龐家滿,王軍軍,王春林,談蘇貞,楊富裕,張 燕,趙應(yīng)堂,韓丹丹*
(1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,動物營養(yǎng)學(xué)國家重點實驗室,北京 100193;2.貴州木辣達(dá)康養(yǎng)科技有限公司,貴州晴隆 561401;3.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,北京 100193;4.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營養(yǎng)工程學(xué)院,北京 100193)
畜牧業(yè)快速發(fā)展使得我國飼料資源短缺,尤其是蛋白質(zhì)飼料資源的短缺制約著我國畜牧業(yè)的生產(chǎn),同時出現(xiàn)了人畜爭糧的現(xiàn)象。因此,開發(fā)新型非常規(guī)蛋白質(zhì)飼料資源,成為緩解飼料資源短缺的重要手段之一。辣木(Moringa oleiferaLam.)為辣木科(Moringaceae)辣木屬(Moringa)多年生植物,起源于印度,現(xiàn)廣泛種植于亞洲、非洲、熱帶等地區(qū)[1]。由于辣木耐熱、生長速度快、產(chǎn)量高,同時含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)而被廣泛種植,在我國辣木主要種植地區(qū)有云南、福建、廣東等地[1]。辣木一年生長高度就達(dá)4 m,辣木葉鮮葉產(chǎn)量高達(dá)250 t/ hm2,在氣候適宜和管理良好的條件下,產(chǎn)量能夠達(dá)到1 000 t/hm2[2]。辣木不僅生長速度快,并且含有豐富的維生素和礦質(zhì)元素[3-5],以及較高的蛋白質(zhì)和豐富的氨基酸,因而具有作為蛋白質(zhì)飼料的潛力[4,6-8]。有研究報道,添加5%左右的辣木葉粉會提高生長豬和育肥豬的生長性能,還能改善動物的肉品質(zhì)[9-12]。另外,辣木中的黃酮含量高達(dá)4%~7%[13-14],體內(nèi)外都有很好的抗氧化功能[14-15]。研究表明,添加辣木葉或提取物可以增強育肥豬、蛋雞和肉雞的抗氧化能力,減低死淘率[12,16-18]。盡管在飼糧中添加辣木葉的研究較多,但辣木葉替代豆粕的研究還未見報道。因此,本試驗旨在研究辣木葉替代不同水平豆粕對生長豬生長性能的影響,以期為辣木葉作為蛋白資源應(yīng)用于生豬生產(chǎn)提供數(shù)據(jù)參考。
1.1 試驗材料 辣木葉由貴州百草靈生物科技有限公司提供,采用烘干方式處理,營養(yǎng)成分見表1。
表1 辣木葉的營養(yǎng)成分(風(fēng)干基礎(chǔ))
1.2 試驗設(shè)計和飼養(yǎng)管理 選擇24 頭初始體重為(18.60±0.17)kg 杜×長×大仔豬隨機分配到4 組,分別為對照組、2%辣木葉替代組、4%辣木葉替代組、6%辣木葉替代組,每個處理6 個重復(fù)。預(yù)試期3 d,正試期28 d。記錄每天采食量和每周體重變化。試驗期間每天于08:00和15:00 投喂,自由飲水,豬舍溫度維持在22 ℃。
1.3 試驗飼糧 試驗分18~25、26~40 kg 2 個階段。試驗配方參考NRC(2012)相應(yīng)階段的營養(yǎng)需要配制。2 個階段日糧組成及營養(yǎng)成分分別見表2、3,使用辣木葉等比例替代豆粕,替代水平分別為2%、4%和6%。
表2 18~25 kg 階段試驗日糧組成及營成分(風(fēng)干基礎(chǔ))
1.4 樣品采集與處理 在試驗期的第14、28 天08:00 前腔靜脈采集血液,在室溫放置2 h 后,3 000 r/min 離心15 min,分離血清,分裝在1.5 mL EP 管中,-80℃保存待用。在試驗期第22 天,采集新鮮糞樣保存于無菌凍存管中,-80℃保存待用。
1.5 檢測指標(biāo)及方法
1.5.1 生長性能 試驗期記錄每天采食量,每周記錄1次體重。體重稱量前禁食過夜,于第2 天08:00 稱重,最后計算平均日采食量、平均日增重和耗料增重比。
1.5.2 抗氧化指標(biāo) 總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過氧物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的測定方法參照試劑盒(南京建成生物工程研究所)相關(guān)方法。
