謝 亮 龍江松 伍志武 方熱軍*

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長沙 410128；2.湖南畜禽安全生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心，長沙 410128)

微量元素硒對肉牛具有重要的生理功能，在體內(nèi)發(fā)揮抗氧化、免疫、運(yùn)輸和調(diào)節(jié)激素合成等重要作用[1]。硒的合理利用可以起到增強(qiáng)肉?？共×?，提升機(jī)體健康水平和生產(chǎn)性能的作用。新型微量元素的使用可以起到減量增效的作用，降低微量元素使用量，緩解環(huán)境壓力[2]。微生態(tài)制劑具有提高動物生長性能、維持腸道菌群平衡、改善肉品質(zhì)、增強(qiáng)抗病力等多種作用。微生態(tài)制劑作為綠色添加劑具有生態(tài)、高效、無公害和無殘留等特點(diǎn)，已經(jīng)成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)，在反芻動物與環(huán)境治理上應(yīng)用越來越廣泛。大量研究表明，硒和微生態(tài)制劑在生物學(xué)上具有相似的功能，均能提高畜禽的健康水平與生產(chǎn)力[3-6]。然而，硒與微生態(tài)制劑聯(lián)用對肉牛營養(yǎng)物質(zhì)消化率、瘤胃發(fā)酵及瘤胃微生物區(qū)系的影響卻鮮有報道。因此，本研究旨在探究2種形式硒源和微生態(tài)制劑對育肥肉牛營養(yǎng)物質(zhì)消化率、瘤胃發(fā)酵及瘤胃微生物區(qū)系的影響，從而為硒和微生態(tài)制劑聯(lián)用產(chǎn)品的研究開發(fā)及其在我國肉牛生產(chǎn)中的應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

無機(jī)硒：亞硒酸鈉，硒含量為1%。

有機(jī)硒：酵母硒，硒含量為0.2%。

微生態(tài)制劑：乳酸菌數(shù)量≥2×108CFU/kg，酵母菌數(shù)量≥3×107CFU/kg，為EM菌深度發(fā)酵產(chǎn)品。

1.2 試驗設(shè)計

采用2×2雙因子隨機(jī)試驗設(shè)計，選取平均體重為(407.48±36.13) kg的健康新疆褐牛雜交牛24頭，隨機(jī)分為4組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)1頭牛。在精料補(bǔ)充料中，A組添加0.68 mg/kg無機(jī)硒(亞硒酸鈉)；B組混合添加0.68 mg/kg無機(jī)硒(亞硒酸鈉)和3%微生態(tài)制劑；C組添加0.68 mg/kg有機(jī)硒(酵母硒)；D組混合添加0.68 mg/kg有機(jī)硒(酵母硒)和3%微生態(tài)制劑。預(yù)試期14 d，正試期37 d。

1.3 試驗飼糧及飼養(yǎng)管理

試驗飼糧參照我國《肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 815—2004)配制，精粗比為37∶63，試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1，試驗用粗飼料營養(yǎng)水平見表2。試驗牛全部采用栓系飼喂，每日喂2次(09:00、16:00)，試驗期間精料補(bǔ)充料與粗飼料每天按組稱量后按先粗后精的順序飼喂，試驗牛自由采食和飲水，圈舍保持干凈衛(wèi)生，每周消毒1次。精料補(bǔ)充料的飼喂量為肉牛體重的1%，每月根據(jù)體重調(diào)整1次飼喂量。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the experimental diet (DM basis)

表2 粗料的營養(yǎng)水平Table 2 Nutrient levels of forages

1.4 測定指標(biāo)與方法

1.4.1 營養(yǎng)物質(zhì)消化率的測定

利用全收糞法于正試期第33天從每組中選取3頭健康、體重相近的試驗牛進(jìn)行消化試驗，采用集糞桶連續(xù)收集5 d的全部糞樣，每12 h收集1次，稱重后按總重量的10%取樣，每100 g加入20 mL 10%硫酸進(jìn)行固氮，將5 d的糞樣混合好后置于-20 ℃冰箱保存。利用楊勝[8]介紹的飼料分析方法分別對飼糧和糞樣中干物質(zhì)(DM)、中性洗滌纖維(NDF)、粗蛋白質(zhì)(CP)含量進(jìn)行測定。各營養(yǎng)物質(zhì)消化率計算公式如下：

