石書凡

作者單位：418000 湖南懷化，懷化市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科

肺部曲霉菌感染在臨床中比較多見，是一種發(fā)病率較高的感染性疾病，可導(dǎo)致患者肺部啰音增多、持續(xù)高熱、呼吸困難、咯血以及咳嗽。肺部曲霉菌可侵襲肺部血管，破壞肺部組織，引起嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)，甚至導(dǎo)致肺組織糜爛壞死，危害患者生命安全［1］。曲霉菌在自然界中廣泛存在，也可分布于空氣中，且生命力較強(qiáng)，對環(huán)境具有良好的適應(yīng)能力，同時還能耐受高溫，因此人體一旦發(fā)生曲霉菌感染，則容易造成范圍較廣的傳播，且很難徹底清除病原體［2］。因此，早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，幫助患者及時控制病情具有重要的臨床意義?，F(xiàn)階段臨床對肺部曲霉菌感染患者的診斷通常以微生物檢驗(yàn)為主要參考，但是采用不同的微生物檢驗(yàn)方法，其陽性檢出率也會有所不同，從而導(dǎo)致臨床治療效果出現(xiàn)較大差異［3］。本研究以77例肺部曲霉菌感染患者作為研究對象，對所有患者進(jìn)行血漿1，3-β-D-葡聚糖試驗(yàn)（1，3-β-D-glucan test，G試驗(yàn)）、痰培養(yǎng)以及半乳甘露聚糖試驗(yàn)（galactomannan test，GM試驗(yàn)），比較不同方法所得檢測結(jié)果，旨在尋找最佳的微生物檢驗(yàn)方法，以供臨床參考，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1研究對象與一般資料 選擇2019年12月—2020年12月本院收治的77例肺部曲霉菌感染患者作為研究對象，其中男性44例，女性33例；年齡35～77歲，平均（55.4±12.2）歲。所有患者經(jīng)病理組織學(xué)檢查診斷明確，41例為侵襲型肺部曲霉感染，36例為寄生型肺部曲霉感染。

1.1.1納入標(biāo)準(zhǔn) ① 通過多次痰培養(yǎng)和影像學(xué)檢查，結(jié)合患者臨床癥狀以及病理組織學(xué)檢查，證實(shí)為肺部曲霉菌感染；② 患者基礎(chǔ)資料完整；③ 患者無其他肺部疾病。

1.1.2排除標(biāo)準(zhǔn) ① 合并其他器質(zhì)性疾??；② 有神經(jīng)系統(tǒng)疾病史；③ 存在其他感染性疾病；④ 近6個月內(nèi)參與過其他研究。

1.1.3倫理學(xué) 本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會赫爾辛基宣言》的相關(guān)要求，并通過本院倫理審批（審批號：20210126），所有對患者的檢測均獲得過患者或家屬的知情同意。

1.2研究方法 所有研究對象在入院后均接受微生物檢驗(yàn)。

1.2.1G試驗(yàn) 根據(jù)光學(xué)纖維支氣管鏡（纖支鏡）操作規(guī)程，由專業(yè)醫(yī)師進(jìn)行操作，負(fù)壓吸出清潔肺泡的生理鹽水以獲得受檢者支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）作為檢驗(yàn)樣本。采用直接劃線法接種于沙保羅平皿，在34～36 ℃恒溫環(huán)境中放置培養(yǎng)皿，持續(xù)孵育24 h，觀察培養(yǎng)皿中的菌落變化，詳細(xì)記錄菌落形態(tài)、顏色。然后在潔凈的玻片上放置疑似曲霉菌標(biāo)本，使用棉藍(lán)染液進(jìn)行染色處理，置于顯微鏡下仔細(xì)觀察，如果菌絲分支間隔45°，則判定為曲霉菌陽性。

