魏宇超 王鳳霞 張 燦 孫東岳 趙玉萍 李 寧 閆俊彤 陳寶江,2*

(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，保定 071000；2.河北省牛羊胚胎技術(shù)創(chuàng)新中心，保定 071000)

枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)是飼料常用益生菌種之一，它是以芽孢的形式添加到飼料中。芽孢是一種休眠狀態(tài)的活細(xì)胞，能夠在飼料加工過(guò)程中穩(wěn)定地保持形態(tài)，有利于制成菌劑后的運(yùn)輸儲(chǔ)存，在食用至機(jī)體消化道后可以極快地生長(zhǎng)增殖[1]。而枯草芽孢桿菌對(duì)于禽畜腸道有多方面影響，主要包含調(diào)控腸道微生物平衡，調(diào)節(jié)腸道營(yíng)養(yǎng)代謝，維護(hù)黏膜屏障的完整性，改善腸道形態(tài)，強(qiáng)化免疫能力，這對(duì)于腸道健康具有著重要意義[2]。任永軍等[3]研究表明，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌復(fù)合桿菌制劑300～400 mg/kg時(shí)可提高十二指腸和回腸的絨毛高度，降低十二指腸、空腸和回腸隱窩深度，提高十二指腸、空腸和回腸絨毛高度/隱窩深度(絨隱比)，即能有效促進(jìn)小腸發(fā)育。丁洪濤等[4]試驗(yàn)表明，飼糧中添加枯草芽孢桿菌能提高瘤胃發(fā)酵產(chǎn)氣量，提高瘤胃氨態(tài)氮、總揮發(fā)性脂肪酸及丙酸含量，降低瘤胃乙酸和丙酸含量，提高瘤胃纖維的降解率，有效提高飼料的利用率。謝開(kāi)春[5]研究表明，飼糧中添加酵母硒和枯草芽孢桿菌可以提高兔糞中乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量，降低大腸桿菌的數(shù)量，改善腸道微生態(tài)平衡，達(dá)到了降低消化道pH的效果。目前，盡管對(duì)枯草芽孢桿菌的研究較多，但是對(duì)于枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔腸道微生物的影響鮮有報(bào)道。因此，本試驗(yàn)旨在研究枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔腸道結(jié)構(gòu)、盲腸揮發(fā)性脂肪酸含量和微生物多樣性的影響，為枯草芽孢桿菌在肉兔生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及基礎(chǔ)飼糧

枯草芽孢桿菌含量為3.0×109CFU/g?；A(chǔ)飼糧參照谷子林等[6]推薦的兔營(yíng)養(yǎng)需求進(jìn)行配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。枯草芽孢桿菌以粉劑的形式加入基礎(chǔ)飼糧中，逐級(jí)稀釋?zhuān)旌暇鶆?，制成顆粒飼料。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

續(xù)表1項(xiàng)目 Items含量 Content 粗脂肪 EE4.49中性洗滌纖維 NDF34.80酸性洗滌纖維 ADF14.69酸性洗滌木質(zhì)素 ADL5.04鈣 Ca0.99總磷 TP0.49

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取80只30日齡、體重[(1.15±0.05) kg]相近的健康伊拉肉兔，隨機(jī)分為4組，每組20個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只，單籠飼養(yǎng)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加100、200、300 g/t枯草芽孢桿菌。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)前對(duì)兔舍以及用具進(jìn)行消毒，采用3層階梯式金屬籠單籠飼養(yǎng)，各個(gè)重復(fù)均勻分布，自然采光通風(fēng)。每日07:00、18:00各飼喂1次，自由采食飲水。預(yù)試期7 d，正試期30 d。

1.4 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.4.1 腸道結(jié)構(gòu)

在正試期的第30天進(jìn)行屠宰試驗(yàn)，每組選取體重相近的6只試驗(yàn)兔(公母各占1/2)，頸椎脫臼處死，取各試驗(yàn)兔空腸、回腸、盲腸固定，制作石蠟切片，用蘇木精-伊紅染色顯示腸黏膜結(jié)構(gòu)，在光鏡下觀察，測(cè)量各試驗(yàn)兔盲腸的黏膜厚度、肌層厚度；空腸、回腸的絨毛高度、隱窩深度，并計(jì)算絨隱比。

1.4.2 盲腸pH

取混合均勻的盲腸內(nèi)容物3 g，在燒杯中稀釋?zhuān)肧T2100型酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)量。

