■宋亞麗 李曉梅 史金平 張昌吉 劉 婷 成述儒*

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，甘肅蘭州 730070；2.蘭州新區(qū)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)投資集團(tuán)有限公司，甘肅蘭州 730070）

甘肅、內(nèi)蒙、新疆、青海、西藏等北方牧區(qū)是我國羊存欄量較大的地區(qū)，飼養(yǎng)量約占全國總飼養(yǎng)量的40%，但北方牧區(qū)由于氣候條件多變以及長期的過度放牧，導(dǎo)致天然草原快速退化，草品質(zhì)及飼養(yǎng)水平急劇下降，嚴(yán)重影響放牧的正常進(jìn)行，且牧區(qū)缺少補(bǔ)充料，嚴(yán)重制約牧區(qū)畜牧業(yè)的發(fā)展[1]。我國是玉米和小麥種植大國，每年生產(chǎn)大量玉米、小麥秸稈，但目前我國已明令禁止秸稈焚燒[2]。因此，將秸稈制作成家畜補(bǔ)充料不僅能有效處理農(nóng)作物秸稈還能促進(jìn)畜牧業(yè)發(fā)展。秸稈作為粗飼料飼喂家畜時，其飼料轉(zhuǎn)化率和采食量較低。但秸稈經(jīng)粉碎或揉搓絲化處理后，根據(jù)一定的配方，與其他飼料添加劑混合調(diào)配制成顆粒飼料，成為提高家畜飼料轉(zhuǎn)化率和采食量的主要方法。利用秸稈制作顆粒飼料，不僅能夠有效利用資源，節(jié)約大量糧食，還可以降低飼料成本，提高養(yǎng)殖效益[3]。將農(nóng)作物秸稈加工成為顆粒補(bǔ)充料，不僅能為冬春季節(jié)的高山細(xì)毛羊提供營養(yǎng)補(bǔ)給，還可以解決秸稈處理問題，將秸稈處理與畜牧業(yè)相結(jié)合，發(fā)展農(nóng)作物-畜牧循環(huán)農(nóng)業(yè)。已有研究顯示，將秸稈粉碎制作成顆粒飼料后可明顯提高家畜的采食量和日增重[4-5]。因此，本試驗將小麥秸稈和玉米秸稈制作成放牧羊補(bǔ)充料，以研究其對甘肅高山細(xì)毛羊空懷母羊體重、血液生化指標(biāo)及瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響。為極端氣候條件下牧區(qū)綿羊養(yǎng)殖提供飼料配方和理論支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗地點

飼 養(yǎng)試驗于2015 年4 月1 日至4 月16 日在甘肅省肅南裕固族自治縣養(yǎng)殖場進(jìn)行，試驗羊飼喂以玉米秸稈和小麥秸稈為主的補(bǔ)充料，試驗期15 d。相關(guān)指標(biāo)測定在甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院的動物生化實驗室、動物營養(yǎng)實驗室和遺傳實驗室進(jìn)行。

1.2 試驗設(shè)計

試驗選擇體重接近45.0 kg且差異不顯著的甘肅高山細(xì)毛羊空懷母羊18 只，隨機(jī)分成3 個處理組（n=6）。試驗組分別飼喂補(bǔ)充料1（EW）和補(bǔ)充料2（EC），對照組（CON）正常放牧。根據(jù)中國美利奴羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和甘肅高山細(xì)毛羊的放牧采食量確定飼料補(bǔ)喂量，EW和EC飼喂量均為0.96 kg，每天飼喂兩次（均采食完），自由飲水，自由活動（較大空間，不放牧采飼）。

1.3 補(bǔ)充料配方及營養(yǎng)水平

飼料配方和營養(yǎng)水平見表1。按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 14924.9—2001 測定常規(guī)營養(yǎng)成分粗蛋白質(zhì)（凱氏定氮法）、粗脂肪（魯氏殘留法）、粗纖維（酸堿洗滌法）、粗灰分（干灰化法）、鈣（EDTA 法）和總磷（分光光度法）的含量。