1.2.2痰培養(yǎng) 以患者痰液作為檢驗(yàn)樣本，采用直接劃線法接種于沙保羅平皿，在34～36 ℃恒溫環(huán)境中放置培養(yǎng)皿，持續(xù)孵育24 h，然后細(xì)致觀察培養(yǎng)皿中菌落的形態(tài)和顏色變化。若觀察到菌落有以下特征，則初步判定為曲霉菌陽性：① 呈黑色、放射圓柱狀或放射狀；② 呈綠色或黃褐色且表現(xiàn)為圓柱狀或球形；③ 呈青灰色或灰黃色圓柱狀。

1.2.3GM試驗(yàn) 所有患者空腹8 h后采集5 mL靜脈血，以3 000 r/min（離心半徑為5 cm）離心10 min，留取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）測定血清中半乳甘露聚糖（galactomannan，GM）抗原，當(dāng)結(jié)果＞10.5 ng/L時，判定為曲霉菌陽性。

1.3觀察指標(biāo) 參照病理組織學(xué)檢查診斷結(jié)果，分析并比較G試驗(yàn)、痰培養(yǎng)、GM試驗(yàn)等不同微生物檢驗(yàn)方法的陽性檢出率。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行錄入和處理。符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計數(shù)資料以例數(shù)（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。組間差異以P值進(jìn)行判定，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α設(shè)置為0.05，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

3種微生物檢驗(yàn)方法所得結(jié)果中，GM試驗(yàn)的陽性檢出率最高，達(dá)到97.40%（75/77）；其次為G試驗(yàn)，陽性檢出率為88.31%（68/77）；痰培養(yǎng)的陽性檢出率最低，為75.32%（58/77）。不同微生物檢驗(yàn)方法結(jié)果比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。見表1。

3 討論

曲霉菌是自然界中較常見的真菌，同時也是誘發(fā)呼吸道感染的致病菌，而且還會嚴(yán)重侵襲人體肺部和腦部。由于曲霉菌廣泛分布于空氣中，加之其具有頑強(qiáng)的生命力、優(yōu)良的適應(yīng)性以及耐高溫等特點(diǎn)，極易大范圍傳播，如果不及時加以控制，曲霉菌便會進(jìn)一步破壞肺部血管，引起嚴(yán)重的肺部炎癥，危害患者生命安全。因此，臨床需要及時對肺部曲霉菌感染進(jìn)行準(zhǔn)確診斷，以便采取針對性治療措施，減緩病情的進(jìn)展速度，達(dá)到改善患者預(yù)后的目的。

有研究顯示，空氣中的每個曲霉菌菌體內(nèi)都存在上千個孢子，這些孢子能夠進(jìn)行無性繁殖，產(chǎn)生無性孢子。當(dāng)接觸這些微生物后，孢子會進(jìn)入人體，定植于肺部并不斷生長繁殖，導(dǎo)致組織潰爛壞死，損傷患者肺功能，甚至因?yàn)榉喂δ芩ネ硕＜吧?］。

肺部曲霉菌感染一般可分為寄生型和侵襲型兩種，寄生型肺部曲霉菌感染主要表現(xiàn)為咯血、咳嗽；侵襲型肺部曲霉菌感染通常表現(xiàn)為呼吸困難、持續(xù)高熱不退［5］。因此，臨床在治療肺部曲霉菌感染患者時需要根據(jù)實(shí)際癥狀體征給予相應(yīng)的干預(yù)措施，從而有助于改善預(yù)后。目前臨床常用卡泊芬凈和伏立康唑治療侵襲型肺部曲霉菌感染，若用藥后效果欠佳，則考慮手術(shù)治療。而對寄生型肺部曲霉菌感染患者則需要針對患者實(shí)際咯血情況，直接進(jìn)行手術(shù)或給予聯(lián)合用藥治療，以確保患者療效滿意［6］。與其他疾病比較，肺部曲霉菌感染的發(fā)病率雖然不高，但是多數(shù)患者發(fā)病后的臨床癥狀并不十分典型［7］。在肺部腫瘤、支氣管擴(kuò)張、支氣管哮喘等疾病患者中，肺部感染曲霉菌的風(fēng)險較高，且臨床治療期間患者需長期使用激素類藥物，可能會加重癥狀，而通過加強(qiáng)CT掃描觀察可發(fā)現(xiàn)肺部陰影模糊，呈片狀，故而早期進(jìn)行有效診斷，這對于挽救患者生命至關(guān)重要［8］。目前對肺部曲霉菌感染的研究報道較少，由于缺乏高效的檢驗(yàn)技術(shù)以及大眾對該疾病認(rèn)知度較低，使得治療效果并不令人滿意，因此亟需探索一種高效的診斷技術(shù)，幫助臨床制定有效的治療方案。

