王 彬，郭志強(qiáng)，鄺良德，楊 銳，李叢艷，雷 岷，鄭 潔，謝曉紅

（1.西南大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，重慶 400716；2.四川省畜牧科學(xué)研究院，四川成都 610066）

母兔的繁殖力決定兔場(chǎng)的產(chǎn)出量[1]?，F(xiàn)今，頻密繁殖使母兔的應(yīng)激越來(lái)越嚴(yán)重，導(dǎo)致母兔繁殖障礙和淘汰率增加。過(guò)去藥物治療是最常用的生理機(jī)能調(diào)控手段，但是相關(guān)產(chǎn)品的長(zhǎng)期使用不僅導(dǎo)致動(dòng)物機(jī)體代謝紊亂，還會(huì)造成畜產(chǎn)品的藥物殘留。隨著國(guó)內(nèi)停止生產(chǎn)添加除中草藥類藥物飼料添加劑的商品飼料，天然、安全、高效的藥用植物越來(lái)越得到重視。

桑葉作為藥食同源的經(jīng)濟(jì)作物，具有抗菌消炎的作用[2]，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值上可以媲美豆科苜蓿[3]，作為新型飼料資源具有極大的開(kāi)發(fā)潛力。陶璐璐等[4]研究表明，在湖羊精料中使用不超過(guò)30% 桑葉粉，能夠有效提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能；黃靜等[5]證實(shí)，在胡須雞日糧中添加發(fā)酵桑葉粉能顯著降低血液中甘油三酯和膽固醇含量。目前，我國(guó)桑樹(shù)種植面積已達(dá)100 萬(wàn)hm2，桑葉資源豐富[6]。國(guó)內(nèi)外在利用方式上以桑葉的有效成分提取、烘干和發(fā)酵為主[7]。烘干發(fā)酵處理不但成本增加，也會(huì)導(dǎo)致活性物質(zhì)和原有成分的滅活或丟失。朱春英[8]指出，青綠飼料的缺乏是導(dǎo)致母兔繁殖力下降的關(guān)鍵。因此，尋找合適的青綠飼料以提高家兔繁殖力，是促進(jìn)其養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵。本試驗(yàn)在不同營(yíng)養(yǎng)水平的配合飼料中補(bǔ)飼鮮桑葉，旨在探索鮮桑葉對(duì)經(jīng)產(chǎn)新西蘭母兔繁殖性能的影響，為鮮桑葉資源在肉兔生產(chǎn)中科學(xué)應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)所需的鮮桑葉采集自四川成都金堂隆盛鎮(zhèn)，營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

表1 新鮮桑葉營(yíng)養(yǎng)成分表 %

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼糧 試驗(yàn)選用體重在4.5 kg 左右、第3 胎健康的新西蘭母兔90 只，隨機(jī)分為3 個(gè)處理，每個(gè)處理5 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6 只。試驗(yàn)期間飼喂中營(yíng)養(yǎng)（消化能11.20 MJ/kg，粗蛋白質(zhì)17.50%）、高營(yíng)養(yǎng)（消化能11.70 MJ/kg，粗蛋白質(zhì)18.50%）水平母兔配合飼料，其他營(yíng)養(yǎng)水平基本一致，配合飼料組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表2。對(duì)照組飼喂中營(yíng)養(yǎng)水平飼糧，試驗(yàn)組分別飼喂中營(yíng)養(yǎng)水平飼糧+鮮桑葉和高營(yíng)養(yǎng)水平飼糧+鮮桑葉，各組母兔均自由采食配合飼料，試驗(yàn)組同時(shí)自由采食鮮桑葉。試驗(yàn)于成都大邑韓場(chǎng)肉兔科研基地封閉兔舍進(jìn)行，飼養(yǎng)管理方式一致，并遵照兔場(chǎng)規(guī)定，每日的06:00 和18:00 進(jìn)行飼喂，保證自由采食和飲水。配種方式上選擇自然交配。預(yù)試期7 d，試驗(yàn)從經(jīng)產(chǎn)母兔配種開(kāi)始到下一個(gè)繁殖周期配種前結(jié)束，正試期70 d。

表2 試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.3.1 繁殖性能 跟蹤測(cè)定并分別記錄每只母兔的總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、仔兔初生重、斷奶個(gè)數(shù)和斷奶個(gè)體重等。

1.3.2 血樣采集及血液生化指標(biāo)測(cè)定 分別在預(yù)試期第7 天和試驗(yàn)期第70 天（采血前12 h 停止進(jìn)食），3 組隨機(jī)于5 個(gè)重復(fù)中分別選擇6 只（2 次選擇的母兔一致）體況相近的母兔共18 只，進(jìn)行耳緣動(dòng)脈采血5 mL，血液樣本在3 500 r/min 離心20 min，取上層血清裝入Eppendorf 管中，隨后將待測(cè)樣品轉(zhuǎn)至-20℃冰箱保存。

