李衛(wèi)娟，李銀江，馬興躍，薛 白，歐陽依娜，王思宇，梁家充，洪瓊花*

（1.云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，云南昆明 650224；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)研究所，四川成都 611130）

母羊在妊娠后期，其胎兒發(fā)育速度加快，因此對(duì)養(yǎng)分的需要量遠(yuǎn)高于前期和中期[1-3]。妊娠后期對(duì)鈣的需求也提高。袁浩容[4]報(bào)道，妊娠后期歐拉型母羊的的鈣需要量為7.50～11.04 g/d；內(nèi)蒙古細(xì)毛羊妊娠后期體重45 kg 的鈣需要量為6.5 g/d[5]；張昌吉等[6]采用析因法估測得出甘肅高山細(xì)毛羊妊娠母羊鈣的需要量為8.22～9.61 g/d。由于羊品種不同對(duì)鈣的需要量也存在差異。迄今，有關(guān)妊娠后期云南半細(xì)毛羊鈣需要量的研究未見報(bào)道。

云南半細(xì)毛羊是云南畜牧獸醫(yī)科學(xué)院經(jīng)十余年育種培育而成的毛肉兼用型半細(xì)毛羊新品種，具有適應(yīng)力強(qiáng)、耐粗飼等特點(diǎn)，是高寒山區(qū)農(nóng)民脫貧致富的主要畜種之一，目前已作為種羊推廣到四川、貴州、西藏等地并表現(xiàn)出良好的適應(yīng)性，是當(dāng)?shù)剞r(nóng)林種養(yǎng)產(chǎn)業(yè)扶貧中的主要畜種。為更好地在貧困山區(qū)脫貧中發(fā)展和推廣這一毛肉兼用型半細(xì)毛羊新品種，必須為云南半細(xì)毛羊飼養(yǎng)提供精準(zhǔn)的日糧以獲得最佳生產(chǎn)效益，但由于其妊娠期鈣需要量的研究至今仍是空白，限制了母羊生產(chǎn)性能的發(fā)揮。為此，本試驗(yàn)旨在研究日糧鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊生長性能、鈣的消化率、血清生化指標(biāo)的影響，以期為妊娠后期云南半細(xì)毛羊生產(chǎn)中鈣的合理添加提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)在昆明易興恒畜牧科技有限責(zé)任公司進(jìn)行。選取50只體況良好、體重（45.14±3.94）kg、（40±0.05）月齡、配種期一致、妊娠期（149±0.26）d 的經(jīng)產(chǎn)2 胎云南半細(xì)毛羊，隨機(jī)分成5 個(gè)組，每組10 只。5 組日糧鈣水平分別為0.40%、0.50%、0.60%、0.69%、0.87%，其他養(yǎng)分保持一致。試驗(yàn)從妊娠的第106 天開始，試驗(yàn)期共44 d，其中預(yù)試期14 d，正試期30 d。試驗(yàn)日糧參照《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T816-2004）設(shè)計(jì)，飼糧組成及養(yǎng)分含量見表1。

表1 日糧組成及營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.2 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)前將欄舍打掃干凈、嚴(yán)格消毒，并檢查代謝籠、食槽和水槽有無異常。每天08:00、17:00 各飼喂1 次，先飼喂粗料再飼喂精料，自由飲水。試驗(yàn)從妊娠第106 天開始，將試驗(yàn)羊稱重分組，開始14 d 的預(yù)試期，熟悉試驗(yàn)羊飼養(yǎng)管理流程，并記錄各組試羊的采食量，根據(jù)前一天的采食量調(diào)整第2 天飼喂量，確保飼槽內(nèi)有10%左右的剩料。預(yù)試期結(jié)束后進(jìn)入正試期。

1.3 生長性能測定及消化代謝試驗(yàn) 試驗(yàn)開始和結(jié)束當(dāng)天上午空腹稱重，準(zhǔn)確記錄每只羊每天的采食量，計(jì)算出每只羊的干物質(zhì)采食量（DMI），用于計(jì)算平均日增重（ADG）和耗料增重比（F/G）。妊娠第130～135 天從各組試驗(yàn)羊中選擇5 只羊進(jìn)行為期5 d 的消化代謝試驗(yàn)。試驗(yàn)羊在代謝籠中單籠飼養(yǎng)。每天上午全收糞、尿，連續(xù)收集5 d，每天記錄排糞量和排尿量。將每天收集的每只羊的鮮糞樣混勻稱重后取20% 并分成2 份，一份按5% 的比例加入10% 的稀鹽酸進(jìn)行固氮；每天將收集的尿樣混勻后取10%，于-20℃保存用于測定尿鈣。消化代謝期間每天采集1 次混合精料和粗料樣品，每組混合精料采集200 g，粗料200 g。采集的糞樣、混合精料、粗料55℃風(fēng)干后，回潮24 h，稱重，分別粉碎過40 目篩，用于測定養(yǎng)分含量。

