劉 娜 焦京琳 饒正華

(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，動物營養(yǎng)學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193)

霉菌毒素是霉菌在基質(zhì)中生長時(shí)所產(chǎn)生的有毒的代謝物[1]。研究表明，霉菌毒素可以引起人或者動物的各種病害[2-3]，其中黃曲霉毒素與苯并芘、亞硝酸鹽并稱三大致癌物[4]。而一旦有霉菌毒素產(chǎn)生，其穩(wěn)定的理化性質(zhì)使其在谷物的采收、運(yùn)輸及儲藏過程中長期存在[5]。丁燕玲等[6]對我國2015—2020年大部分地區(qū)的飼料原料及全價(jià)飼料的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，普遍存在霉菌毒素污染情況，其中最為嚴(yán)重的是華東地區(qū)，其次是華中、華北地區(qū)，而玉米中黃曲霉毒素B1(AFB1)、嘔吐毒素(DON，又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇)污染有逐漸加劇趨勢，全價(jià)飼料中霉菌毒素污染嚴(yán)重，檢出率和陽性值普遍偏高。Gruber-Dorninger等[7]在10年內(nèi)收集了100個國家的飼料并對其進(jìn)行霉菌毒素污染調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)88%的動物飼料中至少存在1種霉菌毒素。為加強(qiáng)飼料質(zhì)量安全監(jiān)管，我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部每年都會進(jìn)行全國飼料質(zhì)量安全監(jiān)督抽查工作。因此，為保障動物產(chǎn)品質(zhì)量安全，利用現(xiàn)代儀器分析手段建立高效可靠的痕量檢測技術(shù)尤為重要。

目前，針對霉菌毒素在飼料中的檢測方法多集中在快速檢測和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)分析上。這2類技術(shù)手段各有利弊，快速檢測具有檢測快速、靈敏等特點(diǎn)[8-10]，但容易產(chǎn)生假陽性；LC-MS分析具有結(jié)果精確、靈敏度高等特點(diǎn)[11-13]，但前處理過程和儀器條件較快速檢測復(fù)雜[14-15]。因此，本文對國內(nèi)外在飼料中霉菌毒素的檢測標(biāo)準(zhǔn)，以及近5年來國內(nèi)外學(xué)者利用主流的LC-MS技術(shù)在飼料原料及產(chǎn)品上對霉菌毒素的檢測方法進(jìn)行綜述，為開展飼料中霉菌毒素檢測提供技術(shù)參考。

1 飼料原料及產(chǎn)品中常見的霉菌毒素

1.1 常見的霉菌毒素種類

霉菌毒素污染引起的飼料腐敗會直接影響飼料安全。被霉菌毒素污染的飼料會帶來動物生產(chǎn)力下降、飼料轉(zhuǎn)換效率降低、營養(yǎng)利用受損等問題[16]。飼料原料及產(chǎn)品中常見的霉菌毒素包括黃曲霉毒素(AFs)、赭曲霉毒素(OA)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、嘔吐毒素、T-2毒素(T-2)及伏馬毒素(FBs)等[17]。其中，黃曲霉毒素是由5個雜環(huán)組成的呋喃香豆素衍生物，目前已知20余種黃曲霉毒素，常見的為黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2及其在牛奶中代謝物黃曲霉毒素M1、M2[18]；目前已知的赭曲霉毒素主要包括赭曲霉毒素A、B、C、α、β[19]；玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素在谷物中也普遍存在，歐洲委員會要求歐洲食品安全局就飼料中含有玉米赤霉烯酮及其代謝產(chǎn)物(α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇)、嘔吐毒素及其代謝產(chǎn)物(3-乙酰基脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、15-乙?；撗跹└牭毒┐?、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇-3-葡萄糖苷)對動物健康的風(fēng)險(xiǎn)開展研究[20-21]；伏馬毒素已知的種類為16種，主要分為伏馬毒素A(主要有伏馬毒素A1)、伏馬毒素B(主要包括伏馬毒素B1、B2和B3)、伏馬毒素C和伏馬毒素P，毒性最強(qiáng)的為伏馬毒素B1[22-23]；T-2毒素主要包括T-2三醇和HT-2毒素[24-25]。