采用OLYMPUSAU400 全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、膽固醇（TC）和甘油三酯（TG）的含量。血清中雌二醇（E2）、卵泡生成素（FSH）、瘦素（Leptin）、促黃體素（LH）和孕酮（PROG）含量采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），使用MR-96A 酶標(biāo)儀，各激素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值均在0.95 以上。試劑盒均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2016 軟件進(jìn)行記錄和初步處理，采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，顯著水平為P＜0.05，試驗(yàn)結(jié)果以平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)母兔采食量的影響 由表3 可知，中營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組、高營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組經(jīng)產(chǎn)母兔妊娠期的日均采食量較對(duì)照組分別下降33.05% 和43.02%（P＜0.05），且高營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組的日均采食量低于中營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組（P＜0.05）；中營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組、高營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組哺乳期的日均采食量較對(duì)照組分別下降了6.87%和7.43%（P＜0.05），試驗(yàn)組間日均采食量差異均不顯著。雖然在高營(yíng)養(yǎng)水平下增加了母兔對(duì)鮮桑葉的采食量，但差異均不顯著。

表3 補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)經(jīng)產(chǎn)母兔日采食量的影響 g

2.2 補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)經(jīng)產(chǎn)母兔繁殖性能的影響 由表4 可知，與對(duì)照組相比，中營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組、高營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組產(chǎn)活仔數(shù)分別提高了13.37%和14.97%（P＜0.05），且高營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組產(chǎn)活仔數(shù)較中營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組提高了1.41%（P＜0.05）；中營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組、高營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組斷奶只數(shù)比對(duì)照組分別提高14.89% 和17.31%（P＜0.05），但試驗(yàn)組間差異不顯著。與對(duì)照組相比，中營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組、高營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組經(jīng)產(chǎn)母兔斷奶成活率分別提高了1.20%和1.83%。

表4 飼糧添加鮮桑葉對(duì)經(jīng)產(chǎn)母兔繁殖性能的影響

2.3 補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)母兔生殖激素的影響 由表5 可知，補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)經(jīng)產(chǎn)母兔血清E2、FSH、LH、PROG 無(wú)顯著影響；與對(duì)照組相比，中營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組、高營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組經(jīng)產(chǎn)母兔血清Leptin 分別提高了28.81%和30.51%（P＜0.05）。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，中營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組、高營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組血清Leptin 水平比試驗(yàn)前分別提高了39.19% 和36.52%（P＜0.05），對(duì)照組血清Leptin水平在試驗(yàn)的前后無(wú)顯著變化。其他指標(biāo)在試驗(yàn)前后及組間均無(wú)顯著差異。

表5 補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)經(jīng)產(chǎn)母兔生殖激素的影響

2.4 補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)母兔血清生化指標(biāo)的影響 由表6 可知，補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)經(jīng)產(chǎn)母兔血清中ALT、AST、ALP無(wú)顯著影響。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，中營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組、高營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組血清TC 含量較試驗(yàn)前分別下降了40.95%和52.94%（P＜0.05），TG 含量分別下降了20.34% 和20.18%（P＜0.05）；對(duì)照組血清TC 和TG 的含量在試驗(yàn)前后并無(wú)顯著變化。與對(duì)照組相比，中營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組、高營(yíng)養(yǎng)+鮮桑葉組母兔血清TC 含量分別降低了38.84% 和50.00%（P＜0.05），TG 含量較對(duì)照組分別下降了35.17%和37.24%（P＜0.05），試驗(yàn)組間差異均不顯著。

