王安然 史軍營(yíng) 胡璋健 王 嬌 喻景權(quán) 師 愷

（浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江杭州 310058）

番茄（Solanum lycopersiumL.）是我國(guó)重要的蔬菜作物，適宜生長(zhǎng)溫度是20～25 ℃（王桂蓮和王佩圣，2019），但在栽培過程中由于季節(jié)、氣候或設(shè)施封閉覆蓋，常會(huì)遭遇28～35 ℃的亞高溫環(huán)境，不僅會(huì)抑制葉、花、果實(shí)等器官的生長(zhǎng)發(fā)育（趙玉萍 等，2010），還會(huì)影響番茄對(duì)病原菌的抗性，嚴(yán)重影響番茄的安全生產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)效益（Hwang et al.，2000；Velásquez et al.，2018）。

番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病在我國(guó)南北方的番茄栽培中均有發(fā)生，嚴(yán)重時(shí)發(fā)病率可達(dá)80%以上；其病原菌丁香假單胞菌番茄致病變種（Pseudomonas syringaepv.tomato，Pst）主要為害番茄葉片，也為害莖和果實(shí)（宋加偉 等，2016）。Pst菌株P(guān)stDC3000 在2003 年完成基因組解析后，常作為模式病原菌廣泛應(yīng)用于植物抗病性和細(xì)菌致病機(jī)制的研究（Buell et al.，2003）。

通過對(duì)植物與PstDC3000 互作系統(tǒng)的研究發(fā)現(xiàn)，植物防御病原菌主要通過兩條抗病途徑：一是依賴于植物細(xì)胞膜表面的模式識(shí)別受體（pattern recognition receptors，PRRs）感知病原相關(guān)分子模式（pathogen-associated molecular patterns，PAMPs）后激發(fā)模式觸發(fā)的免疫（PAMPstriggered immunity，PTI），如番茄和擬南芥的FLS2（flagellin-sensing 2）蛋白可通過對(duì)細(xì)菌鞭毛蛋白22 個(gè)保守基序flg22 的識(shí)別，誘發(fā)下游抗病響應(yīng)（Tsuda et al.，2008）；二是由植物細(xì)胞內(nèi)R 蛋白（resistance protein）專一識(shí)別病原菌效應(yīng)因子后誘發(fā)效應(yīng)蛋白觸發(fā)的免疫（effector-triggered immunity，ETI），如番茄R 蛋白Pto 特異識(shí)別PstDC3000 效應(yīng)蛋白AvrPto 和AvrPtoB，激發(fā)下游強(qiáng)烈的防御信號(hào)，顯著提高對(duì)細(xì)菌性斑點(diǎn)病病原菌的抗性（Oh &Martin，2011；Peng et al.，2018）。上述兩條抗病途徑都可引起下游活性氧（reactive oxygen species，ROS）爆發(fā)，水楊酸（salicylic acid，SA）積累，防御基因誘導(dǎo)表達(dá)等一系列抗性響應(yīng)（Peng et al.，2018）。

植物PTI 和ETI 均會(huì)受到亞高溫的影響，但前人的研究結(jié)果不盡相同。例如，擬南芥的PTI 在28 ℃亞高溫中會(huì)受到抑制，對(duì)PstDC3000 的抗性顯著下降（Wang et al.，2009）；但Cheng 等（2013）的研究則發(fā)現(xiàn)擬南芥中PTI 相關(guān)基因FRK1（flg22-induced receptor-like kinase 1）和WRKY29轉(zhuǎn)錄因子基因的表達(dá)及相關(guān)蛋白MAPK（mitogen-activated protein kinase）和BIK1（botrytis-induced kinase 1）的激活在28 ℃亞高溫時(shí)顯著增強(qiáng)。擬南芥中識(shí)別PstDC3000 效應(yīng)因子的R 蛋白R(shí)PS2 和RPM1 的表達(dá)量并不受亞高溫的影響，但二者介導(dǎo)的ETI 信號(hào)途徑卻受到亞高溫的抑制（Cheng et al.，2013）；在番茄作物中已發(fā)現(xiàn)含有抗葉霉病病原菌的Cf-4、Cf-9和抗南方根結(jié)線蟲的Mi-1等R 基因（resistance gene，R gene）的抗性種質(zhì)會(huì)分別在高于33 ℃和28 ℃的亞高溫環(huán)境中出現(xiàn)抗性衰退乃至喪失的現(xiàn)象（de Jong et al.，2002；Hu et al.，2015）。但PstDC3000 引起的番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病是否會(huì)受到亞高溫的影響還并不清楚，亞高溫對(duì)番茄PTI 和Pto基因介導(dǎo)的ETI 的影響及其機(jī)制亦缺乏研究。