1.4.3 盲腸揮發(fā)性脂肪酸含量

取盲腸內(nèi)容物1 g，用蒸餾水稀釋10倍，將稀釋液離心10 min(4 ℃，10 000 r/min)，取1 mL上清液，加入0.2 mL含有內(nèi)標(biāo)物的25%偏磷酸溶液，混勻，冰水浴中放置30 min以上，再次離心10 min(4 ℃，10 000 r/min)，去除樣品中的蛋白質(zhì)沉淀物，去上清液，使用普析G5型氣相色譜儀測(cè)量盲腸總揮發(fā)性脂肪酸以及乙酸、丙酸、丁酸含量。

1.4.4 微生物多樣性

1.4.4.1 DNA提取與測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建

無(wú)菌操作將適量盲腸內(nèi)容物放入無(wú)菌凍存管中，-80 ℃超低溫保存。每組分別選取6份糞便樣品，每份準(zhǔn)確稱(chēng)取0.2 g置于2 mL離心管中，使用特定引物對(duì)序列進(jìn)行擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物經(jīng)2%瓊脂糖凝膠電泳驗(yàn)證。在NovaSeq PE250平臺(tái)上對(duì)庫(kù)進(jìn)行排序(由成都聯(lián)川生物科技股份有限公司完成)。

1.4.4.2 生信分析流程

樣品在Illumina NovaSeq平臺(tái)上進(jìn)行測(cè)序。根據(jù)樣品獨(dú)特的條形碼，將配對(duì)端序列分配給樣品，并將建庫(kù)引入的barcode和引物序列去除。使用Vsearch軟件對(duì)嵌合序列進(jìn)行過(guò)濾。利用DADA2進(jìn)行解調(diào)，得到特征表和特征序列。多樣性和多樣性通過(guò)歸一化到相同的隨機(jī)序列來(lái)計(jì)算。然后根據(jù)SILVA(release 132)分類(lèi)器，利用每個(gè)樣本的相對(duì)豐度對(duì)特征豐度進(jìn)行歸一化。Alpha多樣性用于分析樣本物種多樣性的復(fù)雜性，Beta多樣性采用Blast進(jìn)行序列比對(duì)，每個(gè)代表性序列用SILVA數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)特征序列進(jìn)行注釋。

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

采用Excel 2010對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步計(jì)算，再用SPSS 20.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行均值比較和差異性檢驗(yàn)，用one-way ANOVA程序檢驗(yàn)各組數(shù)據(jù)間差異是否顯著，差異顯著者用LSD法進(jìn)行多重比較。P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著，結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。

2 結(jié) 果

2.1 枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組平均日增重顯著升高(P<0.05)，試驗(yàn)Ⅰ組平均日采食量顯著升高(P<0.05)。

表2 枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔生長(zhǎng)性能的影響Table 2 Effects of Bacillus subtilis on growth performance of meat rabbits

2.2 枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔腸道結(jié)構(gòu)的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組空腸絨毛高度極顯著升高(P<0.01)；試驗(yàn)Ⅲ組空腸絨隱比極顯著低于試驗(yàn)Ⅰ組(P<0.01)。試驗(yàn)Ⅲ組回腸絨毛高度顯著低于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組(P<0.05)；試驗(yàn)Ⅲ組回腸隱窩深度極顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組(P<0.01)，顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組回腸絨隱比極顯著降低(P<0.01)。各組盲腸黏膜層厚度和肌層厚度差異均不顯著(P>0.05)。

表3 枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔腸道結(jié)構(gòu)的影響Table 3 Effects of Bacillus subtilis on intestinal structure of meat rabbits

2.3 枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔盲腸pH和揮發(fā)性脂肪酸含量的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅲ組盲腸pH顯著升高(P<0.05)。各組乙酸、丙酸、丁酸、總揮發(fā)性脂肪酸含量差異均不顯著(P>0.05)。

表4 枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔盲腸pH和揮發(fā)性脂肪酸含量的影響Table 4 Effects of Bacillus subtilis on cecal pH and volatile fatty acid contents of meat rabbits

2.4 枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔盲腸微生物多樣性的影響

2.4.1 試驗(yàn)可行性分析

采用NovaSeq PE250測(cè)序平臺(tái)對(duì)試驗(yàn)兔盲腸內(nèi)容物樣本中16S rDNA的V3～V4區(qū)進(jìn)行檢測(cè)，20個(gè)樣本測(cè)序共獲得1 201 374條有效Tags，平均每個(gè)樣品產(chǎn)生75 085條有效Tags。稀釋曲線(xiàn)(rarefaction curve)可直接反映測(cè)序數(shù)據(jù)量的合理性，并間接反映樣品中物種的豐富程度。由圖1可以看出，各組稀釋曲線(xiàn)趨向平坦，說(shuō)明測(cè)序數(shù)據(jù)量漸進(jìn)合理。