1.2 霉菌毒素的危害

霉菌毒素對動物和人類的健康存在巨大的威脅。黃曲霉毒素被國際癌癥研究機(jī)構(gòu)評定為Ⅰ類致癌物質(zhì)，也是肝癌的主要致癌物質(zhì)[26]。其中黃曲霉毒素B1的毒性是砒霜的68倍，誘發(fā)肝癌的能力是二甲基亞硝胺的75倍[27]。黃曲霉毒素對畜禽的免疫系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)及生長發(fā)育都會產(chǎn)生危害。伏馬毒素同樣可引起神經(jīng)毒性、致癌性、免疫毒性及器官毒性，其可引起馬屬動物的特異性疾病——馬腦白質(zhì)軟化癥，具有極高的致死率[28]。玉米赤霉烯酮則具有強(qiáng)烈的雌激素代謝活性，在豬的動物毒理試驗(yàn)中表現(xiàn)最為敏感，可引起豬雌激素中毒癥，使初情前期的小母豬出現(xiàn)陰門紅腫、生殖器脫出、不規(guī)則發(fā)情或假發(fā)情等癥狀，嚴(yán)重時(shí)會發(fā)生流產(chǎn)，小公豬出現(xiàn)乳頭增大和睪丸萎縮等雌性化癥狀[2]。

1.3 霉菌毒素限量標(biāo)準(zhǔn)

目前，我國、歐盟及美國頒布的相關(guān)法規(guī)均未覆蓋所有霉菌毒素種類[29]。在我國《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 13078—2017)中，對飼料原料及產(chǎn)品只規(guī)定了黃曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、T-2毒素及伏馬毒素B1、B2的限量標(biāo)準(zhǔn)。其中，黃曲霉毒素B1在植物油脂(玉米油、花生油除外)、仔豬和雛禽濃縮飼料、仔豬和雛禽配合飼料中限量最低，為10 μg/kg；赭曲霉毒素A在飼料原料及產(chǎn)品中不得超過100 μg/kg；玉米赤霉烯酮在青年母豬配合飼料中限量最低，為0.1 mg/kg；嘔吐毒素在犢牛、羔羊、泌乳期精料補(bǔ)充料和豬配合飼料中限量最低，為1 mg/kg；T-2毒素在植物性飼料原料以及豬、禽配合飼料中不得超過0.5 mg/kg；伏馬毒素(伏馬毒素B1+B2)在馬和兔精料補(bǔ)充料、豬濃縮飼料以及豬、兔和馬的配合飼料中限量最低，為5 mg/kg。在進(jìn)口飼料和飼料添加劑質(zhì)量復(fù)核檢測中，也只針對衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中的霉菌毒素種類進(jìn)行監(jiān)測。

歐盟委員會指令2002/32/EC中規(guī)定了黃曲霉毒素B1的最高限量(奶用動物配合飼料和其他補(bǔ)充飼料限量最低，為5 μg/kg)[29-30]，在歐盟委員會2006/576/EC指南限量中規(guī)定了嘔吐毒素(豬補(bǔ)充飼料和配合飼料限量最低，為900 μg/kg)、玉米赤霉烯酮(小豬補(bǔ)充飼料和配合飼料限量最低，為100 μg/kg)、赭曲霉毒素A(豬補(bǔ)充飼料和配合飼料限量最低，為50 μg/kg)及伏馬毒素B1、B2(豬、馬、兔、寵物補(bǔ)充飼料和配合飼料限量最低，為5 000 μg/kg)的限量[29,31]。美國食品與藥品管理局(FDA)只對3種霉菌毒素做了限量規(guī)定，包括黃曲霉毒素、伏馬毒素、嘔吐毒素。其中，黃曲霉毒素(黃曲霉毒素B1、B2、G1和G2的總量)法規(guī)限量最低為20 μg/kg，伏馬毒素(伏馬毒素B1、B2和B3的總量)法規(guī)限量最低為1 000 μg/kg，嘔吐毒素建議容忍量最低為1 000 μg/kg[29,32-34]。

