陳猜猜 張紅星 金君華 謝遠(yuǎn)紅 熊利霞 劉 慧

(北京農(nóng)學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院，微生態(tài)制劑關(guān)鍵技術(shù)開發(fā)北京市工程實(shí)驗(yàn)室，食品質(zhì)量與安全北京實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)產(chǎn)品有害微生物及農(nóng)殘安全檢測與控制北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 102206)

產(chǎn)蛋后期種母雞腸道菌群失調(diào)，代謝能力下降，對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力減弱，導(dǎo)致生產(chǎn)性能降低，嚴(yán)重影響?zhàn)B殖業(yè)經(jīng)濟(jì)效益[1-2]。目前家禽養(yǎng)殖過程中已禁止使用促生長添加劑，與此同時，微生態(tài)制劑作為遵循微生物環(huán)境自然循環(huán)法則的無公害制劑，因其具有改善機(jī)體腸道菌群環(huán)境、提高消化吸收的功能而備受關(guān)注[3-5]。乳酸菌微生態(tài)制劑可定植于腸道中，通過降解碳水化合物產(chǎn)生乳酸及其他有機(jī)酸降低腸道環(huán)境pH，抑制其他病菌和雜菌的生長繁殖，不僅起到調(diào)節(jié)菌群、防治疾病和促生長的作用，而且避免了使用抗生素類藥物產(chǎn)生的藥物殘留問題[6-7]。好氧的芽孢桿菌微生態(tài)制劑不僅能夠消耗腸道多余的氧氣利于乳酸菌生長，還可分泌各種消化酶促進(jìn)腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力[8-9]。Behnamifar等[10]研究證明，在產(chǎn)蛋后期蛋雞飼糧中添加105CFU/(只·d)乳酸桿菌活菌制劑8周，可顯著增加蛋雞的回腸絨腺比，增強(qiáng)蛋雞消化吸收能力，提高生產(chǎn)性能。黃晨軒等[11]在產(chǎn)蛋后期蛋雞飼糧中連續(xù)4周添加108CFU/(只·d)枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑，改善了蛋雞的腸道菌群平衡，增加飼糧中的粗蛋白質(zhì)表觀消化率，從而提高其生產(chǎn)性能。Zhang等[12]在產(chǎn)蛋高峰期蛋雞飼糧中添加106CFU/(只·d)枯草芽孢桿菌制劑8周，顯著提高其腸道消化吸收能力，改善生產(chǎn)性能。Lei等[13]在產(chǎn)蛋高峰期蛋雞飼糧中添加107CFU/(只·d)地衣芽孢桿菌制劑8周，可顯著增加空腸絨腺比，增強(qiáng)腸道消化吸收能力，提高蛋雞產(chǎn)蛋率和合格率。目前，有關(guān)副干酪乳桿菌和枯草芽孢桿菌復(fù)合微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞生產(chǎn)性能、腸道菌群和消化吸收影響的研究鮮有報道。因此，本試驗(yàn)旨在研究副干酪乳桿菌、枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑及兩者復(fù)合使用對產(chǎn)蛋后期種母雞腸道菌群平衡和消化吸收能力的影響，明確微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞生產(chǎn)性能的作用，為家禽業(yè)生產(chǎn)綠色和安全的微生態(tài)生物飼料添加劑提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 微生態(tài)制劑

副干酪乳桿菌KL1(CGMCC No.11533)為本課題組高產(chǎn)膽鹽水解酶和胞外多糖的專利菌株[14-15]；枯草芽孢桿菌Liu-c1(CGMCC No.20840)為本課題組高產(chǎn)蛋白酶和淀粉酶的專利菌株，均凍藏保存于中國普通微生物菌種保藏管理中心。將副干酪乳桿菌KL1和枯草芽孢桿菌Liu-c1的-80 ℃甘油保藏菌種經(jīng)活化擴(kuò)培、高密度發(fā)酵、離心濃縮、加入凍干保護(hù)劑、預(yù)凍和真空冷凍干燥等工序分別制備活菌數(shù)為8.0×1010CFU/g的副干酪乳桿菌KL1和枯草芽孢桿菌Liu-c1微生態(tài)制劑[16]，將2種微生態(tài)制劑分別用麥芽糊精稀釋，得到活菌數(shù)為8.0×108CFU/g的復(fù)合微生態(tài)制劑(副干酪乳桿菌KL1∶枯草芽孢桿菌Liu-c1=1∶1)，儲存于-20 ℃條件下備用。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計與飼養(yǎng)條件

