劉濤

（山西省朔州市朔城區(qū)人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科，山西 朔州 036002）

0 引言

宮頸癌對(duì)于婦女是最為常見的惡性腫瘤，位居?jì)D科惡性腫瘤的首位，其發(fā)病率非常高，死亡率高，對(duì)婦女的生命健康危害居于次位，而我國(guó)宮頸癌的患病及死亡占全世界的30%[1,2]。在臨床流行病學(xué)分析和生物手段監(jiān)測(cè)中，宮頸癌病變的爆發(fā)很大程度上與HPV 感染密切相關(guān)。故此在日常的體檢對(duì)于婦女來說，盡早及時(shí)篩查hrHPV 對(duì)于降低婦女患有宮頸癌的幾率大大降低，做到早預(yù)防早治療的目的，可以極大的降低其對(duì)人體的危害程度[3,4]。此研究主要是利用超薄液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)（TCT)和基因雜交捕獲技術(shù)（HC2-HPV-DNA）進(jìn)行篩查朔州地區(qū)1000 名婦女,同時(shí)運(yùn)用電子陰道鏡下檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行病理活檢。研究婦女hrHPV 感染與宮頸癌變的相關(guān)性，這對(duì)宮頸癌的檢測(cè)和預(yù)防有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

1 資料與方法

1.1 材料

為了更好的研究HPV 感染與宮頸病變，因此本實(shí)驗(yàn)主要在朔州地區(qū)選取1000 名在婦科門診就醫(yī)的患者，并且對(duì)患者的年齡進(jìn)行一定的篩選，年齡區(qū)間在25～60 歲，其中平均年齡集中在40.2 周歲。在這些經(jīng)過年齡篩查后，將就醫(yī)的患者細(xì)胞首先進(jìn)行TCT 的檢測(cè)，在一定的時(shí)間后從新獲取細(xì)胞在接受HC2-HPV-DNA 的檢測(cè)，排除長(zhǎng)時(shí)間對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，這兩項(xiàng)檢查中只要其中一項(xiàng)檢查結(jié)果異常就給予以活檢。

1.2 方法

1.2.1 hrHPV-DNA 檢測(cè)

對(duì)于用此方法來檢測(cè)，其是目前被公認(rèn)的檢測(cè)手段，HC2-HPV-DNA 是世界衛(wèi)生組織批準(zhǔn)認(rèn)可的一項(xiàng)權(quán)威檢測(cè)手段，被視為HPV 檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。目前公認(rèn)的13 種HPVDNA 高危亞型被Digene 公司利用雜交捕獲試驗(yàn)（HC2)方法已經(jīng)檢測(cè)。

1.2.2 采樣

采樣注意的事項(xiàng)，首先在采樣前對(duì)患者應(yīng)進(jìn)行篩選要保證陰道口沒有進(jìn)行藥物處理，同時(shí)也不能進(jìn)行消毒處理；用特定的細(xì)胞收集裝置收集宮頸管外口的細(xì)胞組織，將其放在特定的緩沖液中，儲(chǔ)存于4℃冰箱。

1.2.3 檢測(cè)試劑

本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)采用HC2-HPV-DNA 檢測(cè)試劑盒，并嚴(yán)格按其說明書提供的操作步驟進(jìn)行操作檢測(cè)樣本。

1.2.4 檢測(cè)結(jié)果的判斷

根據(jù)樣本的讀數(shù)與陰性值的比值即（RLU/CO），當(dāng)其比值大于1.0 時(shí)代表檢測(cè)結(jié)果為陽性。當(dāng)其比值小于等于1 時(shí)表明為陰性，其HPV-DNA<1pg/mL。

1.2.5 TCT 檢查分析

首先用特制的毛刷采集宮口陰道內(nèi)壁的細(xì)胞，然后將收集的細(xì)胞組織立即保存在特定的裝置中，用特定的處理裝置對(duì)樣品處理，采用TBS（2005）分級(jí)系統(tǒng)對(duì)收集的細(xì)胞組織進(jìn)行診斷。