Number of sequence：數(shù)據(jù)排列；observed-OTU：操作分類(lèi)單元觀測(cè)數(shù)值。G1：對(duì)照組；G2：試驗(yàn)Ⅰ組；G3：試驗(yàn)Ⅱ組；G4：試驗(yàn)Ⅲ組。下圖同。G1: control group; G2: test group Ⅰ; G3: test group Ⅱ; G4: test group Ⅲ. The same as below.圖1 稀釋曲線(xiàn) Fig.1 Rarefaction curves

2.4.2 特征值分布Venn圖

根據(jù)特征值操作分類(lèi)單元(OTU)豐度表，計(jì)算各組共有OTU的數(shù)目，并通過(guò)Venn圖解釋各組共有和特有的OTU數(shù)目，若OTU只存在于1個(gè)分組，則該OTU為該分組特有。圖中每個(gè)圈代表1個(gè)樣本/分組，圈和圈重疊部數(shù)目個(gè)數(shù)代表不同組的共有數(shù)目。由圖2可以看出，對(duì)照組，試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組特有的OTU數(shù)目分別為1 783、1 388、1 749和1 432個(gè)。

圖2 特征值分布Venn圖Fig.2 Venn diagram feature distribution

2.4.3 Alpha多樣性分析

由表5可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組盲腸微生物OTU數(shù)目和Chao1指數(shù)極顯著提高(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅲ組盲腸微生物OTU數(shù)目和Chao1指數(shù)極顯著降低(P<0.01)。各組盲腸微生物Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)差異不顯著(P>0.05)。

表5 Alpha多樣性指數(shù)Table 5 Alpha diversity index

2.4.4 Beta多樣性

對(duì)各組試驗(yàn)兔盲腸微生物群落進(jìn)行主坐標(biāo)分析(PCoA)，如圖3所示。對(duì)照組和試驗(yàn)組組內(nèi)樣本聚集度較高，各組均能夠區(qū)分開(kāi)來(lái)。

圖3 盲腸微生物菌群構(gòu)成的主坐標(biāo)分析圖Fig.3 PCoA diagram of cecal microflora composition

2.4.5 盲腸微生物物種豐度

2.4.5.1 門(mén)水平分析

由圖4可知，各組試驗(yàn)兔盲腸微生物在門(mén)水平上均主要由厚壁菌門(mén)、擬桿菌門(mén)、疣微菌門(mén)、放線(xiàn)菌門(mén)及變形菌門(mén)這5種菌門(mén)組成。由表5可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅲ組厚壁菌門(mén)的相對(duì)豐度極顯著降低(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅲ組擬桿菌門(mén)的相對(duì)豐度極顯著升高(P<0.01)；試驗(yàn)Ⅱ和Ⅲ組疣微菌門(mén)的相對(duì)豐度顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組(P<0.05)；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅱ組變形菌門(mén)的相對(duì)豐度顯著降低(P<0.05)。

Firmicutes：厚壁菌門(mén)；Bacteroidetes：擬桿菌門(mén)；Verrucomicrobia：疣微菌門(mén)；Actinobacteria：放線(xiàn)菌門(mén)；unclassified：未分類(lèi)；Proteobacteria：變形菌門(mén)；Tenericutes：軟壁菌門(mén)；Patescibacteria：桿菌門(mén)；Cyanobacteria：藍(lán)藻菌門(mén)；Spirochaetes：螺旋體菌門(mén)；Epsilonbacteraeota；Acidobacteria：酸桿菌門(mén)；Nitrospirae：硝化螺旋菌門(mén)；Planctomycetes：浮霉菌門(mén)；Gemmatimonadetes：芽單胞菌門(mén)；Chloroflexi：綠彎菌門(mén)；Armatimonadetes：裝甲菌門(mén)。圖4 門(mén)水平上盲腸微生物菌群相對(duì)豐度Fig.4 Relative abundance of caecal microflora at phylum level