DM消化率(%)=100×(DM攝入量-
DM排出量)/DM攝入量；
NDF消化率(%)=100×(NDF攝入量-
NDF排出量)/NDF攝入量；
CP消化率(%)=100×(CP攝入量-
CP排出量)/CP攝入量。

1.4.2 瘤胃發(fā)酵參數(shù)的測定

于試驗最后1 d每組選取健康、體重相近的3頭牛進(jìn)行瘤胃液的采集。每頭牛采集飼后3 h的瘤胃液，采樣前保證每頭牛有充足的飲水，提前固定試驗牛的活動。采樣時，首先將每頭牛的牛頭進(jìn)行固定，幾個人同時合作，拉拽牛頭向正前方，使牛的頭部位置便于插管，使頸部向上伸直，然后，將清洗干凈的不銹鋼彈簧軟管插入，經(jīng)咽喉、食管放入瘤胃。確認(rèn)位置后，用針筒抽拉抽取瘤胃液。從每頭牛的瘤胃中抽取約100 mL的瘤胃液，瘤胃液采完后緩慢抽出采樣管。采樣時，對所有牛應(yīng)盡量采用相同的插入手法和深度，在采集每頭牛的瘤胃液樣品后，用清水將采樣管內(nèi)、外部清洗干凈，再采取下一頭牛的瘤胃液。抽取出的瘤胃液應(yīng)去出除浮沫，用酸度計直接測定pH(PHS-10便攜式pH計)，再用4層紗布過濾，濾去大塊的食物殘渣，裝于凍存管中放入液氮，后-80 ℃保存。

瘤胃液氨態(tài)氮(NH3-N)濃度參照馮宗慈[9]的比色法測定。用日本島津GC-2010Plus氣相色譜儀測定瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸濃度，色譜條件為：色譜柱選用DB-FFAP柱，規(guī)格為30 m×250 μm×0.25 μm；載氣為高純氮?dú)?99.999%)，流量0.8 mL/min；輔助氣為高純氫氣(99.999%)，火焰離子化檢測器(FID)溫度280 ℃，進(jìn)樣口溫度250 ℃，分流比50∶1，進(jìn)樣量為1 μL；程序升溫，初始溫度60 ℃，以20 ℃/min速率升溫至220 ℃，保持1 min。

1.4.3 瘤胃內(nèi)微生物區(qū)系的測定

將瘤胃液樣品在干冰條件下送至上海美吉科技生物有限公司，采用Illumina MiSeq/NovaSeq平臺對24個肉牛瘤胃液樣本中細(xì)菌群落DNA片段進(jìn)行16S rRNA基因的V3～V4區(qū)雙端(paired-end)測序。從DNA提取到上機(jī)測序步驟：1)微生物組總DNA提??；2)目標(biāo)片段PCR擴(kuò)增；3)擴(kuò)增產(chǎn)物磁珠純化回收；4)擴(kuò)增產(chǎn)物熒光定量；5)測序文庫制備；6)上機(jī)進(jìn)行高通量測序；7)結(jié)果分析，包括對高通量測序的原始下機(jī)數(shù)據(jù)根據(jù)序列質(zhì)量進(jìn)行初步篩查，對問題樣本進(jìn)行重測、補(bǔ)測，然后切除序列的引物片段，棄去未匹配引物的序列，進(jìn)行質(zhì)控、去噪、拼接、去嵌合體等步驟。使用DADA2質(zhì)控后產(chǎn)生的每個去重的序列稱為特征序列，即操作分類單元(OTU)代表序列，而這些序列在樣本中的豐度表稱為特征表(對應(yīng)于OTU表)。進(jìn)行生物信息學(xué)分析主要包括OTU聚類分析、Alpha多樣性分析、微生物群落結(jié)構(gòu)分析、菌群門和屬相對豐度的分類學(xué)組成分析、Beta多樣性分析等。

1.5 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2016進(jìn)行初步整理后，用SPSS 26.0進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),若差異顯著，則采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較；進(jìn)一步采用一般線性模型單變量雙因素方差分析處理，分析硒源和微生態(tài)制劑2個主效應(yīng)以及硒源與微生態(tài)制劑交互作用的影響。結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著，0.05≤P<0.10為差異有顯著趨勢。