1.2.6 病理學(xué)檢查

首先觀察找出病變較嚴(yán)重的地方進(jìn)行多點(diǎn)采樣，觀察是否有差異，如果沒有明顯的差異，則采取常規(guī)取樣規(guī)則按第2、5、8、11 點(diǎn)4處采樣檢測(cè)，結(jié)果最終以病檢結(jié)果為準(zhǔn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 檢測(cè)結(jié)果

2.1 細(xì)胞HPV 檢測(cè)結(jié)果

采用HC2-HPV-DNA 方法對(duì)13 種高危型HPV 進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果顯示：1000 名患者中，100 名為陽性，其陽性率為10%（100/1000） ，900 名為陰性，陰性率90%（900/1000）。結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，年齡組在40～55 周歲的患者HPV 感染較其他年齡段的多，其P<0.05 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同年齡段的檢測(cè)結(jié)果如表1。

表1 HPV 在不同年齡段的感染情況（n，%）

2.2 病理診斷結(jié)果

檢測(cè)結(jié)果中，將HC2-HPV-DNA 呈陽性的數(shù)量與病理檢測(cè)的陽性結(jié)果做比較 ，發(fā)現(xiàn)其陽性率為84.5%；而將TCT 檢測(cè)呈陽性的數(shù)量與病理檢測(cè)結(jié)果呈陽性的比較，其陽性率為82.4%。兩者檢測(cè)結(jié)果差異不明顯，通過計(jì)算其P值發(fā)現(xiàn)大于0.05，故此其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。分析病理組織學(xué)檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在98 例病理診斷為陽性結(jié)果中，CIN(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、)、宮頸鱗癌、宮頸腺癌的患者共56 例。其中HC2-HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果呈陽性患者為48 例，敏感性為85.71%（48/56)。TCT 檢測(cè)結(jié)果呈陽性患者為50 例，敏感性為89.2%（50/56)。宮頸鱗癌、腺癌的患者3 例，HC2-HPV-DNA 結(jié)果2 例為陽性，敏感性為66.7%（2/3)，TCT 結(jié)果均為陽性，敏感性為100.0%（3/3）。（表2）

表2 HC2-HPV-DNA 和TCT 兩種方法檢測(cè)結(jié)果與病理結(jié)果的相關(guān)性（例）

2.3 CIN、ICC 與hrHPV 病毒載量的相關(guān)性

分析發(fā)現(xiàn)炎癥組的載量明顯低于CIN Ⅰ 、Ⅱ、Ⅲ級(jí)宮頸癌hrHPV 的載量，計(jì)算其P值小于0.01，數(shù)據(jù)具有顯著差異性。對(duì)于病毒載量分析發(fā)現(xiàn)，其中的CIN Ⅱ、 Ⅲ級(jí)hrHPV 的載量相比于CIN Ⅰ具有很高的水平，同時(shí)其P值小于0.05 具有顯著差異。計(jì)算宮頸癌hrH-PV 的病毒載量與 CIN Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)的病毒載量的P值，發(fā)現(xiàn)并差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，詳細(xì)數(shù)據(jù)見表3。

表3 hrHPV 病毒載量與 CIN、ICC 關(guān)系（±s）

表3 hrHPV 病毒載量與 CIN、ICC 關(guān)系（±s）

病理結(jié)果 n RLU/CO（pg/mL）炎癥組 41 116.2±63.5 CIN Ⅰ 22 293.1±49.1 CIN Ⅱ 19 339.2±58.6 CIN Ⅲ 13 372.2±78.9 ICC 3 306.5±57.9

3 討論

在臨床檢測(cè)中，發(fā)現(xiàn)婦女最為常見的腫瘤是宮頸癌。其中據(jù)臨床統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析，其中宮頸癌患有將近98.9%的人群感染了HPV，這明顯的增加了宮頸癌對(duì)于婦女的危害。生物細(xì)胞分析發(fā)現(xiàn)，HPV 是由雙鏈DNA（8000bp）分子顆粒和衣殼蛋白組成的一種上皮性病毒。HPV 最為常見的傳播途徑是性傳播，同時(shí)也可以是環(huán)境如醫(yī)務(wù)性傳播。據(jù)研究表明[5,6]，不同的類型可能還可以加大其他浸潤(rùn)性疾病的發(fā)病率，因此盡早的檢測(cè)是否HPV 感染，對(duì)HPV 傳播和進(jìn)一步擴(kuò)散具有重要意義，也同時(shí)可以避免婦女在生殖器官的進(jìn)一步感染，降低風(fēng)險(xiǎn)避免癌癥的進(jìn)一步發(fā)生有著重要的意義。