表1 飼料配方及營養(yǎng)水平（%）

1.4 樣品的采集和指標(biāo)的測定

1.4.1 體重的測定

試驗正式開始、結(jié)束日晨飼前對每只羊稱重并計算每組的平均日增重。

1.4.2 血液樣品的采集和測定

試驗結(jié)束日晨飼前，每組隨機(jī)選取4只羊，靜脈采血，現(xiàn)場3 000 r/min 離心20 min，收集上層血清保存于-20 ℃冰箱用于生化指標(biāo)測定。羊的血液生化指標(biāo)采用科華KHB-1280全自動生化分析儀，按照標(biāo)準(zhǔn)試劑盒（北京天根生化科技有限公司）的說明書要求進(jìn)行測定。包括血清乳酸脫氫酶（速率法）、總膽固醇（酶比色法）、葡萄糖（比色法）、白蛋白（溴甲酚綠比色法）、總蛋白（雙縮脲法）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（賴氏法）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（賴氏法）和三酰甘油（酶比色法）各項生化指標(biāo)。

1.4.3 瘤胃液的采集和測定

試驗結(jié)束日晨飼2 h后，每個試驗組中分別隨機(jī)選擇4只，采用滅菌口腔導(dǎo)管抽取瘤胃液50 mL于采樣管中，立即測定其pH（雷磁PHS-2F型酸度計），經(jīng)四層紗布過濾后，投入液氮罐帶回實驗室于-70 ℃保存待測。凱氏定氮法測定總氮和蛋白氮（微生物蛋白）含量；苯酚-次氯酸鈉測定氨態(tài)氮濃度；脲酶法（試劑盒由南京建成生物工程研究所提供）測定瘤胃液尿素氮；參照陳根元等[6]的方法測定揮發(fā)性脂肪酸及其各組分的濃度。

1.5 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 22.0 對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＞0.05 為差異不顯著，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 補(bǔ)充料對日增重的影響（見表2）

表2 空懷母羊的日增重變化

如表2 所示，與CON 組相比，飼喂EW 與EC 的甘肅高山細(xì)毛羊空懷母羊初重和末重差異不顯著(P＞0.05)，但其日增重顯著高于CON組(P＜0.05)。

2.2 補(bǔ)充料對瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響

2.2.1 補(bǔ)充料對甘肅高山細(xì)毛羊空懷母羊瘤胃液總氮、蛋白氮、氨態(tài)氮和尿素氮的影響（見表3）

表3 空懷母羊瘤胃液總氮、蛋白氮、氨態(tài)氮和尿素氮的含量（mg/100 mL）

如表3可知，飼喂EW和EC的空懷母羊瘤胃液總氮含量和尿素氮含量高于CON 組，且差異顯著（P＜0.05），而瘤胃液蛋白氮含量和氨態(tài)氮含量各處理組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.2.2 補(bǔ)充料對瘤胃液pH 及揮發(fā)性脂肪酸的影響（見表4）

表4 空懷母羊瘤胃液pH及揮發(fā)性脂肪酸含量

如表4所示，飼喂EW和EC的空懷母羊丙酸比例顯著高于CON組，且差異顯著（P＜0.05），而瘤胃液pH、乙酸比例、丁酸比例、戊酸比例、異戊酸比例、異丁酸和總量比例各處理組間差異均不顯著（P＞0.05）。

2.3 補(bǔ)充料對血液生化指標(biāo)的影響（見表5）

表5 空懷母羊的血液生化指標(biāo)

見表5，飼喂EW和EC的空懷母羊谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶及總膽固醇的含量顯著低于CON 組（P＜0.05）。血清總蛋白、白蛋白、尿素氮、三酰甘油、乳酸脫氫酶和葡萄糖含量各處理組間差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 飼喂補(bǔ)充料對日增重的影響

極端氣候條件下可造成牧草產(chǎn)量降低，而空懷母羊?qū)I養(yǎng)的攝入需求較高，因此飼喂補(bǔ)充料是維持空懷母羊生長發(fā)育的必要環(huán)節(jié)。日增重是衡量動物生產(chǎn)性能的重要指標(biāo)。周力等[7]研究精料補(bǔ)充料對藏羔羊生長發(fā)育的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)補(bǔ)充料可提高羔羊的日增重。葉明榮等[8]研究肉用山羊進(jìn)行補(bǔ)飼補(bǔ)充料可顯著提高日增重，且與未補(bǔ)飼山羊相比公母羊各提高約77%和65%。本試驗中，空懷母羊飼喂補(bǔ)充料能夠提高其日增重，這與上述研究結(jié)果一致。補(bǔ)充料提高空懷母羊平均日增重可能有兩個原因：①補(bǔ)充料中粗蛋白質(zhì)含量較高，營養(yǎng)較豐富，能夠滿足試驗組母羊生長的營養(yǎng)需要；②肅南縣牧區(qū)春季氣候寒冷，牧草發(fā)芽率低，母羊以采食黃草為主，因此表現(xiàn)為日增重差異顯著。