我國及各國家在飼料中真菌毒素限量標(biāo)準(zhǔn)制定方面都有待于進(jìn)一步完善。我國所規(guī)定的飼料品種未來應(yīng)再覆蓋進(jìn)出口飼料和飼用農(nóng)產(chǎn)品等類別，個別重要的毒素種類也應(yīng)做限量要求，以提高飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，保障人類和動物健康安全。

2 飼料中霉菌毒素檢測標(biāo)準(zhǔn)

當(dāng)前，國內(nèi)外一些標(biāo)準(zhǔn)制定機(jī)構(gòu)和組織對飼料中霉菌毒素的檢測方法都做出了相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)(表1)，所用儀器和方法檢出限也不盡相同。各種標(biāo)準(zhǔn)按照檢測方法分類，可分為色譜儀器方法和快速檢測方法[35]。國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)目前僅針對黃曲霉毒素、赭曲霉毒素和玉米赤霉烯酮有相應(yīng)檢測方法的標(biāo)準(zhǔn)[36]。國際分析化學(xué)師協(xié)會(AOAC)對霉菌毒素頒布了一些標(biāo)準(zhǔn)，其中包括黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮。歐盟標(biāo)準(zhǔn)委員會(CEN)也對飼料中黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A及嘔吐毒素的檢測做出了相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)。我國對《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》中有限量要求的霉菌毒素都有相應(yīng)的檢測標(biāo)準(zhǔn)。各種霉菌毒素的檢測標(biāo)準(zhǔn)中，分析方法也呈現(xiàn)出傳統(tǒng)技術(shù)和革新技術(shù)并存。其中樣品檢測的主要技術(shù)手段——高效液相色譜(HPLC)法在霉菌毒素檢測中發(fā)揮了重要作用，我國國標(biāo)中推薦的各種霉菌毒素檢測均使用HPLC法，其結(jié)果具有較高的準(zhǔn)確性、可靠性；但HPLC法的缺點(diǎn)是對于一些性質(zhì)與分子質(zhì)量相近的物質(zhì)難以有效分離，需要一定的前處理步驟來保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[37]。利用LC-MS技術(shù)對飼料中多種霉菌毒素的檢測已有相應(yīng)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，不需要進(jìn)行衍生化就可對多種毒素同時(shí)進(jìn)行定性和定量檢測，特異性強(qiáng)、靈敏度高、檢出限低，也是目前被廣泛采用的霉菌毒素同步檢測方法。

表1 國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)體系中霉菌毒素的檢測標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Standard for detection of mycotoxins in domestic and foreign standard systems

續(xù)表1檢測儀器Detecting instrument霉菌毒素名稱Mycotoxin name標(biāo)準(zhǔn)號Standard number標(biāo)準(zhǔn)名稱Standard name檢出限 Limit of detection/(μg/kg)多種霉菌毒素DB42/T 808—2012《飼料中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、赭曲毒霉素A和桔毒素的測定 高效液相色譜法》黃曲霉毒素B1:8;玉米赤霉烯酮:260;赭曲霉毒素A:10液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜LC-MS/MS玉米赤霉烯酮DB22/T 1618—2012《飼料中玉米赤霉烯酮的測定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》定量限為5伏馬毒素NY/T 1970—2010《飼料中伏馬毒素的測定》10多種霉菌毒素NY/T 2071—2011《飼料中黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》黃曲霉毒素與T-2毒素:1.0;玉米赤霉烯酮:5.0NY/T 3803—2020《飼料中37種霉菌毒素的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》黃曲霉毒素B1:2;嘔吐毒素:20;伏馬毒素B1:40;玉米赤霉烯酮:20;T-2毒素:20DB37/T 3856—2019《飼料中黃曲霉毒素B1、嘔吐毒素、伏馬毒素B1和玉米赤霉烯酮的測定 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》黃曲霉毒素B1:0.005;嘔吐毒素:10;伏馬毒素B1:10;玉米赤霉烯酮:0.10