本研究針對(duì)朔州地區(qū)的1000 名年齡在25～60 歲不同年齡段的患者進(jìn)行了HPV 感染測(cè)試，對(duì)13 種（即16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59 及68）HPV-DNA 高 危 亞型進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示100 名呈現(xiàn)出陽性結(jié)果，其陽性率為10.0%（100/1000）。通過對(duì)不同年齡段的患者進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，年齡在40～55 歲的感染率明顯高于其他年齡段，其比率占69%，計(jì)算其P值小于0.05 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在年齡段25～40 和55～60 范圍內(nèi)，在前者隨著年齡的減小hrHPV 的感染率降低，而后者結(jié)果恰好相反。此結(jié)果表明中年患者易感染hrHPV，敏感度高、特異性低；并且與CIN 分級(jí)間有明顯的相關(guān)性[7-8]，可以看出來我國(guó)宮頸癌變的發(fā)生逐漸趨于中年化。

研究顯示HC2 對(duì)于HPV 是一個(gè)較為有效的檢測(cè)方法，同時(shí)可以有效的預(yù)防宮頸病變的發(fā)生。HC2 檢測(cè)具有相當(dāng)高的敏感性，其主要是采用全長(zhǎng)的RNA 探針進(jìn)行檢測(cè)。由表2可知，在100 名陽性患者中，其中患有CIN Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)以及宮頸腺癌和鱗癌的患者提高達(dá)56 例，其占比為56.0%；對(duì)應(yīng)著CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ、宮頸鱗癌 、宮頸腺癌HPV 檢測(cè)結(jié)果陽性患者為48 例，敏感性為85.71% （48/56）。與我國(guó)對(duì)HC2宮頸高度病變靈敏度高達(dá) 85%～100% 的研究結(jié)果相一致[9]。宮頸腺癌、鱗癌的檢測(cè)呈陽性的有3 例，TCT 檢測(cè)均為陽性，敏感性為100.0%（3/3),HC2-HPV-DNA 結(jié)果2 例為陽性，敏感性為66.7%（2/3)。

研究結(jié)果顯示，細(xì)胞學(xué)診斷與高危型HPV 檢測(cè)是臨床檢測(cè)較為有效快速的一種檢測(cè)方法。HC2-HPV-DNA 呈陽性的數(shù)量與病理檢測(cè)的陽性結(jié)果做比較,發(fā)現(xiàn)其陽性率為84.5%。而將TCT 檢測(cè)呈陽性的數(shù)量與病理檢測(cè)結(jié)果呈陽性的比較，其陽性率為82.4%， 兩者檢測(cè)結(jié)果差異不明顯，通過計(jì)算其P值發(fā)現(xiàn)大于0.05，故此其無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，故此將兩種方法結(jié)合起來共同檢測(cè)可以提高檢測(cè)準(zhǔn)確率。

本研究通過對(duì)朔州地區(qū)1000 名婦女進(jìn)行高危型HPV 感染與宮頸病變的關(guān)聯(lián)性探究后發(fā)現(xiàn)：HC2-HPV-DNA 對(duì)于宮頸癌及癌前病變的檢測(cè)是有效的，且這種方法可以有效的檢測(cè)篩選出病變組織細(xì)胞，對(duì)預(yù)防癌癥有很大的幫助。對(duì)于不同的年齡段25～40 和55～60 范圍內(nèi)，在前者隨著年齡的減小hrHPV 的感染率降低，而后者結(jié)果恰好相反，患者主要集中在40～60 歲之間，不同年齡段hrHPV 感染會(huì)有不同；最終,運(yùn)用HPV 檢測(cè)的結(jié)果同時(shí)結(jié)合宮頸細(xì)胞組織進(jìn)行聯(lián)合病理檢查，可以有效地應(yīng)用于臨床檢測(cè)和防控和減小宮頸癌及癌的發(fā)生很有意義。