3.2 飼喂補(bǔ)充料對瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響

3.2.1 補(bǔ)充料對瘤胃液總氮、蛋白氮、氨態(tài)氮及尿素氮的影響

瘤胃液總氮包括氨態(tài)氮、尿素氮、菌體蛋白氮、飼料中可溶解蛋白氮及唾液蛋白氮等[9-10]，本試驗中飼喂EW的空懷母羊瘤胃液總氮含量顯著升高，主要與EW飼料中粗蛋白質(zhì)含量較牧草高、飼料精粗比較高、纖維分解和蛋白質(zhì)降解慢有關(guān)。蛋白質(zhì)是組成機(jī)體的重要成分，是生命活動的主要承擔(dān)者[11]。當(dāng)反芻動物攝入含氮營養(yǎng)物質(zhì)時，可在瘤胃微生物的作用下降解為寡肽和游離氨基酸等，同時在能量充足時瘤胃微生物可以將游離氨基酸等合成微生物蛋白[12]。反芻動物瘤胃液蛋白氮主要以飼料攝入為主，在綿羊體內(nèi)起著重要作用[13]。試驗中各處理組間瘤胃液蛋白氮含量差異不顯著。但CON組瘤胃液蛋白氮含量略低于EW組和EC組。說明試驗組空懷母羊其瘤胃微生物合成作用較強(qiáng)。瘤胃液氨態(tài)氮主要來源于飼料的分解，在反芻動物中有重要意義。試驗中氨態(tài)氮含量在各處理組間無顯著差異，其含量在8.98～9.75 mg/100 mL 范圍，這與孫玉國等[14]試驗結(jié)果一致。瘤胃液中尿素氮的濃度可反映動物機(jī)體氮代謝情況，且受多個因素的影響，如動物采食速度、飼料本身尿素氮的濃度、尿素氮在動物體內(nèi)溶解速度、動物自身唾液分泌量等[15]。瘤胃液中尿素氮的含量對瘤胃氮代謝有重要作用，其主要來源是飼糧和瘤胃氮素再循環(huán)[16]。試驗中CON組空懷母羊瘤胃液尿素氮含量明顯低于EW 組，與EW 組飼糧粗蛋白質(zhì)含量較高有關(guān)，且各處理組瘤胃液尿素氮含量在1.03～1.65 mg/100 mL 范圍，這與譚建華等[17]研究結(jié)果相符。

3.2.2 飼喂補(bǔ)充料對瘤胃液pH及揮發(fā)性脂肪酸的影響

瘤胃液pH 受多種因素的影響，它是反映瘤胃內(nèi)環(huán)境的重要指標(biāo)之一。楊晶晶等[18]研究發(fā)現(xiàn)，給綿羊添加補(bǔ)充料對瘤胃液pH和總揮發(fā)性脂肪酸無顯著性影響，這與本試驗結(jié)果基本一致。但本試驗中飼喂兩種補(bǔ)充料的空懷母羊瘤胃液pH均低于正常放牧組，可能是由于飼料加工成顆粒料后，減弱了對瘤胃上皮的刺激，從而導(dǎo)致唾液分泌減少，未分解的淀粉在瘤胃中比纖維更易發(fā)酵產(chǎn)生酸，從而使瘤胃液pH降低[19]。

