張俊杰，馮莉

（新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830052）

孔雀魚（Poecilia reticulata），隸屬鳉形目（Cyprinodontiformes），花鳉科（Poeciliidae），胎鳉屬（Poecilia），屬于小型熱帶觀賞魚，卵胎生，該魚色彩豐富，性情溫和，體質(zhì)健壯，對水質(zhì)適應(yīng)能力強(qiáng)，容易繁殖，價(jià)格便宜，且具有很高的觀賞價(jià)值，雜食性，較耐低氧，可以與其他小型熱帶觀賞魚和平共處，成為觀賞魚市場長盛不衰的寵兒，深受廣大觀賞魚愛好者的喜愛[1]。但孔雀魚在養(yǎng)殖管理過程中也很容易發(fā)生疾病，需要使用相應(yīng)的藥物進(jìn)行治療。

孔雀魚作為一種觀賞魚，其疾病防治所用藥物除了參考主要水產(chǎn)藥物使用方法外，還要考慮這些藥物對孔雀魚的毒性。雖然已有關(guān)于青霉素、慶大霉素、二溴海因、三氯異氰尿酸、高錳酸鉀、孔雀石綠、亞甲基藍(lán)、溴氰菊酯、二氧化氯、甲醛、環(huán)丙沙星、恩諾沙星和諾氟沙星等藥物對孔雀魚的急性毒性試驗(yàn)研究報(bào)道[2-6]，但還有很多常用漁藥如漂白粉等對孔雀魚急性毒性試驗(yàn)的研究還未見報(bào)道。漂白粉是水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中廣泛使用的含氯消毒劑，含有效氯30%左右，遇水后生成次氯酸，有很強(qiáng)的殺菌作用，可用于清塘、池水消毒和防治魚病等，在魚病防治中具有價(jià)格低廉、使用方便、效果好等特點(diǎn)[7-8]。但由于漂白粉具有很強(qiáng)的腐蝕性，使用不當(dāng)對人體和養(yǎng)殖對象會(huì)產(chǎn)生一定的毒副作用，所以在使用時(shí)必須注意合適的濃度和操作方法。

現(xiàn)進(jìn)行了漂白粉對孔雀魚幼魚的急性毒性試驗(yàn)，并計(jì)算出漂白粉對孔雀魚幼魚的半致死濃度和安全濃度，旨在尋找漂白粉在孔雀魚養(yǎng)殖過程中的安全用藥范圍，為觀賞魚養(yǎng)殖過程中魚病防治工作提供依據(jù)和參考，促進(jìn)觀賞魚產(chǎn)業(yè)持續(xù)、健康發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)藥物

試驗(yàn)所用漂白粉由天津市福晨化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，有效氯含量為28%～32%。

1.2 試驗(yàn)孔雀魚及環(huán)境

試驗(yàn)用孔雀魚幼魚，購自烏魯木齊華凌魚市場的種魚繁殖出的幼魚，挑選健康、無病、無外傷的孔雀魚幼魚，在水族箱中飼養(yǎng)10～15 d，已經(jīng)完全適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。飼養(yǎng)用水為曝氣自來水，用充氣泵充氧，水溫 24～26 ℃，每天換水 1 次，投餌 2 次。試驗(yàn)用水為曝氣1 d 的自來水，水溫25 ℃，pH 值 7.0 左右。試驗(yàn)容器為2.5 L 塑料瓶。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 預(yù)備試驗(yàn) 根據(jù)漂白粉通常的水體消毒濃度，并結(jié)合漂白粉對其他魚的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果[8-10]，確定預(yù)試驗(yàn)的最低和最高濃度，然后采用常溫靜水試驗(yàn)法從低濃度到高濃度進(jìn)行24 h 預(yù)備試驗(yàn)。將試驗(yàn)藥物先配成母液，后稀釋成所需濃度。所設(shè)漂白粉預(yù)試驗(yàn)濃度分別為8 000，2 000，500，350，64，8，1 g/m3，找出 24 h 內(nèi)幼魚的病死率為 0～100%的濃度范圍。

1.3.2 正式試驗(yàn) 根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)結(jié)果確定試驗(yàn)濃度范圍，按改良寇氏法（Karber）設(shè)計(jì)分組，藥物試驗(yàn)共設(shè)6 個(gè)等對數(shù)間距梯度和一個(gè)空白對照組，每個(gè)梯度設(shè)3 個(gè)平行組（見表1）。試驗(yàn)在室內(nèi)常溫條件下進(jìn)行，每個(gè)瓶子先加水，再加入藥液，然后隨機(jī)取5 尾魚苗按低濃度到高濃度逐瓶放入。試驗(yàn)開始后，前8 h 連續(xù)觀察并作詳細(xì)記錄，然后記錄24，48，96 h 魚苗存活情況。