2.4.5.2 屬水平分析

由圖5可知，各組試驗(yàn)兔盲腸微生物在屬水平上均主要由瘤胃球菌科NK4A214群、克里斯滕森氏菌R-7群、瘤胃球菌科UCG-014、桑科未分類(lèi)菌屬、艾克曼菌屬、厚壁菌門(mén)未分類(lèi)菌屬、Subdoligranulum這7種菌屬組成。由表6可知，與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組瘤胃球菌科NK4A214群的相對(duì)豐度均顯著降低(P<0.05)；各試驗(yàn)組克里斯滕森氏菌R-7群的相對(duì)豐度均極顯著降低(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅰ組瘤胃球菌科UCG-014的相對(duì)豐度極顯著升高(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅰ組?？莆捶诸?lèi)菌屬的相對(duì)豐度顯著升高(P<0.05)，試驗(yàn)Ⅰ組艾克曼菌屬的相對(duì)豐度極顯著降低(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅰ組Subdoligranulum的相對(duì)豐度極顯著降低(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅲ組副室桿菌屬的相對(duì)豐度極顯著升高(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅱ組理研菌科RC9腸菌群的相對(duì)豐度顯著升高(P<0.05)。

表6 試驗(yàn)兔盲腸微生物菌群在門(mén)水平上的分布Table 6 Distribution of caecal microflora of experimental rabbits at phylun level %

3 討 論

3.1 枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔腸道結(jié)構(gòu)的影響

絨毛高度和隱窩深度的變化反映著腸道消化吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能力的變化，絨隱比升高表示腸壁接觸食糜的面積增大，從而可以更好地吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，黏膜的厚薄與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程相關(guān)[5]。在本試驗(yàn)中，試驗(yàn)Ⅰ組空腸絨毛高度與對(duì)照組相比極顯著升高；試驗(yàn)Ⅱ和Ⅲ組回腸絨隱比與對(duì)照組相比極顯著降低。于潔等[7]試驗(yàn)表明，飼糧中添加枯草芽孢桿菌使肉鵝回腸絨毛高度顯著提升。張雪等[8]試驗(yàn)表明，飼糧中添加枯草芽孢桿菌組使肉雞回腸絨隱比提高，在一定程度上改善了回腸腸道形態(tài)。郭聰聰?shù)萚9]試驗(yàn)表明，枯草芽孢桿菌能提高乳鼠小腸緊密連接的形成以及改善腸屏障功能，有利于腸道發(fā)育。以上研究結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果一致。這是因?yàn)榭莶菅挎邨U菌進(jìn)入畜禽腸道內(nèi)會(huì)迅速萌發(fā)成營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，與腸道黏膜位點(diǎn)結(jié)合并定植[10]，形成生物屏障來(lái)阻止病原微生物的吸附與繁殖，從而改善腸道結(jié)構(gòu)，且能夠合成脂肽類(lèi)抗菌肽和蛋白類(lèi)抗菌物質(zhì)2種抑菌物質(zhì)，通過(guò)作用于生物膜的磷脂雙分子層或改變細(xì)胞膜的表面張力等途徑抑制有害菌的繁殖，促進(jìn)腸道內(nèi)微生物菌群的平衡[2,11]。

3.2 枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔盲腸揮發(fā)性脂肪酸含量的影響

腸道消化代謝產(chǎn)物與腸道健康息息相關(guān)，揮發(fā)性脂肪酸含量的提高可以改善腸道屏障功能，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收效率，保護(hù)黏膜上皮細(xì)胞的完整性，增強(qiáng)腸道免疫功能[12-13]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組腸道pH顯著降低。李月明等[14]研究表明，枯草芽孢桿菌使牛體外瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸含量顯著升高。李曉斌等[15]研究表明，添加益生菌使馬駒糞便中揮發(fā)性脂肪酸含量顯著提高。這些都與本試驗(yàn)結(jié)果一致，說(shuō)明添加枯草芽孢桿菌可以提高腸道揮發(fā)性脂肪酸生成，降低腸道pH，促進(jìn)腸道有益菌增殖，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，此外揮發(fā)性脂肪酸還可以為腸道發(fā)育供能，促進(jìn)腸道發(fā)育，增強(qiáng)腸道屏障功能，進(jìn)而改善腸道健康[2]。