選取飼養(yǎng)條件一致且體重接近的54周齡京紅1號父母代種母雞384只(由北京市華都峪口禽業(yè)有限責(zé)任公司提供)，隨機(jī)分為4組，每組96只(每組6個重復(fù)，每個重復(fù)16只)，空白組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組(KL1組、Liu-c1組和復(fù)合組)分別在基礎(chǔ)飼糧中添加1.0 g/kg的副干酪乳桿菌KL1、枯草芽孢桿菌Liu-c1和復(fù)合微生態(tài)制劑，使各試驗(yàn)組攝入活菌數(shù)量均為8.0×107CFU/只，試驗(yàn)期為8周，基礎(chǔ)飼糧由北京市華都峪口禽業(yè)提供，其組成及營養(yǎng)水平見表1。飼養(yǎng)條件依據(jù)峪口禽業(yè)飼養(yǎng)管理規(guī)定操作：3層A字型階梯式籠養(yǎng)(47 cm×47 cm)，每籠4只，光照強(qiáng)度10～15 lx，時長恒定15.5 h，溫度18～25 ℃，相對濕度40%～70%，按正常免疫程序進(jìn)行免疫接種，雞只自由采食、飲水，濕簾降溫，風(fēng)機(jī)通風(fēng)，定期清理糞便，環(huán)境，用具皆定期消毒。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

1.3 生產(chǎn)性能測定

試驗(yàn)期間，每天統(tǒng)計各組種母雞的產(chǎn)蛋總重量、產(chǎn)蛋總數(shù)、合格種蛋數(shù)(破殼蛋、砂殼蛋、軟殼蛋、畸形蛋、鋼皮蛋、蛋重<53 g或>72 g均為不合格種蛋)、日耗料量，計算第8周種母雞的平均蛋重、產(chǎn)蛋率、種蛋合格率和料蛋比。

1.4 腸道菌群結(jié)構(gòu)測定

1.4.1 腸道菌群多樣性測定

1.4.2 腸道乳酸桿菌和芽孢桿菌數(shù)量的測定

解剖后，分別準(zhǔn)確稱取每只種母雞的回腸內(nèi)容物1 g，放入裝有99 mL含0.1%吐溫生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式勻漿器以6 T/S拍打20 min，得到10-2樣品稀釋液。準(zhǔn)確吸取1 mL上述稀釋液于9 mL滅菌生理鹽水，漩渦振蕩30 s，得到10-3樣品稀釋液，依此重復(fù)上述操作，連續(xù)稀釋得到10-7稀釋度的菌液。分別選取10-4、10-5和10-6稀釋梯度樣品各1 mL于無菌平皿中，倒入溶化并冷卻至46 ℃的改良MRS固體培養(yǎng)基、改良PCA固體培養(yǎng)基約15 mL，迅速輕旋平皿使其與稀釋液混勻，每個稀釋度3個重復(fù)；待培養(yǎng)基凝固后，改良MRS固體培養(yǎng)基37 ℃倒置培養(yǎng)(48±2) h、改良PCA固體培養(yǎng)基45 ℃倒置培養(yǎng)(24±2) h，統(tǒng)計平板菌落數(shù)量，結(jié)果用每克回腸內(nèi)容物中菌數(shù)的對數(shù)(lg CFU/g)表示。

1.5 消化吸收能力的測定

1.5.1 十二指腸蛋白酶活性、粗蛋白質(zhì)表觀消化率的測定

解剖后，采集十二指腸段2 cm，于液氮速凍狀態(tài)下研磨，取10 mg加入磷酸鹽緩沖液100 μL，嚴(yán)格按照試劑盒的操作步驟檢測十二指腸中性蛋白酶和胰蛋白酶活性，試劑盒由上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供。

試驗(yàn)最后3 d，采用全收糞法，將糞盤固定在雞籠下，每天收集糞便并小心清除其中的飼糧和毛屑等雜物，混合均勻后取100 g加入10 mL 10% H2Cl固氮，再次充分混勻，65 ℃烘干至恒重，回潮過夜，粉碎均勻后過60目篩，采用內(nèi)源指示劑法(在樣品中加入4 mol/L鹽酸)測定飼糧和糞便中的粗蛋白質(zhì)及酸不溶灰分含量，計算粗蛋白質(zhì)表觀消化率。計算公式如下：