表1 孔雀魚幼魚在不同濃度漂白粉溶液中的病死率、半致死濃度和安全濃度

1.3.3 孔雀魚死亡的判斷 魚中毒死亡的標(biāo)準(zhǔn)是魚體色發(fā)白，身體蜷曲。

1.3.4 半數(shù)致死濃度（LC50）和安全濃度（SC）的計(jì)算用改良karber 法求出 24、48、96 h 的半致死濃度[11]，計(jì)算公式如下：

式中：Xm為最大劑量的對數(shù)值，i 為相鄰劑量比值的對數(shù)；∑p 為各組病死率的總和（以小數(shù)表示），%；pm為最大劑量組的病死率，%；pn為最小劑量組的病死率，%。

根據(jù)以下公式計(jì)算SC：

2 結(jié)果與分析

2.1 漂白粉對孔雀魚幼魚的急性毒性預(yù)備試驗(yàn)結(jié)果及中毒癥狀

根據(jù)常溫靜水試驗(yàn)法從低濃度（1 g/m3）到高濃度（8 000 g/m3）進(jìn)行的24 h 預(yù)備試驗(yàn)，得到漂白粉導(dǎo)致孔雀魚幼魚病死率為0～100%的濃度為8～64 g/m3。

試驗(yàn)過程中，發(fā)現(xiàn)孔雀魚幼魚在高濃度漂白粉溶液中的中毒表現(xiàn)主要是：魚體失去平衡，出現(xiàn)側(cè)游、旋轉(zhuǎn)游動(dòng)等現(xiàn)象，有的逐漸沉至水底，狂游亂竄，偶有穩(wěn)定下來的，隨即又呈失衡狀態(tài)。慢慢地，中毒孔雀魚幼魚游動(dòng)減慢，隨著染毒時(shí)間延長，有幾尾試驗(yàn)魚浮到水面，出現(xiàn)強(qiáng)烈的急躁和狂游不安的狀態(tài)直至死亡。低濃度組試驗(yàn)魚出現(xiàn)中毒癥狀時(shí)間較晚且輕，僅出現(xiàn)短時(shí)亂竄、失衡現(xiàn)象，隨后恢復(fù)正?；顒?dòng)。

2.2 漂白粉對孔雀魚幼魚的LD50 和SC

按改良寇氏法設(shè)計(jì)分組，共設(shè)計(jì)6 個(gè)等對數(shù)間距梯度藥物濃度進(jìn)行急性毒性正式試驗(yàn)，觀察和記錄孔雀魚幼魚24，48 和96 h 的死亡情況，試驗(yàn)結(jié)果如表1 所示。由表1 可知，漂白粉對孔雀魚幼魚的 24，48 和 96 h LD50均為 17.8 g/m3；SC 為5.34 g/m3。

3 討論

3.1 漂白粉對孔雀魚幼魚的毒性

孔雀魚幼魚在放入試驗(yàn)所設(shè)不同濃度的漂白粉藥液后，開始的時(shí)候魚體應(yīng)激反應(yīng)都不明顯，但過0.5 h 后，在高濃度組的孔雀魚反應(yīng)激烈，出現(xiàn)側(cè)游、旋轉(zhuǎn)游動(dòng)等現(xiàn)象，有的逐漸沉至水底，狂游亂竄，偶有穩(wěn)定下來的，隨即又呈失衡狀態(tài)，直至死亡。檢查死魚，可見體表和鰓部黏液多，魚體色變淺。孔雀魚幼魚在漂白粉溶液中的中毒現(xiàn)象究竟是神經(jīng)中毒還是體液中毒，還有待于進(jìn)一步研究。

3.2 漂白粉對孔雀魚幼魚的SC 與生產(chǎn)使用

不同水產(chǎn)動(dòng)物對水中漂白粉濃度耐受程度并不相同，如史氏鱘對漂白粉較為敏感，SC 僅為0.5 g/m3[9]；而對背角無齒蚌的毒性很弱，SC 高達(dá)340.19 g/m3[10]。該試驗(yàn)結(jié)果表明，漂白粉對孔雀魚幼 魚 的 24，48，96 h LD50均 為 17.8 g/m3，SC 為5.34 g/m3。SC 高于漂白粉在生產(chǎn)中常用的潑灑消毒濃度（1.0～1.5 g/m3），但是低于其常用的浸浴消毒濃度（10～20 g/m3）[7]。所以漂白粉在孔雀魚養(yǎng)殖生產(chǎn)和病害防治中應(yīng)謹(jǐn)慎使用。