2 結(jié)果與分析

2.1 硒源和微生態(tài)制劑對肉牛營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

由表3可知，各組之間DM、CP、NDF消化率差異均不顯著(P>0.05)，但從數(shù)值上看：C組的DM消化率最高，其次是B組，A組最低；C組的CP排出量最低，相較于A組、B組、D組分別降低22.58%、3.45%、24.32%，同時C組的CP消化率最高，A組最低；C組的NDF消化率最高，其次是B組，D組最低。硒源和微生態(tài)制劑以及二者的交互作用對肉牛DM、CP、NDF消化率均無顯著影響(P>0.05)。

表3 硒源和微生態(tài)制劑對肉牛營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響Table 3 Effects of selenium source and microecological agent on nutrient digestibility of beef cattle

2.2 硒源和微生態(tài)制劑對肉牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響

由表4可知，各項瘤胃發(fā)酵參數(shù)在各組間差異不顯著(P>0.05)。硒源除對瘤胃液乙酸/丙酸值的影響有顯著的趨勢(P=0.098)外，對其他瘤胃發(fā)酵參數(shù)均無顯著影響(P>0.05)，其中有機(jī)硒組的乙酸/丙酸值小于無機(jī)硒組。微生態(tài)制劑對瘤胃液氨態(tài)氮濃度的影響顯著(P<0.05)。綜上可知，飼糧中添加不同硒源對肉牛各項瘤胃發(fā)酵參數(shù)均無顯著影響，添加微生態(tài)制劑可以顯著提高瘤胃液氨態(tài)氮濃度，硒源和微生態(tài)制劑的交互作用對各項瘤胃發(fā)酵參數(shù)無顯著影響。

表4 硒源和微生態(tài)制劑對肉牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響Table 4 Effects of selenium source and microecological agent on rumen fermentation parameters of beef cattle

續(xù)表4項目 Items組別 GroupsABCDP值 P-value硒源Selenium source微生態(tài)制劑Microecological agent硒源×微生態(tài)制劑 Selenium source×microecological agent 丁酸 Butyrate/(mmol/L)12.29±2.2224.20±19.0712.32±3.8113.47±2.870.3760.2860.374戊酸 Valerate/(mmol/L)1.65±0.283.01±1.782.15±0.641.93±0.510.6590.3920.249異戊酸 Isovalerate/(mmol/L)2.88±0.383.70±1.442.72±0.412.97±0.550.3720.2890.571乙酸/丙酸 Acetate/propionate3.22±0.592.97±0.152.85±0.212.62±0.190.0980.2590.953總揮發(fā)性脂肪酸 TVAF/(mmol/L)81.85±11.75130.27±79.8381.02±20.0983.64±14.660.3590.3260.375pH7.21±0.217.30±0.037.18±0.207.14±0.180.3650.8070.510氨態(tài)氮 NH3-N/(mmol/L)2.41±1.533.01±1.291.86±1.074.63±0.080.4340.0330.135

2.3 硒源和微生態(tài)制劑對肉牛瘤胃微生物區(qū)系的影響

本試驗檢測了12個肉牛瘤胃液樣本，共計得到590 636條有效序列和4 666個相似性大于97%的OTU，各組樣本具體情況見表5。稀疏曲線可以評估測序深度是否足以覆蓋樣本中所有物種，是生態(tài)學(xué)領(lǐng)域的一種常用方法，通過從每個樣本中隨機(jī)抽取一定數(shù)量的序列(即在不超過現(xiàn)有樣本測序量的某個深度下進(jìn)行重抽樣)，可以預(yù)測樣本在一系列給定的測序深度下，所可能包含的物種總數(shù)及其中每個物種的相對豐度。稀疏曲線的平緩程度反映了測序深度對于觀測樣本多樣性的影響大小，曲線越平緩，表明測序結(jié)果已足夠反映當(dāng)前樣本所包含的多樣性，繼續(xù)增加測序深度已無法檢測到大量的尚未發(fā)現(xiàn)的新OTU；反之，則表明Alpha多樣性尚未接近飽和。圖1為瘤胃液12個樣本的稀疏曲線，稀疏曲線逐漸平緩，說明測序數(shù)據(jù)量足夠大，可以反映樣品中絕大多數(shù)的微生物物種信息。