粗蛋白質(zhì)表觀消化率(%)=[1-(a×c)/
(b×d)]×100。

式中：a為糞樣中粗蛋白質(zhì)含量；b為飼糧中粗蛋白質(zhì)含量；c為飼糧中酸不溶灰分含量；d為糞樣中酸不溶灰分含量。

1.5.2 小腸絨毛形態(tài)觀察和絨腺比的測定

解剖后，采集種母雞的十二指腸和回腸段約2 cm，浸于10%中性福爾馬林固定液中1周，經(jīng)沖水、梯度酒精脫水、二甲苯透明、石蠟包埋、切片等處理后，進(jìn)行常規(guī)蘇木精-伊紅(HE)染色，得到十二指腸和回腸的組織切片[18]，以O(shè)lympus CX21顯微鏡觀察絨毛形態(tài)并測定絨毛高度和隱窩深度，計算絨毛高度與隱窩深度的比值，即為絨腺比。每個樣本觀察3張非連續(xù)切片，每張切片選取5個具有完整組織的視野，每個視野分別測定4組數(shù)據(jù)，其平均值作為1個測定數(shù)據(jù)。

1.6 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞生產(chǎn)性能的影響

如表2所示，與空白組相比，KL1組、Liu-c1組和復(fù)合組的平均體重和平均蛋重皆無顯著性差異(P>0.05)；產(chǎn)蛋率分別增加5.77%、5.37%和8.85%(P<0.05)；種蛋合格率分別提高12.65%、9.15%和14.43%(P<0.01)；KL1組料蛋比減少2.27%(P<0.05)，Liu-c1組和復(fù)合組減少4.09%和5.45%(P<0.01)。這表明2種微生態(tài)制劑單獨(dú)和復(fù)合使用皆能不同程度提高產(chǎn)蛋后期種母雞的產(chǎn)蛋率和種蛋合格率，降低料蛋比，其中復(fù)合微生態(tài)制劑效果最佳。

表2 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of microecologics on performance of breeding hens in late laying period

2.2 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響

2.2.1 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞回腸菌群多樣性的影響

利用Illumina MiSeq 2×300 bp平臺進(jìn)行高通量測序，分析不同微生態(tài)制劑對回腸微生物多樣性的影響。由圖1可知，在門水平上，各組回腸菌群主要為厚壁菌門(Firmicutes)、擬桿菌門(Bacteroidetes)、變形菌門(Proteobacteria)和放線菌門(Actinobacteria)，其中厚壁菌門多為優(yōu)勢菌群，如乳酸桿菌和芽孢桿菌，變形菌門多為致病菌和條件致病菌，如沙門氏菌和大腸桿菌。與空白組相比，KL1組和復(fù)合組厚壁菌門相對豐度分別增加29.37%和35.68%(P<0.05)，變形菌門相對豐度分別減少65.33% 和92.02%(P<0.01)；Liu-c1組厚壁菌門相對豐度增加5.15%(P>0.05)，變形菌門相對豐度減少48.32%(P<0.05)。由圖2可知，在屬水平上，與空白組相比，KL1組、Liu-c1組和復(fù)合組的乳桿菌屬相對豐度分別增加109.87%、77.86%和111.73%(P<0.01)，芽孢菌屬相對豐度分別增加107.43%、171.43%和300.00%(P<0.01)；顯示2種微生態(tài)制劑單獨(dú)和復(fù)合使用皆可促進(jìn)乳酸桿菌和芽孢桿菌在回腸中定植，增加腸道有益菌相對豐度，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，其中復(fù)合微生態(tài)制劑效果最佳。

Firmicutes：厚壁菌門；Proteobacteria：變形菌門；Actinobacteria：放線菌門；Bacteroidetes：擬桿菌門；Others:其他。A：空白組 blank group；B：KL1組 KL1 group；C：Liu-c1組 Liu-c1 group；D：復(fù)合組 compound group。下圖同 the same as below。圖1 產(chǎn)蛋后期種母雞腸道菌群門水平多樣性分析Fig.1 Analysis diversity on phylum level of intestinal flora of breeding hens in late laying period