3 LC-MS技術(shù)

3.1 前處理技術(shù)

利用LC-MS技術(shù)檢測霉菌毒素過程中，第1步就是樣品的前處理。霉菌毒素檢測的前處理技術(shù)主要包括提取和凈化。樣品提取是指根據(jù)霉菌毒素在有機(jī)溶液中的溶解特性，使用合適的有機(jī)溶劑將其從飼料原料及產(chǎn)品中分離出來[38]。提取液中添加少量水可以濕潤基質(zhì)，增強(qiáng)有機(jī)溶劑在樣品中的滲透能力，提高提取效率，因此通常采用有機(jī)溶劑與水混合溶液對霉菌毒素進(jìn)行提取，如乙腈/水/甲酸(80∶19∶1，體積比)溶液等[39]。其中提取液中添加有機(jī)酸(緩沖液)可以保持穩(wěn)定的pH，可以提高回收率[40]。研究表明，利用乙腈/水(80∶20，體積比)溶液進(jìn)行提取時(shí)，伏馬毒素的回收率低，僅有25%～43%；而用甲醇/水(80∶20，體積比)溶液進(jìn)行提取時(shí)，伏馬毒素的回收率可提高到80%～110%[41]。

而在提取過程中，由于飼料原料及產(chǎn)品基質(zhì)中存在的脂肪、蛋白質(zhì)、色素等物質(zhì)也會被同時(shí)提取，在進(jìn)儀器檢測時(shí)往往會有干擾，因此還需要合適的凈化方法去除部分雜質(zhì)。近幾年研究多集中在開發(fā)不同凈化處理技術(shù)上，目前國內(nèi)外使用的凈化方法大致包括稀釋[41]、免疫親和柱、多功能凈化柱及QuEChERS等。表2總結(jié)了目前主要應(yīng)用在霉菌毒素檢測上的凈化方法[42-48]。于2021年4月1日起實(shí)施的農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《飼料中37種霉菌毒素的測定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》中，采用了一種國產(chǎn)新型雜質(zhì)吸附型固相萃取柱MLJ-1對飼料樣品進(jìn)行凈化，一步過濾，大大節(jié)約了樣品前處理時(shí)間，提高了檢測效率[49]。

表2 目前檢測霉菌毒素主要應(yīng)用的凈化方法對比Table 2 Current main application of detection of mycotoxin purification method comparison

研究表明，在霉菌毒素定量檢測方法上大多數(shù)霉菌毒素的基質(zhì)抑制效應(yīng)較大，可導(dǎo)致檢測方法的回收率偏低，從而降低方法的準(zhǔn)確度，應(yīng)采用基質(zhì)加標(biāo)的方法進(jìn)行校正[50]。目前，普遍采用外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。外標(biāo)法需要針對每一種基質(zhì)配制基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，且需要空白基質(zhì)樣品，針對一些特定毒素如伏馬毒素，陽性樣品偏多，有時(shí)很難作為基質(zhì)空白使用，采用同位素內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量可作為另一種定量方案實(shí)施[45-46,50]。同位素稀釋法只需對復(fù)雜混合物體系進(jìn)行部分分離、純化就可對物質(zhì)進(jìn)行定量和定性檢測，無需配制基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，但是操作繁瑣，對試驗(yàn)結(jié)果處理也更耗時(shí)，增加成本，因此我國頒布的標(biāo)準(zhǔn)中尚未使用內(nèi)標(biāo)法。

3.2 液相色譜(LC)技術(shù)

