸屬于蜱螨亞綱（Acari）蒲螨科（Pyemotidae）蒲螨屬（Pyemotes）球腹蒲螨群（P.ventricosusgroup），2010年正式定名[1]，是一種廣泛存在于我國北方地區(qū)的重要寄生性天敵資源。蒲螨具有繁殖能力強(qiáng)、生活史短、主動搜尋殺死寄主能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，是一種應(yīng)用潛力巨大的寄生性天敵[2]。最初，蒲螨的防治靶標(biāo)主要針對林果鉆蛀類害蟲，如雙條杉天牛（Semanotus bifasciatusMotschulsky）[3，4]，光肩星天牛（Anoplophora glabripennisMotsch.）和楊干象（Cryptorhynchus lap-athiLinnaeus）[5]，日本雙棘長蠢（Sinoxylon japonicumLesne）和六星黑點(diǎn)豹蠹蛾（Zeuzera leuconotumButler）[6]，松梢螟（Dioryctria splendidellaHerrich-Schaeffer）[7]等；現(xiàn)在，蒲螨的防治靶標(biāo)已擴(kuò)展至其他隱蔽性或密集型分布為害的害蟲，如為害果樹、林木的美國白蛾（Hyphantria cuneaDrury）[8]，合歡巢蛾（Yponomeutasp.）[9]，草地貪夜蛾〔Spodoptera frugiperda（J.E.Smith）〕[10]，蚜蟲和葉螨[11，12]，梨小食心蟲（Grapholitha molestaBusck）[13]以及土棲害蟲白蟻[14]等。隨著研究的不斷推進(jìn)，防治靶標(biāo)不斷增加，中華甲蟲蒲螨表現(xiàn)出了更廣泛的應(yīng)用潛力。

桃蚜（Myzus persicaeSulzer）又稱桃赤蚜，是桃樹的主要害蟲之一。桃蚜1 a可發(fā)生10代以上，主要以成蚜和若蚜聚集刺吸為害桃樹葉片，被害葉片向背面呈不規(guī)則卷曲，導(dǎo)致葉片扭曲變形，嚴(yán)重時整個新梢葉片卷曲皺縮，甚至落葉，對桃樹影響很大[15]。目前，我國桃蚜仍以化學(xué)防治為主，由于頻繁施藥，殘留問題嚴(yán)重，致使全國各地桃蚜的抗藥性越來越強(qiáng)，給桃蚜防治和果品安全生產(chǎn)增加了困難[16，17]。因此，多途徑尋找有效的生物控制因子，對實(shí)現(xiàn)桃蚜生物防治具有重要意義。

研究表明，蒲螨對不同種類的蚜蟲具有不同的致死效果[11，12，18]，但截至目前，國內(nèi)外有關(guān)蒲螨對桃蚜的致死能力和防治效果尚未見報(bào)道。此外，針對蚜蟲這類刺吸為害和密集分布的害蟲，如何高效利用蒲螨進(jìn)行田間防治的技術(shù)和方法仍需探索與改進(jìn)?；谝陨蠁栴}，本研究通過室內(nèi)和田間試驗(yàn)，探討中華甲蟲蒲螨對桃蚜的寄生殺死能力，以及作為天敵利用專用釋放管釋放進(jìn)行桃蚜田間防治的可行性，旨為桃蚜田間防治提供一種新的生物防治手段。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

中華甲蟲蒲螨，2020年6月10日采自天津市薊縣被長蠹為害的柿子樹上，室內(nèi)以Mch1的蛹作為食物進(jìn)行繼代飼養(yǎng)；桃蚜，2022年5月5日采自河北省昌黎縣田間桃樹上。

主要儀器和設(shè)備有萊卡EZ4型體視顯微鏡〔Leica Microsystems（Schweiz）AG〕、蔡司SteREO Discovery.V20體視顯微鏡（Carl Zeiss MicroImaging GmbH）、智能人工氣候箱（寧波賽福實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）、專用釋放管（自制）、培養(yǎng)皿等。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 中華甲蟲蒲螨對桃蚜的寄生過程觀察 田間采集帶桃蚜的桃樹葉片（帶葉柄），用細(xì)軟的小毛筆將葉片上多余的桃蚜和其他昆蟲剔除，保證每個試驗(yàn)葉片上有桃蚜60頭，然后用棉球包裹葉柄，加水保濕。將葉片背面向上放入培養(yǎng)皿中，然后挑入1頭新產(chǎn)出的中華甲蟲蒲螨雌成螨，在顯微鏡下觀察并記錄其搜尋、識別、叮刺殺死第一頭桃蚜的行為和時間；之后將培養(yǎng)皿置于溫度（25±1）℃、相對濕度（60±5）%的智能人工氣候箱內(nèi)，24 h后在顯微鏡下觀察桃蚜的死亡情況。每處理10次重復(fù)。