Lactobacillus:乳酸菌屬；Romboutsia:羅姆布茨菌；Enterococcus:腸球菌屬；Escherichia-Shigella:大腸埃希氏菌屬-志賀氏菌；Burkholderia-Caballeronia-Burkholderia:伯克霍爾德菌-卡巴拉氏菌-伯克霍爾德菌；Turicibacter:蘇黎世桿菌屬；Clostridium sensu stricto-1:嚴(yán)格厭氧梭狀芽胞桿菌-1；Ruminococcus torques-group:瘤胃球菌屬群；Olsenella:歐陸森氏菌屬；Blautia:布勞特氏菌；Streptococcus:鏈球菌屬；unclassified-f-Lachnospiraceae:未分類革蘭氏菌-毛螺菌科；Rikenellaceae-RC9-gut-group:理研菌科-RC9腸道菌群；Gallibacteriu:加利細(xì)菌屬； Acinetobacter:不動桿菌屬; norank-f-F082:未分類革蘭氏菌屬-F082；Ruminococcaceae-UCG-014:瘤胃菌科-UCG-014; Prevotella-1:普氏菌屬-1；Collinsella:柯林斯氏菌屬；Peptococcus:消化球菌；Aeriscardovia:卡多維亞氏菌屬；Bacillus:芽孢桿菌屬； norank-f-norank-o-Saccharimonadales:未分類革蘭氏菌-Saccharimonadales；Eubacterium hallii group:霍氏真桿菌群；Campylobacter:彎曲菌屬；Bacteroides:擬桿菌屬；Others:其他。圖2 產(chǎn)蛋后期種母雞腸道菌群屬水平多樣性分析Fig.2 Analysis diversity on the genus level of intestinal flora of breeding chickens in late laying period

2.2.2 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞回腸乳酸桿菌和芽孢桿菌數(shù)量的影響

如表3所示，與空白組相比，KL1組、Liu-c1組和復(fù)合組乳酸桿菌數(shù)量分別增加28.70%、16.90%和34.51%(P<0.05)；KL1組芽孢桿菌數(shù)量增加4.60%(P>0.05)，Liu-c1組和復(fù)合組芽孢桿菌數(shù)量分別增加13.35%和23.37%(P<0.05)。顯示2種微生態(tài)制劑單獨(dú)和復(fù)合使用皆可不同程度增加回腸乳酸桿菌和芽孢桿菌數(shù)量，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，其中復(fù)合微生態(tài)制劑效果最佳。此結(jié)果與回腸高通量測序多樣性分析相一致。

表3 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞回腸乳酸桿菌和芽孢桿菌數(shù)量的影響Table 3 Effects of microecologics on Lactobacillus and Bacillus counts in ileum of breeding hens in late laying period lg (CFU/g)

2.3 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞消化吸收功能的影響

2.3.1 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞十二指腸蛋白酶活性和粗蛋白質(zhì)表觀消化率的影響

如表4所示，與空白組相比，KL1組和復(fù)合組十二指腸中性蛋白酶活性分別增加4.20%和13.13%(P>0.05)，胰蛋白酶活性分別增加21.46%和15.98%(P<0.01)，粗蛋白質(zhì)表觀消化率分別增加44.67%和48.50%(P<0.01)；Liu-c1組十二指腸中性蛋白酶、胰蛋白酶活性和粗蛋白質(zhì)表觀消化率分別增加31.35%、43.84%和102.44%(P<0.01)。顯示2種微生態(tài)制劑單獨(dú)和復(fù)合使用均能提高產(chǎn)蛋后期種母雞十二指腸蛋白酶活性和粗蛋白質(zhì)表觀消化率，其中Liu-c1組和復(fù)合微生態(tài)制劑效果最佳。

表4 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞十二指腸蛋白酶活性和粗蛋白質(zhì)表觀消化率的影響Table 4 Effects of microecologics on activity of duodenal protease and apparent digestibility of crude protein in breeding hens in late laying period