橫坐標(biāo)代表隨機(jī)抽取的測序數(shù)據(jù)量；縱坐標(biāo)代表觀測到的物種數(shù)量。The abscissa represented the amount of sequencing data randomly extracted; the vertical axis represented the number of species observed.圖1 瘤胃液12個樣本的稀釋曲線Fig.1 Rarefaction curve of 12 rumen fluid samples

表5 樣本有效序列及OTU數(shù)目統(tǒng)計Table 5 Statistics of sample effective sequence and OTU number

試驗肉牛瘤胃微生物Alpha多樣性指數(shù)分析見表6。代表群落多樣性的Shannon指數(shù)越大，其群落多樣性就越高，其中，B組數(shù)值最高，D組數(shù)值最低，但各組間差異均不顯著(P>0.05)。代表群落豐富度的Chao指數(shù)越大，其群落豐富度就越高，其中C組數(shù)值最高，D組數(shù)值最低，但各組間差異均不顯著(P>0.05)。

表6 硒源和微生態(tài)制劑對肉牛瘤胃微生物Alpha多樣性指數(shù)的影響Table 6 Effects of selenium source and microecological agent on rumen microbial Alpha diversity indexes of beef cattle

各組肉牛瘤胃微生物韋恩圖見圖2。由韋恩圖可知，在相似性大于97%的水平下，A組OTU數(shù)目為1 172個，B組為1 151個，C組為1 210個，D組為1 133個，C組OTU最豐富。各組共用的OTU數(shù)目為791個。A組特有OTU數(shù)目為59個，B組為48個，C組為82個，D組為48個，分別占其OTU數(shù)目的5.03%、4.17%、6.78%、4.24%，表明各組OTU組成相似度高，差異較小。

圖2 瘤胃微生物韋恩圖Fig.2 Venn diagram of rumen microbes

物種注釋共獲得20個門，其中有3個優(yōu)勢菌門，相對豐度由高到低依次為厚壁菌門(Firmicutes)、擬桿菌門(Bacteroidetes)、放線菌門(Actinobacteria)，各組肉牛瘤胃菌群在門水平上的組成見圖3。對排名靠前的幾個菌門的相對豐度進(jìn)行分析，結(jié)果見表7。A組和B組厚壁菌門的相對豐度顯著高于C組(P<0.05)，擬桿菌門的相對豐度顯著低于C組(P<0.05)。硒源對厚壁菌門的相對豐度有極顯著影響(P<0.01)，對擬桿菌門、放線菌門的相對豐度有顯著影響(P<0.05)。微生態(tài)制劑以及硒源與微生態(tài)制劑的交互作用對瘤胃各菌門的相對豐度均無顯著影響(P>0.05)。

表7 硒源和微生態(tài)制劑對肉牛瘤胃菌群門水平相對豐度的影響Table 7 Effects of selenium source and microecological agent on relative abundance of rumen bacterial community at phylum level of beef cattle %

續(xù)表7項目 Items組別 GroupsABCDP值 P-value硒源Selenium source微生態(tài)制劑Microecological agent硒源×微生態(tài)制劑 Selenium source×microecological agent 擬桿菌門Bacteroidetes19.29±8.79a22.54±1.94a47.53±9.13b44.72±25.09ab0.0150.9790.719放線菌門Actinobacteria1.48±0.401.91±0.710.78±0.201.00±0.720.0350.3360.765Patescibacteria0.68±0.370.67±0.260.54±0.140.41±0.370.2770.7030.745疣微菌門Verrucomicrobia0.58±0.240.46±0.210.37±0.070.30±0.170.1230.3860.821

圖3 瘤胃菌群門水平組成Fig.3 Composition of rumen bacterial community at phylum level

物種注釋共獲得282個屬，其中普雷沃菌屬(Prevotella)、NKA214菌群(NK4A214_group)、克里斯滕森菌科R7菌群(Christensenellaceae_R7_group)、解琥珀酸菌屬(Succiniclasticum)、毛螺菌科NK3A20菌群(Lachnospiraceae_NK3A20_group)屬于核心菌屬，各組肉牛瘤胃菌群在屬水平上的組成見圖4。對排名靠前的幾個菌屬的相對豐度進(jìn)行分析，結(jié)果見表8。A組和B組瘤胃NKA214菌群的相對豐度顯著高于C組和D組(P<0.05)。硒源對瘤胃NKA214菌群的相對豐度有極顯著影響(P<0.01)，對普雷沃菌屬的相對豐度有顯著影響(P<0.05)。微生態(tài)制劑以及硒源與微生態(tài)制劑的交互作用對瘤胃各菌屬的相對豐度均無顯著影響(P>0.05)。