1.2.2 中華甲蟲蒲螨對桃蚜的控制能力 分別在室內(nèi)離體葉片和田間桃樹上進(jìn)行。

1.2.2.1 室內(nèi)試驗(yàn)。按1.2.1的葉片處理方法，在載有60頭桃蚜的葉片上，分別向葉片接入新產(chǎn)出的中華甲蟲蒲螨雌成螨15頭、30頭和60頭，即試驗(yàn)螨蚜比（蒲螨與蚜蟲的數(shù)量比）設(shè)1∶4、1∶2和1∶1計(jì)3個處理；然后將培養(yǎng)皿置于溫度（25±1）℃、相對濕度（60±5）%的智能人工氣候箱內(nèi)，分別在24和48 h后觀察桃蚜的死亡情況，并利用蔡司SteREO Discovery.V20體視顯微鏡持續(xù)觀察蒲螨在蚜蟲體上的發(fā)育情況并拍照。每處理6次重復(fù)。

1.2.2.2 田間試驗(yàn)。專用釋放管的制作：剪去1.5 mL EP離心管的蓋兒，將100目紗網(wǎng)按照離心管管口的大小剪成圓片，細(xì)棉線剪成長150 mm的線段，備用；熱熔槍加上熱熔膠后開始預(yù)熱。將1頭接種好蒲螨的Mch1蛹輕輕放入上述離心管中，將融化后的熱熔膠涂在管口，細(xì)棉線的一段粘在熱熔膠上，然后再將100目紗網(wǎng)圓片按在管口進(jìn)行粘附封口，同時也將棉線壓牢。制作好后將離心管平躺放置，待蒲螨在Mch1蛹上發(fā)育至即將產(chǎn)后代（25℃下發(fā)育到第6天）時即可釋放應(yīng)用。

2022年5月7日田間選擇桃蚜為害的桃梢，調(diào)查并記錄桃蚜數(shù)量。將按照上述方法制備的專用釋放管，分別按1管/梢、2管/梢系在被害桃梢上，距離桃蚜為害處10 cm左右；以不釋放蒲螨為對照（CK）。每處理重復(fù)10梢。5月17日調(diào)查桃梢上存活的桃蚜數(shù)量。試驗(yàn)期間，每釋放管可陸續(xù)產(chǎn)出蒲螨雌成螨1萬頭左右。

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

使用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，使用DPS 7.05軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 中華甲蟲蒲螨對桃蚜的寄生過程

不同的中華甲蟲蒲螨個體，對桃蚜的搜尋時間、叮刺時間和致死時間均存在較大差異（表1）。中華甲蟲蒲螨雌成螨被挑入葉片后，便開始無定向地搜尋，最快可在33 s搜尋到桃蚜并開始叮刺，最長則需要21 min 15 s，平均需時5 min 54 s。蒲螨觸碰到桃蚜?xí)r會引起桃蚜掙扎，一般蒲螨會反復(fù)觸碰幾次桃蚜，再爬到桃蚜體上尋找合適的位置進(jìn)行叮刺，叮刺部位一般選擇在桃蚜的腹部，接近足基部，少數(shù)選擇在桃蚜的背部，甚至觸角上叮刺。桃蚜被叮刺后，最初會時而左右擺動，時而靜止，有時也爬行移動，最終逐漸麻痹不動，呈死亡狀態(tài)。在桃蚜死亡前，蒲螨會停止叮刺并離開桃蚜，去尋找下一個寄主，最短叮刺時間僅為1 min 45 s，最長則需要10 min 15 s，平均需時5 min 26 s。從開始叮刺到殺死桃蚜，最快僅需要6 min 15 s，最慢則需要30 min 40 s，平均需時17 min 14 s。中華甲蟲蒲螨的搜尋時間、叮刺時間和殺死桃蚜的時間與蒲螨的強(qiáng)壯及活躍程度具有一定的正相關(guān)，表現(xiàn)為蒲螨越強(qiáng)壯，需時越短；反之，則需時越長。24 h內(nèi)，1頭蒲螨最多可以殺死5頭桃蚜，平均殺死量為3.6頭。

表1 中華甲蟲蒲螨對桃蚜的寄生反應(yīng)Table 1 Parasitic reaction of P.zhonghuajia against M.persicae