3.3 枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔盲腸微生物多樣性的影響

Alpha多樣性是指一個(gè)特定環(huán)境或生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)的多樣性，主要用來(lái)反映物種豐富度和均勻度以及測(cè)序深度。Beta多樣性是指不同環(huán)境群落之間的物種差異性。二者一起構(gòu)成了總體多樣性或一定環(huán)境群落的生物異質(zhì)性[16-17]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組盲腸微生物OTU數(shù)目和Chao1指數(shù)極顯著提高，試驗(yàn)Ⅲ組OTU數(shù)目和Chao1指數(shù)極顯著降低。張書(shū)環(huán)等[18]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加低劑量枯草芽孢桿菌使雜交鱘腸道微生物多樣性升高，但隨著添加劑量增加，腸道微生物多樣性顯著下降。Li等[19]的研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌增加了肉雞回腸的微生物多樣性。張?chǎng)┑萚20]的研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌作為益生菌劑能夠?qū)α_非魚(yú)腸道菌群起到顯著調(diào)節(jié)作用，并使羅非魚(yú)腸道菌群多樣性維持在了一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的水平。以上研究結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果一致，枯草芽孢桿菌定植于腸道可以有效阻止致病菌與腸道黏膜受體結(jié)合，抑制病原菌的擴(kuò)散；且能消耗大量的氧氣，阻止腸道中部分有害需氧菌的繁殖，為乳酸菌、雙歧桿菌等有益厭氧菌的生長(zhǎng)提供了條件，使腸道菌群得以穩(wěn)定[2,21]。但在本試驗(yàn)，中、高劑量枯草芽孢桿菌對(duì)微生物多樣性造成了負(fù)面影響，這可能是因?yàn)檫^(guò)高劑量的枯草芽孢桿菌會(huì)改變腸道內(nèi)微生物群落的結(jié)構(gòu)，造成腸道菌群失調(diào)，影響了腸道健康。

表7 試驗(yàn)兔盲腸微生物菌群在屬水平上的分布Table 7 Distribution of cecal microflora of experimental rabbits at genus level %

3.4 枯草芽孢桿菌對(duì)肉兔盲腸微生物組成的影響

腸道健康與否主要與微生物群落的穩(wěn)定性、腸道結(jié)構(gòu)的完整度和黏膜屏障等有關(guān)[22]。已知厚壁菌門(mén)細(xì)菌類(lèi)群參與復(fù)雜碳水化合物的降解和短鏈脂肪酸的產(chǎn)生[23]。擬桿菌屬的成員是參與碳水化合物代謝的主要生物，它們通過(guò)表達(dá)糖基轉(zhuǎn)移酶、糖苷水解酶和多糖裂解酶等酶來(lái)完成代謝[24]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在門(mén)水平上，擬桿菌門(mén)和厚壁菌門(mén)為主要菌落，占微生物群落總數(shù)的80%以上，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組厚壁菌門(mén)和擬桿菌門(mén)的相對(duì)豐度提高，使有益菌占比上升。這與前人的結(jié)論[25-27]一致；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅱ組變形菌門(mén)的相對(duì)豐度顯著降低。變形菌門(mén)包括大腸桿菌、沙門(mén)氏菌等有害菌，其占比上升將導(dǎo)致機(jī)體腸道炎癥，造成病變[28]。Xing等[29]研究也表明，飼糧添加枯草芽孢桿菌對(duì)肉鴨小腸內(nèi)大腸桿菌抑制作用明顯，且提高了盲腸內(nèi)乳酸菌和雙歧桿菌的數(shù)量，乳酸菌通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)排斥抑制各種沙門(mén)氏菌的黏附，并參與腸細(xì)胞和其他上皮細(xì)胞的相互作用，以改善免疫系統(tǒng)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在屬水平上，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組瘤胃球菌科NK4A214群、克里斯滕森氏菌R-7群、瘤胃球菌科UCG-014、?？莆捶诸?lèi)菌屬、艾克曼菌屬的相對(duì)豐度較高。瘤胃球菌科通常是短鏈脂肪酸的生產(chǎn)者，它在降解多種多糖和纖維中發(fā)揮著關(guān)鍵作用[30]?？死锼闺暇菍儆诤癖诰T(mén)的一類(lèi)菌科，同是代表機(jī)體健康的類(lèi)群[31]。桑菌科則是屬于擬桿菌門(mén)的一類(lèi)菌科，同屬有益菌[32]。艾克曼菌是一種定植于黏膜層的腸道共生體，被認(rèn)為是一種很有前途的候選益生菌。在改善宿主代謝功能和免疫應(yīng)答方面具有重要價(jià)值[33]。這些益生菌的相對(duì)豐度均增高，說(shuō)明腸道菌群平衡變好。

4 結(jié) 論

飼糧添加枯草芽孢桿菌會(huì)影響肉兔盲腸菌群結(jié)構(gòu)，添加適宜劑量(100 g/t)枯草芽孢桿菌可以改善肉兔腸道形態(tài)，豐富肉兔盲腸微生物多樣性，平衡腸道菌群，提高家兔生長(zhǎng)性能；而枯草芽孢桿菌添加量過(guò)高，則會(huì)對(duì)肉兔腸道健康造成負(fù)面影響。