表8 硒源和微生態(tài)制劑對肉牛瘤胃菌群屬水平相對豐度的影響 Table 8 Effects of selenium source and microecological agent on relative abundance of rumen bacterial community at genus level of beef cattle %

圖4 瘤胃菌群屬水平組成Fig.4 Composition of rumen bacterial community at genus level

3 討 論

3.1 硒源和微生態(tài)制劑對肉牛營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

有研究表明，在飼糧中補(bǔ)充有機(jī)硒(納米硒、酵母硒)可以提高綿羊的DM、有機(jī)物(OM)、CP、粗脂肪(EE)、NDF和酸性洗滌纖維(ADF)消化率，其中納米硒還可提高瘤胃發(fā)酵功能[10]。董升[11]研究表明，飼糧中添加0.6 mg/kg包被硒可極顯著提高玉米秸稈的OM、ADF、NDF降解率。但也有研究表明，飼糧中添加不同硒源(亞硒酸鈉、硒代蛋氨酸、酵母硒)對奶牛飼糧的DM、CP、NDF、ADF消化率無顯著影響[12]。本試驗結(jié)果表明，硒源和微生態(tài)制劑對肉牛營養(yǎng)物質(zhì)消化率均無顯著影響，但與添加無機(jī)硒的A組相比，添加有機(jī)硒的C組的DM、CP、NDF消化率分別提高了6.09%、7.29%、3.64%。在本試驗條件下，添加有機(jī)硒時肉牛營養(yǎng)物質(zhì)消化率優(yōu)于無機(jī)硒，這與前人研究結(jié)果基本相同，這可能是因為酵母硒含有大量的營養(yǎng)成分和某些協(xié)調(diào)因子，可增強(qiáng)瘤胃微生物的活性，間接性地促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)在瘤胃中的消化吸收，具體原因有待進(jìn)一步研究。

目前，大量研究表明益生菌可以分解大分子營養(yǎng)物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、糖類等，同時還可以促進(jìn)機(jī)體消化道的發(fā)育及內(nèi)源酶的分泌[13-14]。高堂亮等[15]研究表明，飼糧中添加活菌量為5×1010CFU/(頭·d)的微生態(tài)制劑，可顯著提高肉牛的DM消化率，改善其對CP、EE、NDF和ADF的消化能力。李光梅等[16]研究表明，在飼糧中添加500或1 000 mg/kg的微生態(tài)制劑可顯著提高綿羊DM、EE、CP的消化率。本試驗條件下，微生態(tài)制劑及其與硒聯(lián)用對肉牛營養(yǎng)物質(zhì)消化率無顯著影響，與前人研究結(jié)果不一致，可能是因為微生態(tài)制劑中益生菌的種類、添加劑量，試驗飼糧以及牛的品種與年齡不同造成的。

3.2 硒源和微生態(tài)制劑對肉牛瘤胃發(fā)酵的影響

硒源對反芻動物瘤胃功能具有重要影響，微量元素可維持瘤胃微生物的正常功能[17]。硒對瘤胃功能的促進(jìn)作用可能是因為硒可以促進(jìn)瘤胃微生物與酶的活性[18]。Wei等[19]研究表明，蛋氨酸硒可提高泌乳中期奶牛中瘤胃液中總揮發(fā)性脂肪酸以及丙酸、丁酸濃度。本研究表明，肉牛飼糧中添加不同硒源對瘤胃發(fā)酵參數(shù)無顯著影響，但對乙酸/丙酸值的影響有顯著性趨勢，其中有機(jī)硒組的乙酸/丙酸值小于無機(jī)組。這說明添加有機(jī)硒肉牛的瘤胃發(fā)酵更趨向與丙酸型發(fā)酵，而丙酸是肉牛主要的生糖物質(zhì)，瘤胃中丙酸濃度越高說明肉?？梢垣@得的用于增重的能量越多。