1.5.3 糞便中微生物菌落 構(gòu)建含有目的片段標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒,并分別建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。稱取0.1 g 左右的糞樣,提取DNA,使用實時熒光定量PCR 檢測其拷貝數(shù),使用標(biāo)準(zhǔn)曲線計算糞便中總菌、乳酸菌、雙歧桿菌和大腸桿菌的數(shù)量,結(jié)果用lg(CFU/g)表示。
1.6 統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)采用SAS 8.1 中單因素方差分析,并采用Turkey 法進(jìn)行多重比較,P<0.05 為差異顯著,0.05 ≤P<0.10 為顯著差異趨勢,結(jié)果用平均值± 標(biāo)準(zhǔn)誤表示。
2.1 辣木葉對生長豬生長性能的影響 由表4 可見,辣木葉替換不同比例的豆粕對生長豬末重?zé)o顯著影響;辣木葉組在平均采食量、平均日增重和耗料增重比與對照組均無顯著差異,4%辣木葉替代組第4 周平均日增重有增加趨勢(P<0.10);4%辣木葉替代組第3 周、第4 周和全期的耗料增重比較2%辣木葉替代組均提高(P<0.05)。
表4 辣木葉替代豆粕對生長豬生長性能的影響
表3 26~40 kg 階段試驗日糧組成及營養(yǎng)成分(風(fēng)干基礎(chǔ))
2.2 辣木葉對生長豬血清抗氧化指標(biāo)的影響 由表5 可知,與對照組相比,辣木葉替代組對14 d 生長豬血清中T-AOC、GSH-Px 和MDA 含量無顯著影響;辣木葉替代組對28 d 生長豬血清中GSH-Px 和MDA 水平無顯著影響,但6%辣木葉替代組提高了28 d 血清中T-AOC水平(P<0.05)。
表5 辣木葉替代豆粕對生長豬抗氧化能力的影響
2.3 辣木葉對腸道微生物的影響 由表6 可知,與對照組相比,辣木葉替代組對生長豬糞便中總菌、大腸桿菌、乳酸菌和雙歧桿菌無顯著差異,4%辣木葉替代組乳酸菌有增加的趨勢(P=0.067)。
表6 辣木葉替代豆粕對生長豬糞便微生物的影響 lg(CFU/g)
本研究結(jié)果表明,辣木葉替代不同水平豆粕不影響18~40 kg 生長豬的生長性能,4%替代組生長性能最佳,具有最高的耗料增重比。Oduro-Owusu 等[10]在14~60 kg階段添加不同比例辣木葉對生長豬的平均日采食量、末重?zé)o顯著影響,但在5%辣木葉組飼料轉(zhuǎn)化效率最佳且顯著高于2.5%組。類似的,Serem 等[11]在26~65 kg 生長豬階段添加3%~6%辣木葉粉具有最佳的飼料轉(zhuǎn)化效率。另外,Mukumbo 等[9]研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加不同含量辣木葉對70~100 kg 育肥豬的末重、平均日采食量無顯著影響,但5%辣木葉粉組有最高的飼料轉(zhuǎn)化效率。辣木葉改善動物的生長性能可能與辣木葉中含有豐富的黃酮、酚類化合物有關(guān)。干物質(zhì)基礎(chǔ)下辣木葉黃酮含量為4%~7%[13-14],黃酮類物質(zhì)具有促生長作用[19];其次,辣木黃酮和酚類化合物還具有很好的抗氧化作用[15]。在飼糧中添加6%辣木葉提高了育肥豬的生長性能和抗氧化能力[12];在AA 肉雞飼糧中添加0.5% 辣木提取物提高了肉雞的血清T-AOC,降低了MDA 含量[16]。本試驗在生長豬中使用辣木葉替代豆粕也增加了血清的T-AOC,且6% 辣木葉替代組血清T-AOC 顯著高于對照組;4%辣木葉替代組有增加糞便中乳酸菌的數(shù)量趨勢,這可能是提高生長性能的另一原因。有研究表明,腸道微生物對維持腸道健康、營養(yǎng)物質(zhì)利用以及改善畜禽生長性能有重要的作用[20]。辣木葉中豐富的維生素A、維生素C 和維生素E 對促進(jìn)動物生長和抗氧化也起著一定作用。添加過高水平的辣木葉并沒有獲得更高的生長性能,這可能與飼料中的纖維含量和抗?fàn)I養(yǎng)因子有關(guān)[21-22]。辣木葉一方面含有較高的纖維,其次辣木葉中還含有許多的抗?fàn)I養(yǎng)因子(如皂苷、植酸和單寧等)[20],影響了營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。
本研究結(jié)果表明,在18~40 kg 階段生長豬日糧中添加2%~6%的辣木葉替代豆粕不影響生長性能,但可增加抗氧化能力,4%辣木葉替代組增加了腸道乳酸菌含量,具有較優(yōu)的生長性能。建議在此階段使用辣木葉替代4%豆粕。