1.4 成分分析 日糧鈣、尿鈣、糞鈣等成分測定參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[7]；血清鈣、磷采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的無機(jī)磷測試盒（貨號(hào)：C006-3）及鈣測試盒（貨號(hào)：C004-1）測定；堿性磷酸酶（ALP）、甲狀旁腺素（PHT）、骨鈣素（BGP/OCN）、降鈣素（CT）采用羊酶聯(lián)免疫試劑盒（上海朗頓生物科技有限公司）測定。相關(guān)指標(biāo)計(jì)算公式：

沉積鈣=攝入鈣-糞鈣-尿鈣

排泄鈣=糞鈣+尿鈣

可消化鈣=攝入鈣-糞鈣

鈣表觀消化率=可消化鈣/攝入鈣×100%

鈣沉積率=沉積鈣/攝入鈣×100%

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 10 軟件進(jìn)行預(yù)處理，用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-Way ANOVA），結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，差異不顯著用P＞0.05 表示，差異顯著用P＜0.05 表示。

2 結(jié)果

2.1 日糧不同鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊生長性能的影響 由表2 可見，隨日糧鈣水平的升高，妊娠后期云南半細(xì)毛羊各組的DMI、ABG、ADG、F/G 差異不顯著，妊娠后期0.60%組F/G 優(yōu)于其他組。

表2 日糧不同鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊生長性能的影響

2.2 日糧不同鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊鈣消化代謝的影響 由表3 可見，隨日糧鈣水平的增加，妊娠后期云南半細(xì)毛羊鈣的進(jìn)食量和排泄鈣量增加（P＜0.05）；尿鈣、鈣的表觀消化率各組間差異不顯著；0.87%組可消化鈣高于0.40%、0.50%、0.60% 組（P＜0.05），其他組間差異不顯著；沉積鈣0.87%組高于0.40%、0.50%組（P＜0.05），其他組間差異不顯著；鈣沉積率各組間差異不顯著。

表3 日糧不同鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊鈣消化代謝的影響

2.3 日糧不同鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊血清生化指標(biāo)的影響 由表4 可見，日糧鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊血清中ALP、PTH、CT、OCN 及血清鈣、磷的影響不顯著。

表4 日糧不同鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊血清生化指標(biāo)的影響

2.4 妊娠后期云南半細(xì)毛羊鈣需要量的研究 用回歸法研究妊娠后期云南半細(xì)毛羊鈣需要量，結(jié)合表2 和表3，通過代謝體重，可以得到妊娠后期鈣消化代謝指標(biāo)（y）與鈣采食量（x）間的回歸公式（表5）。當(dāng)沉積鈣為0時(shí)的采食鈣就是維持鈣需要量，因此妊娠后期云南半細(xì)毛羊的鈣維持需要量為0.173 2 g/（kgW0.75·d）。

表5 妊娠后鈣消化代謝指標(biāo)（y）與鈣采食量（x）間的回歸（n=5）

3 討 論

3.1 日糧不同鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊生長性能的影響 胡鳳明等[8]研究得出，飼糧鈣磷水平對(duì)內(nèi)蒙古察哈爾羔羊的ADG、F/G 影響不顯著。本團(tuán)隊(duì)前期的研究結(jié)果也表明，日糧鈣水平對(duì)空懷期云南半細(xì)毛羊的ADG 影響不顯著[9]。Hutcheson 等[10]研究也發(fā)現(xiàn)，飼喂不同鈣磷水平日糧對(duì)羔羊的ADG 也無影響。而司丙文等[11]研究發(fā)現(xiàn)，與較高鈣磷水平的日糧相比，羔羊精料中添加0.40% 的鈣和0.38% 的磷即可滿足羔羊的生長需要。趙智力[12]的研究也發(fā)現(xiàn)，日糧鈣磷水平對(duì)非產(chǎn)絨時(shí)期的絨山羊DMI 影響不顯著；袁浩容[4]對(duì)歐拉型后備母羊的研究也得到相似結(jié)果，而對(duì)妊娠后期歐拉型母羊的研究結(jié)果卻有所不同，日糧鈣磷水平對(duì)妊娠后期歐拉型母羊的DMI、ADG、F/G 的影響顯著。從本試驗(yàn)結(jié)果看，日糧鈣水平對(duì)各組妊娠后期云南半細(xì)毛羊DMI、ADG、F/G 均無顯著影響。妊娠后期各組的ADG 達(dá)195.39～249.77 g，妊娠后期0.40%組鈣水平（5.07 g/d）雖可以滿足半細(xì)毛羊的生長需要，但是從ADG 來看，0.50%鈣水平組（6.89 g/d）更適合妊娠后期云南半細(xì)毛羊的生長需要。如果再提高日糧中鈣的水平，不僅不會(huì)提高妊娠期云南半細(xì)毛羊的生長性能，反而會(huì)增加母羊糞尿中的鈣排放量，從而增加母羊消化系統(tǒng)的負(fù)擔(dān)，造成一定程度上的資源浪費(fèi)和環(huán)境污染[4]。