2.3.2 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞十二指腸和回腸絨毛形態(tài)的影響

如表5所示，與空白組相比，KL1組、Liu-c1組和復(fù)合組十二指腸絨毛高度分別增加53.99%、56.47%和58.19%(P<0.01)，隱窩深度分別減少19.86%、31.91%和36.88%(P<0.01)，絨腺比分別增加92.13%、129.15%和150.44%(P<0.01)。與空白組相比，KL1組回腸絨毛高度增加16.41%(P<0.05)，Liu-c1組和復(fù)合組絨毛高度分別增加34.49%和61.58%(P<0.01)；KL1組、Liu-c1組和復(fù)合組的隱窩深度無顯著變化(P>0.05)，絨腺比分別增加9.45%、34.40%和51.87%(P<0.01)。這表明2種微生態(tài)制劑單獨(dú)和復(fù)合使用均可增加產(chǎn)蛋后期種母雞十二指腸和回腸的絨腺比，提高腸道消化吸收能力，其中復(fù)合微生態(tài)制劑效果最佳。

表5 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞十二指腸和回腸絨毛形態(tài)的影響Table 5 Effects of microecologics on villi morphology of duodenum and ileum of breeding hens in late laying period

3 討 論

3.1 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞生產(chǎn)性能的影響

眾所周知，隨著日齡的增加，產(chǎn)蛋后期種母雞代謝水平逐漸減緩，腸道功能逐步退化，導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降。研究表明，副干酪乳桿菌KL1具有耐受胃腸道逆環(huán)境特性，能夠定植于雛雞腸道，改善菌群平衡，提高雛雞的生長性能[19]，并且具有增加產(chǎn)蛋高峰期蛋雞產(chǎn)蛋率和合格率，提高生產(chǎn)性能的作用[20]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，將副干酪乳桿菌KL1與枯草芽孢桿菌Liu-c1復(fù)合后，不僅顯著提高種母雞產(chǎn)蛋率，而且極顯著提高其種蛋合格率，極顯著降低料蛋比，顯示復(fù)合微生態(tài)制劑提高生產(chǎn)性能效果最佳。這是由于枯草芽孢桿菌Liu-c1不僅能夠消耗腸道內(nèi)氧氣，利于副干酪乳桿菌KL1的生長，而且能夠提高腸道蛋白酶活性，促進(jìn)腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，有效地提高種母雞的生產(chǎn)性能。于雷等[21]研究發(fā)現(xiàn)，添加107CFU/(只·d)枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌復(fù)合微生態(tài)制劑4周，可提高產(chǎn)蛋后期種母雞的產(chǎn)蛋率和種蛋合格率，降低料蛋比。Abdelqader等[22]研究報道添加107CFU/(只·d)枯草芽孢桿菌制劑10周能顯著提高蛋雞的產(chǎn)蛋率和合格率，降低料蛋比。胡昌艷[23]研究表明，添加106CFU/(只·d)乳酸桿菌和芽孢桿菌復(fù)合微生態(tài)制劑4周顯著提高了產(chǎn)蛋后期蛋雞的產(chǎn)蛋率和合格率等生產(chǎn)性能。以上研究結(jié)果和本試驗(yàn)結(jié)果皆一致。

3.2 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞腸道菌群的影響

家禽飼糧及原料中普遍存在霉菌毒素，蛋雞長期攝入含有低劑量霉菌毒素的飼糧，腸道菌群逐漸失調(diào)，生產(chǎn)性能受到嚴(yán)重影響[24-26]。副干酪乳桿菌KL1具有耐胃腸道逆環(huán)境特性，能夠調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，改善腸道微生態(tài)環(huán)境，且其代謝產(chǎn)生的乳酸可酸化腸內(nèi)環(huán)境，阻止飼料中的霉菌等有害微生物附著腸道黏膜，維持腸道微生態(tài)平衡，對動物生長和健康有重要意義[19,27]?？莶菅挎邨U菌通過消耗腸道內(nèi)的氧氣，降低腸道內(nèi)的氧化還原電勢，創(chuàng)造有利于乳酸菌生長的環(huán)境，扶植腸道內(nèi)的優(yōu)勢菌群，使失調(diào)的腸道菌群結(jié)構(gòu)恢復(fù)到正常狀態(tài)，起到抗菌防病的作用[28]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，副干酪乳桿菌KL1和枯草芽孢桿菌Liu-c1復(fù)合微生態(tài)制劑可顯著增加產(chǎn)蛋后期種母雞回腸乳酸桿菌和芽孢桿菌的相對豐度及數(shù)量，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，改善腸道健康，從而提高生產(chǎn)性能。Abdelqader等[29]在產(chǎn)蛋后期蛋雞飼糧中添加108CFU/(只·d)枯草芽孢桿菌制劑12周，回腸乳酸桿菌和芽孢桿菌數(shù)量顯著增加，腸道菌群平衡得到明顯改善，蛋雞生產(chǎn)性能得到顯著提高。Abdelqader等[22]在產(chǎn)蛋后期蛋雞的飼糧中添加107CFU/(只·d)枯草芽孢桿菌10周，能夠增加乳酸桿菌和雙歧桿菌等有益微生物數(shù)量，調(diào)節(jié)盲腸菌群平衡，改善腸道健康并促進(jìn)腸道消化吸收能力，從而提高生產(chǎn)性能。以上研究結(jié)果皆與本試驗(yàn)結(jié)果一致。