揮發(fā)性脂肪酸是脂肪酸的一種，主要包括乙酸、丙酸和丁酸，是動物體代謝作用最為重要的三種揮發(fā)性脂肪酸[19-20]。反芻動物瘤胃將飼料降解為揮發(fā)性脂肪酸，而揮發(fā)性脂肪酸是反芻動物的主要能量來源之一[21]。反芻動物采食的飼料中可溶性碳水化合物和纖維素、果膠等纖維物質(zhì)含量較高時，則會使總的脂肪酸產(chǎn)量降低，但乙酸產(chǎn)量上升；飼喂易于發(fā)酵的飼料，會被降解為揮發(fā)性脂肪酸（乙酸、丙酸、丁酸等）且濃度增加[22]。反芻動物瘤胃的消化代謝和發(fā)酵形式受營養(yǎng)水平、飼料精粗比和飼糧組成、加工類型等[23]多種因素影響，因此當(dāng)飼草僅組成日糧的一部分時，磨碎或制成顆粒料均可能導(dǎo)致乙酸與丙酸比例有明顯改變[24]。試驗中飼喂補(bǔ)充料EC的空懷母羊其瘤胃液中丙酸含量高，說明瘤胃發(fā)酵類型由乙酸型轉(zhuǎn)向丙酸型，減少甲烷的排放和能量的浪費[25]。與鄭琛等[26]和張騰等[27]的研究中日糧精料及丙酸比例升高的結(jié)果一致。

3.3 飼喂補(bǔ)充料對血液生化指標(biāo)的影響

動物的血液生化指標(biāo)不僅反映其健康狀況，而且體現(xiàn)了機(jī)體的代謝狀況。阿依沙依拉[28]對哺乳期的馬駒飼喂補(bǔ)充料，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血液中的總蛋白和白蛋白無顯著變化，這與本試驗結(jié)果一致。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是反映心臟和肝臟功能的兩個重要指標(biāo)[29]。根據(jù)李茂等[30]研究，谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量是否明顯增加，是衡量心臟和肝臟是否受到損害的指標(biāo)之一。本研究中空懷母羊飼喂補(bǔ)充料其血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量為84.33～86.33 U/L 與26.00～26.33 U/L，與李樹偉等[31]研究報道的綿羊谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的正常范圍（40.0～123.0 U/L）和（25.0～70.0 U/L）結(jié)果一致。但本試驗CON 組血清谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的含量相對較高，其原因可能是飼養(yǎng)方式不同所造成的。尿素氮主要在肝臟中合成，是動物機(jī)體內(nèi)非蛋白氮的一部分，通過腎臟排出體外，其含量反映了含氮物質(zhì)在動物體內(nèi)的周轉(zhuǎn)狀況[32]。根據(jù)張穎等[33]的報道，飼料中蛋白含量和氨基酸含量都會影響血清尿素氮含量，尿素氮含量過高說明氮的利用率低，如果過低是飼料的有效利用標(biāo)志，本試驗飼喂EW和EC對血清尿素氮沒有產(chǎn)生顯著影響，說明氮的利用比較合理。膽固醇對維持生物膜的流動性和正常功能具有重要意義[34]。膽固醇的來源有兩種，分別是從飼料中攝入和自身合成，主要通過血液輸送到身體各部分。血液中膽固醇顯著增高，說明肝臟受損[29]。試驗中試驗組空懷母羊血清總膽固醇含量與對照組相比顯著降低，可能是因為飼養(yǎng)方式不同造成，使肝臟對膽固醇的排出速度更快。三酰甘油是動物體內(nèi)的主要脂類。血清中的三酰甘油反應(yīng)了機(jī)體對脂類的利用情況，含量越低，意味著機(jī)體對脂肪的利用率越高[35]。試驗中各處理組間血液中三酰甘油無顯著性差異。說明飼喂補(bǔ)充料EW 和補(bǔ)充料EC對甘肅高山細(xì)毛羊空懷母羊機(jī)體脂肪的利用率沒有顯著影響。血糖作為重要的營養(yǎng)性單糖，必須保持一定的水平才能維持體內(nèi)各器官和組織的需要[36]。當(dāng)血糖含量過低時，說明飼料能量不足或消化吸收不良。王婕姝等[37]研究秸稈顆粒型日糧對育肥羔羊血液生化指標(biāo)的影響，發(fā)現(xiàn)這種日糧對血糖無顯著影響，這與本試驗結(jié)果一致。

4 結(jié)論

EW 和EC 飼料的飼喂可以顯著提高甘肅高山細(xì)毛羊空懷母羊日增重并降低血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量，EW和EC飼料對瘤胃液總氮、尿素氮和丙酸含量產(chǎn)生一定影響。EW和EC補(bǔ)充料有益于甘肅高山細(xì)毛羊空懷母羊的能量代謝，可為牧區(qū)極端氣候條件下放牧綿羊應(yīng)用補(bǔ)充顆粒飼料提供飼料配方。