3.2 日糧不同鈣水平對(duì)妊娠期云南半細(xì)毛羊鈣消化代謝的影響 反芻動(dòng)物對(duì)鈣的吸收率受動(dòng)物對(duì)鈣的需要量、動(dòng)物的品種和年齡及性別、日糧中其他營養(yǎng)成分含量、鈣磷比等影響。本試驗(yàn)日糧中添加碳酸氫鈣和磷酸二氫鈉，有效調(diào)節(jié)了日糧中的鈣磷比。胡鳳明等[8]研究表明，隨著日糧中鈣磷水平提高，察哈爾羔羊?qū)︹}磷的采食量、糞鈣、糞磷及鈣磷的排泄量顯著增加，鈣的表觀消化率顯著降低，鈣的表觀消化率最高達(dá)45.6%%，最低為21.5%。袁浩容[4]的研究也表明，隨著日糧鈣磷水平提高，青海高原牧區(qū)歐拉型后備母羊、妊娠后期母羊、泌乳期母羊的鈣采食量、糞鈣及鈣的排泄量顯著增加，而鈣的表觀消化率顯著降低，妊娠后期鈣的表觀消化率最高達(dá)43.46%，最低為28.36%。王浩[13]對(duì)陜北白絨山羊斷奶羔羊的研究顯示，鈣的表觀消化率最高達(dá)21.89%，最低為15.341%。朱新民[14]的研究也發(fā)現(xiàn)，生長期波爾山羊鈣的利用率在30% 左右。本試驗(yàn)研究也表明，隨著日糧鈣水平提高，妊娠期云南半細(xì)毛羊的鈣采食量、糞鈣、沉積鈣及鈣的排泄量顯著增加與前人的研究結(jié)果相似；而日糧鈣水平對(duì)鈣的沉積率、鈣的表觀消化率影響不顯著，與前人的研究結(jié)果有所不同，且鈣的利用率低于相關(guān)研究人員的水平。從本試驗(yàn)結(jié)果看，大部分鈣隨糞排出，進(jìn)食鈣與糞鈣存在線性增加的趨勢(shì)，可能與鈣源及日糧的草料組成、妊娠母羊臨近產(chǎn)羔期的因素等有關(guān)。除動(dòng)物的飼養(yǎng)環(huán)境、養(yǎng)殖方式、品種外，日糧飼草料成分以及采食量是影響鈣磷吸收代謝和沉積的主要因素[15]。具體原因有待進(jìn)一步研究。

3.3 日糧不同鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊血清生化指標(biāo)的影響 血清鈣、磷、PHT 含量和ALP 活性常被用于估計(jì)動(dòng)物體內(nèi)鈣、磷營養(yǎng)狀況及評(píng)定需要量的血清學(xué)參數(shù)[11]。盧宋藩[16]研究得出，綿羊血清鈣正常參考值為2.5～3.0 mmoL/L，無機(jī)磷正常參考值為1.29～5.16 mmoL/L；也有研究認(rèn)為，作為牛羊營養(yǎng)指標(biāo)，血清鈣、磷的臨界水平分別為2.00 mmoL/L 和1.45 mmoL/L[17]。本試驗(yàn)測出，5 組妊娠后期云南半細(xì)毛羊的血清鈣含量為2.05～2.27 mmoL/L（略低于正常值），血清磷含量為1.29～1.48 mmoL/L，都在正常值范圍內(nèi)，同時(shí)日糧鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊血清鈣、磷含量的影響不顯著。司丙文等[11]的研究結(jié)果也表明，羔羊日糧中添加鈣對(duì)羔羊血清鈣含量無影響。