3.3 微生態(tài)制劑對產(chǎn)蛋后期種母雞小腸消化吸收能力的影響

飼糧進(jìn)入十二指腸后，與腸內(nèi)分泌的消化酶形成食糜一起進(jìn)入小腸，在小腸絨毛的作用下進(jìn)行全面而強(qiáng)烈的消化作用。腸道黏膜結(jié)構(gòu)與消化吸收功能是保證種母雞健康高效消化吸收營養(yǎng)物質(zhì)的必要條件。產(chǎn)蛋后期種母雞的腸道消化酶活性下降，絨腺比降低，營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用率減少，從而影響其生產(chǎn)性能[30]。研究表明，微生物定植與腸道發(fā)育密切相關(guān)，這種影響將決定機(jī)體的生長性能和健康狀況[31-32]?？莶菅挎邨U菌在腸內(nèi)可產(chǎn)生多種消化酶，分解蛋白質(zhì)，促進(jìn)腸道內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收[33]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，副干酪乳桿菌KL1和枯草芽孢桿菌Liu-c1復(fù)合微生態(tài)制劑可顯著提高十二指腸中性蛋白酶和雞胰蛋白酶活性，增加十二指腸絨腺比，促進(jìn)腸道對飼糧中粗蛋白質(zhì)的消化吸收，從而提高生產(chǎn)性能。Xing等[34]研究在產(chǎn)蛋后期京粉1號種母雞飼糧中添加107CFU/(只·d)凝結(jié)芽孢桿菌可顯著提高蛋雞十二指腸黏膜蛋白酶活性，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，提高生產(chǎn)性能。Lei等[13]研究發(fā)現(xiàn)蛋雞飼糧中添加108CFU/(只·d)枯草芽孢桿菌制劑顯著增加了十二指腸和回腸的絨毛高度，降低隱窩深度，改善絨毛形態(tài)，增強(qiáng)腸道吸收功能，從而提高蛋雞的生產(chǎn)性能。黃晨軒等[11]在蛋雞飼糧中添加108CFU/(只·d)芽孢桿菌微生態(tài)制劑顯著增加產(chǎn)蛋后期蛋雞的粗蛋白質(zhì)表觀消化率，提高蛋雞的生產(chǎn)性能。本試驗(yàn)通過添加復(fù)合微生態(tài)制劑增加產(chǎn)蛋后期種母雞的腸內(nèi)蛋白酶活性，從而顯著提高粗蛋白質(zhì)表觀消化率，但其消化率總體偏低，可能原因是產(chǎn)蛋后期種母雞羽毛易脫落，細(xì)小絨毛摻雜在糞便中難以分離，故導(dǎo)致糞樣中粗蛋白質(zhì)含量偏高而使其消化率結(jié)果偏低。

4 結(jié) 論

京紅1號父母代產(chǎn)蛋后期種母雞飼糧中添加副干酪乳桿菌KL1、枯草芽孢桿菌Liu-c1和復(fù)合微生態(tài)制劑皆能增加回腸有益菌的數(shù)量，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，提高十二指腸中性蛋白酶和胰蛋白酶活性，增加十二指腸和回腸絨腺比，提高飼糧中粗蛋白質(zhì)表觀消化率，從而提高種母雞的產(chǎn)蛋率和種蛋合格率，降低料蛋比，其中以復(fù)合微生態(tài)制劑效果最佳。