2.2 中華甲蟲蒲螨對桃蚜的控制能力

2.2.1 室內(nèi)試驗(yàn) 隨著螨蚜比的增加，中華甲蟲蒲螨對桃蚜的控制效果顯著增強(qiáng)（表2）。螨蚜比為1∶4時，24 h、48 h的桃蚜校正死亡率僅分別為20.38%和21.22%，控制效果較差；螨蚜比增加到1∶1時，24 h、48 h的桃蚜校正死亡率分別達(dá)到73.22%和75.38%，表現(xiàn)出一定的控制效果。在螨蚜比相同的情況下，48 h與24 h的桃蚜校正死亡率差異均不顯著，說明中華甲蟲蒲螨在24 h內(nèi)基本完成了固定寄生，超過24 h后雖然校正死亡率還有所提升，但效果已不顯著。

表2 中華甲蟲蒲螨對桃蚜的室內(nèi)防治效果Table 2 The indoor control effect of P.zhonghuajia against M.persicae

繼續(xù)觀察發(fā)現(xiàn)，中華甲蟲蒲螨可以寄生在桃蚜蟲體上并膨腹發(fā)育（圖1），但數(shù)量較少，僅占釋放數(shù)量的1/5左右，且常常多個蒲螨寄生在同一桃蚜蟲體上。多個蒲螨寄生在同一桃蚜蟲體會導(dǎo)致蒲螨營養(yǎng)不足，膨腹體發(fā)育較小，不能正常生產(chǎn)后代，或僅有2～3頭蒲螨產(chǎn)出。

圖1 中華甲蟲蒲螨寄生桃蚜第6天時的狀態(tài)Fig.1 The state of P.zhonghuajia parasitized M.persicae for 6 days

2.2.2 田間試驗(yàn) 釋放中華甲蟲蒲螨對田間桃蚜表現(xiàn)出較好的防治效果，且防效隨著釋放量的增大而明顯提高（表3）。每被害梢釋放2管，釋放10 d后防效可達(dá)到82.74%，效果明顯。

表3 中華甲蟲蒲螨對桃蚜的田間防治效果Table 3 The field control effect of P.zhonghuajia against M.persicae

3 結(jié)論與討論

段東紅[11]和韓晉杰[12]利用蒲螨進(jìn)行了蚜蟲防治研究，二者試驗(yàn)方法和結(jié)論相似，均證實(shí)大量釋放蒲螨可以有效防治多種蚜蟲，防效可達(dá)90%以上，甚至100%。本研究中田間釋放釋放中華甲蟲蒲螨雌成螨10 d后對蚜蟲的防治效果為82.74%，低于前人的研究結(jié)果。段東紅[11]的研究中蒲螨對國槐蚜的室內(nèi)防效較差，平均致死率僅為53.35%?？梢钥闯觯羊龑Σ煌N類蚜蟲的致死能力不同。另外，釋放方法不同，也可能是造成防效差異的主要原因。

本研究中，在顯微鏡下觀察并記錄了1頭中華甲蟲蒲螨雌成螨在1個60頭桃蚜的群體中尋找、叮刺殺死桃蚜的行為過程，結(jié)果顯示，整個過程蒲螨最短僅需要6 min 48 s，24 h最多可殺死5頭桃蚜，平均殺死量為3.6頭，對桃蚜表現(xiàn)出了一定的致死能力，與已報(bào)道的對蘋果黃蚜的致死能力[18]相當(dāng)，但不及蒲螨對小蠹蟲的致死能力（1頭蒲螨可殺死20余頭小蠹蟲）[2]。室內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果顯示，在60頭桃蚜的群體中，按螨蚜比1∶4釋放蒲螨時，24 h桃蚜校正死亡率為20.38%，高于該釋放比例下24 h蘋果黃蚜的校正死亡率（13.66%）[18]，但與蒲螨的單頭致死能力不符；隨著釋放比例的增加，桃蚜校正死亡率逐漸升高，當(dāng)螨蚜比達(dá)到1∶1時，24 h桃蚜校正死亡率為73.22%，低于蘋果黃蚜的校正死亡率（89.15%），與螨蚜比1∶4處理的研究結(jié)果相反。推測可能原因有3個：（1）中華甲蟲蒲螨的不同個體會對同一桃蚜多次重復(fù)叮刺；（2）大量的蒲螨相互干擾，爬行離開；（3）蒲螨在較光滑、無絨毛的桃樹葉片上更容易擴(kuò)散，也更容易爬出葉片不返回。在顯微鏡下的觀察結(jié)果也證實(shí)了以上3種情況的存在。

本研究中制作了適用于田間防治的蒲螨釋放管，在釋放量為2管/梢時，釋放10 d后的防治效果達(dá)到82.74%，說明蒲螨可以作為一種生防手段用于桃蚜的田間防治。本研究結(jié)果也為同類型害蟲防治提供了一種新的生物防治思路和途徑。