3.2.1 檢測器的選擇

在我國頒布的飼料中霉菌毒素檢測方法的標(biāo)準(zhǔn)中，主要利用HPLC檢測。HPLC技術(shù)主要利用溶質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、親和力、吸附力和分子大小不同，引起排阻作用的差別來分離不同溶質(zhì)，在不同時(shí)間進(jìn)入檢測器，從而達(dá)到分離檢測的目的[51]。液相色譜檢測技術(shù)的檢測器，主要檢測色譜柱分離處理后的成分組分隨淋洗液流出后的濃度變化，并通過圖形描述進(jìn)行定量和定性分析。在檢測器選擇上，標(biāo)準(zhǔn)檢測方法中黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、伏馬毒素及T-2毒素一般利用熒光檢測器[52]；嘔吐毒素利用紫外檢測器。而熒光檢測器是用紫外線照射色譜餾分，當(dāng)試樣組分具有熒光性能時(shí)才可被檢出[53]。個別霉菌毒素應(yīng)用熒光檢測器時(shí)需要衍生，常見有樣品前處理時(shí)加入衍生試劑柱前衍生，還可以利用光化學(xué)衍生進(jìn)行柱后衍生。化學(xué)試劑衍生一般是霉菌毒素提取后在進(jìn)樣前加入衍生試劑，黃曲霉毒素常用三氟乙酸在40 ℃恒溫水浴下衍生反應(yīng)75 min，T-2毒素常用1-蒽腈在50 ℃水浴下衍生反應(yīng)15 min，伏馬毒素常用鄰苯二甲醛等衍生。光化學(xué)柱后衍生法通常在熒光檢測器之前接入了結(jié)構(gòu)簡單的光化學(xué)反應(yīng)池，即光化學(xué)衍生器[54]，這樣不需要化學(xué)試劑，儀器連接和操作也方便。

3.2.2 色譜條件的優(yōu)化

在色譜柱的選擇上，C18色譜柱基本能滿足各種霉菌毒素檢測的要求。流動相選擇上，各種化合物在乙腈和甲醇體系下均能正常出峰，但響應(yīng)強(qiáng)度存在差異，如HT-2毒素在乙腈體系響應(yīng)遠(yuǎn)低于甲醇體系，且乙腈對同分異構(gòu)體及目標(biāo)物與樣品基質(zhì)中的干擾雜質(zhì)分離度較甲醇差[41]，因此大多數(shù)選甲醇體系作為流動相。而流動相中加入甲酸可以增強(qiáng)目標(biāo)物的離子化效率，而加入乙酸銨可以改善目標(biāo)物的峰形。

3.3 色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)

利用HPLC技術(shù)往往只能檢測一種霉菌毒素，針對實(shí)際飼料原料及產(chǎn)品中需要多種霉菌毒素檢測，因此色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的推行能大大縮短檢測時(shí)間，靈敏度更高，同時(shí)可以監(jiān)測多種霉菌毒素。目前主流的霉菌毒素儀器分析技術(shù)也是應(yīng)用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜。測試樣品先經(jīng)過液相色譜儀進(jìn)行分離，隨后通過與質(zhì)譜聯(lián)用的接口，將待測溶液進(jìn)行電離，在電離中產(chǎn)生的離子會形成一個母離子碎片，然后會通過激發(fā)電壓將母離子碎片進(jìn)行二次電離，通過收集產(chǎn)生到的離子碎片，對待測物質(zhì)進(jìn)行定量和定性[55]。不同的化合物母離子碎片和子離子碎片都不同，因此可以有效分離不同化合物，排除雜質(zhì)干擾。