目前，臨床常用微生物檢驗(yàn)方法診斷肺部曲霉菌感染，本研究對常用方法進(jìn)行比較分析，結(jié)果顯示G試驗(yàn)的陽性檢出率為88.31%，痰培養(yǎng)的陽性檢出率為75.32%，GM試驗(yàn)的陽性檢出率為97.40%，不同檢驗(yàn)方法所得結(jié)果比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。

既往臨床常用痰培養(yǎng)方法對肺部曲霉菌感染患者進(jìn)行診斷，對采集的痰液進(jìn)行細(xì)菌微生物培養(yǎng)，可從中分離獲得病原菌，作為初步診斷依據(jù)［9］。但痰培養(yǎng)的陽性檢出率較低，有待進(jìn)一步對操作進(jìn)行優(yōu)化，提高檢出率［10］。G試驗(yàn)屬于真菌檢測試驗(yàn)，在現(xiàn)代臨床中得到廣泛的應(yīng)用，可檢驗(yàn)真菌的細(xì)胞壁成分，進(jìn)而判定曲霉菌陽性，在早期診斷深部真菌感染中，G試驗(yàn)備受青睞［11］。GM試驗(yàn)操作期間主要檢測半乳甘露聚糖，不僅可以良好地反映出患者肺部實(shí)際感染狀況，而且還能在臨床治療中多次進(jìn)行檢驗(yàn)操作，具有良好的可重復(fù)性；GM試驗(yàn)結(jié)果有助于醫(yī)務(wù)工作者掌握患者實(shí)際病情發(fā)展?fàn)顩r，從而為后期治療方案的調(diào)整提供可靠的參考依據(jù)［12］。李美麗［13］研究中觀察分析了162例肺部曲霉菌患者的微生物檢驗(yàn)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)GM試驗(yàn)對侵襲型肺部曲霉菌感染的檢出率為77.05%，對寄生型肺部曲霉菌感染的檢出率為75.25%；G試驗(yàn)對侵襲型肺部曲霉菌感染的檢出率為63.93%，對寄生型肺部曲霉菌感染的檢出率為58.42%；痰培養(yǎng)對侵襲型肺部曲霉菌感染的檢出率為31.15%，對寄生型肺部曲霉菌感染的檢出率為44.55%。以上與本研究結(jié)果相符，因此認(rèn)為GM試驗(yàn)準(zhǔn)確度較G試驗(yàn)、痰培養(yǎng)更高。侯振鋼［14］對照觀察了57例侵襲型肺部曲霉菌感染患者的微生物檢驗(yàn)結(jié)果，顯示GM試驗(yàn)檢出18例陽性，陽性檢出率為31.58%，與臨床診斷高度一致。為進(jìn)一步提高陽性檢出率，臨床可以同時進(jìn)行多種微生物檢測，確?；颊咧委煼桨父涌茖W(xué)、合理。

綜上所述，在肺部曲霉菌感染患者中，GM試驗(yàn)的陽性檢出率較G試驗(yàn)、痰培養(yǎng)更高，有助于指導(dǎo)臨床及時診斷并給予有效治療，值得推廣借鑒。

利益沖突作者聲明不存在利益沖突