Shen等[20]研究表明，酵母培養(yǎng)物可改善高精飼糧條件下肉牛瘤胃液pH的穩(wěn)定性。瘤胃乳頭高度、寬度及瘤胃壁厚度可以反映反芻動物瘤胃的發(fā)育情況，寇慧娟等[21]研究表明，酵母培養(yǎng)物可促進(jìn)羔羊瘤胃發(fā)育。曹文新[22]在羔羊飼糧中添加滅活酵母培養(yǎng)物，結(jié)果表明滅活酵母可提高瘤胃液中丙酸、總揮發(fā)性脂肪酸的濃度，其中以添加量為15 g/(d·只)時效果最優(yōu)。黎凌鑠等[23]研究表明，微生態(tài)制劑可以促進(jìn)瘤胃發(fā)酵從乙酸型向丙酸型轉(zhuǎn)變，提高能量利用效率。但也有研究表明，微生態(tài)制劑對反芻動物瘤胃液pH與揮發(fā)性脂肪酸濃度無顯著影響[24-25]。本試驗中，硒源和微生態(tài)制劑對肉牛瘤胃液pH均無顯著影響，且各組瘤胃液pH均在正常生理范圍內(nèi)；此外，硒源和微生態(tài)制劑對肉牛瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸濃度均無顯著影響，可能是硒與微生態(tài)制劑對瘤胃液中碳水化合物降解菌群的影響并不顯著所導(dǎo)致。氨態(tài)氮主要由飼糧中蛋白質(zhì)在瘤胃中被微生物降解生成，是合成菌體蛋白的重要前體物質(zhì)。本試驗中，添加微生態(tài)制劑促進(jìn)了飼糧蛋白質(zhì)在瘤胃中的分解，進(jìn)而顯著提高了瘤胃液氨態(tài)氮濃度。

3.3 硒源和微生態(tài)制劑對肉牛瘤胃微生物區(qū)系的影響

Myer等[26]對10多種肉牛瘤胃微生物區(qū)系組成的研究結(jié)果表明，擬桿菌門與厚壁菌門是肉牛瘤胃中的優(yōu)勢菌門。本試驗條件下，各組肉牛瘤胃中優(yōu)勢菌門為厚壁菌門與擬桿菌門，與前人結(jié)果一致。厚壁菌門主要參與纖維物質(zhì)的降解，與乙酸和乳脂的生成及脂肪的沉積密切相關(guān)；擬桿菌門主要參與非纖維物質(zhì)的降解，與瘤胃中丙酸的生成具有正相關(guān)關(guān)系[27]。本試驗中，無機(jī)硒組厚壁菌門的相對豐度高于有機(jī)硒組，有機(jī)硒組擬桿菌門的相對豐度高于無機(jī)硒組，推測硒源可能會影響瘤胃中優(yōu)勢菌門的豐度，其中添加無機(jī)硒更易降解纖維素，提高乙酸濃度，添加有機(jī)硒更易降解非纖維類物質(zhì)，提高丙酸濃度。這印證了本試驗中乙酸/丙酸值的結(jié)果，添加有機(jī)硒的肉牛瘤胃發(fā)酵更趨向于丙酸型發(fā)酵，有利于獲得更多能量用于增重。NKA214菌群是厚壁菌門中的一種革蘭氏陰性菌，可降解纖維物質(zhì)產(chǎn)生乙酸[28]。普雷沃菌屬能夠降解半纖維素為解琥珀酸菌屬生成丙酸提供底物[29]。本試驗中，有機(jī)硒組瘤胃NKA214菌群的相對豐度極顯著低于無機(jī)硒組，有機(jī)硒組瘤胃普雷沃菌屬的相對豐度顯著高于無機(jī)硒組，表明有機(jī)硒可通過降低NKA214菌群的相對豐度，促進(jìn)普雷沃菌屬的增殖來提高乙酸、丙酸產(chǎn)量，改善瘤胃發(fā)酵模式。

4 結(jié) 論

在精料補(bǔ)充料中添加不同形式硒源與微生態(tài)制劑對肉牛的營養(yǎng)物質(zhì)消化率均無顯著影響，但添加微生態(tài)制劑可提高瘤胃液氨態(tài)氮濃度，促進(jìn)蛋白質(zhì)的利用，添加有機(jī)硒可影響瘤胃菌群組成，降低瘤胃液乙酸/丙酸值，改善瘤胃發(fā)酵。