3.3.1 電離模式的選擇

根據(jù)霉菌毒素的化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，質(zhì)譜離子源一般采用大氣壓電噴霧離子源(ESI源)。ESI源工作原理是利用電場產(chǎn)生帶電液滴，經(jīng)過去溶劑化過程最終產(chǎn)生被測物離子，進(jìn)入質(zhì)譜分析。在ESI源下中性分子在流動相中可結(jié)合H+、Na+、K+，發(fā)生靜電噴霧，隨著溶劑的蒸發(fā)，生成[M+H]+或[M+Na]+或[M+K]+準(zhǔn)分子離子，也有的化合物在流動相中失去H+,變成相應(yīng)的負(fù)離子，在負(fù)離子模式下，可以檢測到[M-H]-的準(zhǔn)分子離子[56]。大多數(shù)霉菌毒素為正離子模式，少數(shù)霉菌毒素為負(fù)離子模式(如玉米赤霉烯酮類)[57]。其中正電離模式下獲得[M+H]+(如黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、嘔吐毒素、伏馬毒素)、[M+NH4]+(如T-2毒素、HT-2毒素)和[M+Na]+(如T-2三醇)，負(fù)電離模式下獲得[M-H]-(如玉米赤霉烯酮類)[58-59]。同時(shí)選擇響應(yīng)值高、質(zhì)荷比大并且背景干擾低的2個子離子作為定量和定性離子[50]。也有研究表明，個別霉菌毒素利用大氣壓化學(xué)電離離子源(APCI源)分析效果更好。APCI源與ESI源相比，在毛細(xì)管噴嘴的下方加了個針狀放電電極。APCI源是通過針狀放電電極的高壓放電，使溶劑分子和空氣中某些中性分子電離產(chǎn)生H3O+、N2+、O2-、OH-等離子，這些離子再與被分析物分子進(jìn)行離子-分子反應(yīng)，使被分析的中性分子離子化[56]。其中嘔吐毒素在APCI源下響應(yīng)值為ESI源下響應(yīng)值的2.1～7.4倍，玉米赤霉烯酮在APCI源下是正離子模式，響應(yīng)值也提高了1倍[60]。

3.3.2 質(zhì)譜儀器的選擇

常見的質(zhì)譜技術(shù)采用低分辨三重四極桿質(zhì)譜，也有研究利用超高效液相色譜-三重四級桿/線性離子阱串聯(lián)質(zhì)譜(QTRAP-UPLC-MS/MS)法同時(shí)測定飼料中16種真菌毒素[61]。線性離子阱串聯(lián)質(zhì)譜(QTRAP)系統(tǒng)是把三重串聯(lián)四極桿技術(shù)和線性離子阱質(zhì)譜技術(shù)結(jié)合在一起，既保留了串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀的優(yōu)點(diǎn)如高靈敏度定量等功能，又克服了傳統(tǒng)3D離子阱質(zhì)譜儀的缺點(diǎn)如碰撞效率低等問題。同時(shí)，有研究表明高分辨質(zhì)譜靜電場軌道阱質(zhì)譜對目標(biāo)物與未知物質(zhì)有更高的確證能力，能有效預(yù)防假陰性，能分辨出質(zhì)量數(shù)差別極小的離子，而且能同時(shí)篩查大量分析物[62]，與高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜(TOF)相比，靜電場軌道阱質(zhì)譜在大大提高分辨率的同時(shí)也具備出色的定量能力。

4 小 結(jié)

飼料的安全問題直接影響了動物的健康，因此飼料中霉菌毒素的檢測尤為重要，也是日常飼料監(jiān)測工作的重點(diǎn)內(nèi)容。目前，國內(nèi)外利用LC-MS已經(jīng)開發(fā)了多種霉菌毒素同時(shí)檢測技術(shù)，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所蘇曉鷗團(tuán)隊(duì)和Romer Labs中國有限公司張大偉團(tuán)隊(duì)等在凈化處理上也開發(fā)出高效方法，為當(dāng)前霉菌毒素的監(jiān)測提供有利的技術(shù)支撐[46,49]。在霉菌毒素的檢測方面，應(yīng)根據(jù)各自檢測平臺所擁有的儀器而建立檢測條件。HPLC能滿足霉菌毒素的定量定性分析，且成本低；而LC-MS雖成本和技術(shù)要求高，但能同時(shí)快速檢測多種霉菌毒素，兩者各有利弊，應(yīng)視需求而定。在前處理技術(shù)方面，應(yīng)視所檢測霉菌毒素的種類而選擇不同的凈化方法。然而，我國飼料中霉菌毒素限量和檢測標(biāo)準(zhǔn)還有待進(jìn)一步擴(kuò)大范圍，LC-MS技術(shù)在檢測靈敏度和準(zhǔn)確度上有著極大的優(yōu)勢，但檢測成本較高。開發(fā)低成本、快速、操作簡便的檢測技術(shù)，并應(yīng)用于現(xiàn)場同步檢測多種霉菌毒素及其代謝產(chǎn)物是未來LC-MS技術(shù)的研究熱點(diǎn)[63]。