表6 補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)經(jīng)產(chǎn)母兔血清生化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)母兔采食量和繁殖性能的影響 母兔產(chǎn)活仔數(shù)和斷奶仔兔數(shù)是反映母兔繁殖能力的2 個(gè)重要指標(biāo)。王小燕等[9]研究發(fā)現(xiàn)，妊娠母豬日糧中添加10%桑葉粉其總產(chǎn)仔數(shù)提高7.8%，活仔數(shù)上升5.2%。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，補(bǔ)飼鮮桑葉的試驗(yàn)組妊娠期和哺乳期的配合飼料采食量均顯著下降，但產(chǎn)活仔數(shù)和斷奶仔兔數(shù)卻顯著提高。說(shuō)明補(bǔ)飼鮮桑葉不但不會(huì)對(duì)母兔的繁殖性能產(chǎn)生負(fù)面影響，還可明顯提高母兔的經(jīng)濟(jì)效益，這可能與鮮桑葉的催化性補(bǔ)飼作用有關(guān)。鮮桑葉作為一種青綠飼料自身含有大量的粗纖維、生物活性物質(zhì)和維生素，有助于合理改善日糧結(jié)構(gòu)，增加消化酶活性，提高飼料的消化吸收利用率。另外，疾病是影響經(jīng)產(chǎn)母兔產(chǎn)活仔數(shù)的重要因素。研究表明，桑葉多糖能夠優(yōu)化腸道菌群，調(diào)節(jié)腸道穩(wěn)態(tài)；桑黃酮能夠緩解大腸桿菌引起的免疫應(yīng)激反應(yīng)[10-11]。同時(shí)鮮桑葉中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可以通過(guò)母乳使新生仔兔被動(dòng)獲得，從而對(duì)仔兔的生長(zhǎng)和健康產(chǎn)生影響。因此，本試驗(yàn)對(duì)經(jīng)產(chǎn)母兔補(bǔ)飼鮮桑葉可能更好地滿足了母兔在妊娠期和哺乳期的營(yíng)養(yǎng)需要量，改善了母乳成分，增強(qiáng)了機(jī)體抗病力，提高母兔健康狀況，從而在表型上提高了經(jīng)產(chǎn)母兔的繁殖性能。

3.2 補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)母兔生殖激素的影響 Leptin 作為一種脂肪組織分泌的蛋白質(zhì)類激素，在動(dòng)物機(jī)體的能量代謝和繁殖機(jī)能方面發(fā)揮著紐帶作用[12-13]。Antonio 等[14]通過(guò)大鼠試驗(yàn)證明了Leptin 在發(fā)情周期中的“開(kāi)關(guān)”作用。本研究結(jié)果顯示，補(bǔ)飼鮮桑葉可顯著提高血清中Leptin 含量，有助于母畜在哺乳期結(jié)束后提前發(fā)情，提高母兔的繁殖效率，縮短產(chǎn)仔間隔。基因表達(dá)調(diào)控是影響血清Leptin 水平的關(guān)鍵因素。劉功煒等[15]的研究證實(shí)了15%青貯桑葉能夠顯著增加絨山羊脂肪組織中Leptin基因的表達(dá)，提高絨山羊的血清Leptin 水平。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，雖然補(bǔ)飼鮮桑葉顯著降低了母兔對(duì)配合飼料的采食量，但母兔的血清Leptin 水平反而上升了，說(shuō)明鮮桑葉可能會(huì)增加脂肪組織中Leptin基因的表達(dá)，提高機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用率，促進(jìn)體脂沉積，進(jìn)而增加血清Leptin 水平。

3.3 補(bǔ)飼鮮桑葉對(duì)母兔血清生化指標(biāo)的影響 血液生化指標(biāo)的波動(dòng)變化是動(dòng)物機(jī)體健康水平、新陳代謝和消化吸收的直觀反映，肝細(xì)胞的ALT 和AST 含量遠(yuǎn)高于血清含量，是反映肝細(xì)胞損傷和壞死的敏感性指標(biāo)[16]；血清TC 和TG 是評(píng)價(jià)機(jī)體脂肪代謝水平的重要指標(biāo)[17]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)組血清ALT 和AST 含量與對(duì)照組相比沒(méi)有顯著升高，說(shuō)明給經(jīng)產(chǎn)母兔補(bǔ)飼一定比例的鮮桑葉并不會(huì)增加母兔的肝臟負(fù)擔(dān)。血清TC 和TG的異常升高將會(huì)增加血液的黏稠度，導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生高脂血癥[18]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組母兔血清TC 和TG 含量都顯著低于對(duì)照組，推測(cè)桑葉多酚及生物堿等活性物質(zhì)發(fā)揮了對(duì)脂肪代謝的促進(jìn)作用。有研究表明，桑葉多酚提取物可以極顯著降低細(xì)胞中TC、TG 濃度；桑葉中含有的多羥基哌啶類生物堿，能夠促進(jìn)血糖、血脂的轉(zhuǎn)運(yùn)代謝，降低小鼠因高脂飼料造成的肝臟損傷[19]。本研究中，試驗(yàn)組母兔的血清TC、TG 含量均顯著下降，表明機(jī)體增加了脂質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝能力，增強(qiáng)了肝臟功能，這有利于促進(jìn)機(jī)體健康、提高繁殖力和子代的生長(zhǎng)發(fā)育。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，補(bǔ)飼鮮桑葉可以提高新西蘭母兔的產(chǎn)活仔數(shù)、斷奶仔兔數(shù)和血清Leptin 水平，降低血清TC、TG 含量，其中高營(yíng)養(yǎng)水平飼糧補(bǔ)充鮮桑葉作用更加明顯。