ALP 能夠調(diào)節(jié)血液中磷含量的穩(wěn)定性，ALP 活性與血液中磷水平呈負(fù)相關(guān)，血液中磷水平升高，ALP 活性降低，血液中磷水平降低，ALP 活性升高。PHT 是由甲狀腺主細(xì)胞分泌，是參與血清鈣、磷平衡調(diào)節(jié)的重要激素之一[18]。OCN 由成骨細(xì)胞分泌，血清OCN 水平可用于反映成骨細(xì)胞活性，是骨轉(zhuǎn)換的特異標(biāo)志物[19]，當(dāng)骨轉(zhuǎn)換升高時(shí)，血中OCN 水平升高，反之降低[10]。CT的主要功能是促進(jìn)血鈣向骨鈣中移動(dòng)和“沉積”，從而降低血鈣[20]。袁浩容等[21]研究表明，隨著日糧鈣水平升高，后備母羊血清OCN 顯著升高后又降低，說明適當(dāng)提高日糧鈣水平可以使骨轉(zhuǎn)換顯著升高，但過高的日糧鈣水平不能顯著提高骨轉(zhuǎn)換速率，同時(shí)高鈣水平日糧可使后備母羊血清CT 顯著提高。本團(tuán)隊(duì)對(duì)空懷期云南半細(xì)毛羊的研究結(jié)果表明，在日糧磷水平相似的情況下，日糧鈣水平對(duì)血液中ALP、OCN 的影響不顯著[9]。而本試驗(yàn)的研究同樣表明，OCN 未隨日糧鈣水平的升高而升高，說明提高日糧中的鈣水平并未使妊娠后期云南半細(xì)毛羊的血清OCN 水平升高，當(dāng)日糧鈣水平為0.87%時(shí)，OCN 水平有降低趨勢(shì)，而血清中CT 呈不規(guī)律的變化，表明低鈣水平可能已經(jīng)滿足妊娠后期云南半細(xì)毛羊的生長需要，由于本次試驗(yàn)測定了妊娠后期1 d 的血清指標(biāo)，對(duì)研究結(jié)果的研判有一定局限性。

3.4 妊娠后期云南半細(xì)毛羊鈣的的需要量 NRC（2007）推薦的妊娠后期體重50～60 kg 懷單胎的綿羊鈣的維持需要量為0.264～0.271 g/（kgW0.75·d）。在本試驗(yàn)條件下得出的妊娠后期云南半細(xì)毛羊鈣的維持需要量為0.173 2 g/（kgW0.75·d），低于NRC（2007）推薦的維持需要量。

根據(jù)營養(yǎng)學(xué)原理，綜合法得到的需要量是動(dòng)物對(duì)養(yǎng)分的總需要量，但該法需要一個(gè)合理的標(biāo)識(shí)。本研究以母羊的ADG 為標(biāo)識(shí)，它包括胎兒增重和母體自身的增重。本研究的日糧鈣水平不影響ADG，說明各鈣水平（0.4%～0.87%）均可滿足妊娠后期云南半細(xì)毛羊的鈣需要量，但是日糧鈣水平為0.50%組的ADG 高于其他組，表明妊娠后期云南半細(xì)毛羊的最適鈣水平是0.50%。結(jié)合妊娠后期羊的DMI，可知妊娠后期母羊鈣的總需要量是0.348 9 g/（kgW0.75·d）。羊的品種不同、生長階段不同其對(duì)鈣的需要量也不同。袁浩容等[21]研究得出，55 kg 左右妊娠后期歐拉母羊的日糧鈣需要量為0.37～0.55 g/（kgW0.75·d），張昌吉等[6]采用析因法估測出甘肅高山細(xì)毛羊成年母羊的鈣需要量為0.57～0.61 g/（kgW0.75·d），而我國肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T816-2004）推薦的妊娠后期50～60 kg 懷單胎的綿羊的鈣需要量為0.371～0.372 g/d。由此可見，本試驗(yàn)得到的妊娠后期云南半細(xì)毛羊鈣的需要量略低于以上研究結(jié)果，可能由于本試驗(yàn)的試驗(yàn)羊臨近產(chǎn)羔期，采食量有所下降，而NRC（1985）推薦的妊娠后期為妊娠最后4 周。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，日糧鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊的DMI、ADG、F/G 及血清中血清鈣、磷、ALP、PTH、CT、OCN 的影響不顯著；隨著日糧鈣水平的增加，鈣的采食量呈極顯著增加，而鈣的表觀消化率及鈣沉積率變化不顯著。妊娠后期云南半細(xì)毛羊的鈣維持需要量為0.173 2 g/（kgW0.75·d），總需要量為0.348 9 g/（kgW0.75·d）。