本試驗(yàn)以含有Pto基因的抗PstDC3000 的番茄LA3472 和其背景基因型Moneymaker 為材料，研究亞高溫對(duì)番茄PTI 和Pto基因介導(dǎo)的ETI 兩種抗病途徑的影響；通過2 份番茄材料內(nèi)源SA 含量及SA 生物合成與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因表達(dá)量的變化，探究亞高溫影響番茄抗病性的內(nèi)在機(jī)制，以期為亞高溫下番茄病害防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及亞高溫處理

試驗(yàn)于2018——2020 年在浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院蔬菜研究所溫室和實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。供試番茄來源于Tomato Genetics Resource Center，為含有Pto基因的抗性基因型LA3472 和其背景基因型Moneymaker（編號(hào)為L(zhǎng)A2706）。浸種后，將番茄播種在含有基質(zhì)（草炭、蛭石和珍珠巖體積比為6∶3∶1）的營(yíng)養(yǎng)缽（直徑10 cm）中，其生長(zhǎng)條件為：晝夜溫度24 ℃/21 ℃，相對(duì)濕度70%～80%，光周期12 h/12 h，平均光強(qiáng)600 μmol·m-2·s-1。

待番茄長(zhǎng)至五葉一心時(shí)，對(duì)大小、長(zhǎng)勢(shì)一致的植株進(jìn)行亞高溫處理，晝夜溫度為30 ℃/27 ℃，以晝夜溫度24 ℃/21 ℃的常溫為對(duì)照。其他條件與處理前保持一致，即：相對(duì)濕度70%～80%，光周期12 h/12 h，平均光強(qiáng)600 μmol·m-2·s-1。每個(gè)處理10 株，3 次重復(fù)。

1.2 病原菌培養(yǎng)及接種

PstDC3000 菌種由浙江大學(xué)宋鳳鳴教授實(shí)驗(yàn)室惠贈(zèng)，參照Z(yǔ)hang 等（2015）的方法保存和培養(yǎng)。對(duì)亞高溫及常溫處理24 h 后的植株接種PstDC3000：菌株在King’s B（KB）固體培養(yǎng)基上進(jìn)行活化培養(yǎng)后，用10 mmol·L-1MgCl2調(diào)節(jié)菌液至OD600≈ 0.01，并加入有機(jī)硅至0.03%起展?jié)B作用，均勻噴施于處理植株每片復(fù)葉背面，不接種病原菌的對(duì)照（Mock）組以相同方式噴施10 mmol·L-1MgCl2；每個(gè)處理10 株，3 次重復(fù)。接種后的植株分別置于常溫（24 ℃/21 ℃）和亞高溫（30 ℃/27℃）環(huán)境下繼續(xù)培養(yǎng)；其他條件設(shè)置為：光周期12 h/12 h，平均光強(qiáng)600 μmol·m-2·s-1，相對(duì)濕度90%。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目與方法

1.3.1 病原菌體外培養(yǎng)生長(zhǎng)曲線的繪制 為探究不同溫度處理對(duì)PstDC3000 自身增殖的影響，將500 μL 相同濃度（OD600≈ 1.0）的PstDC3000 菌液加入50 mL KB 液體培養(yǎng)基中，置于試驗(yàn)材料處理溫度（24 ℃和30 ℃）的搖床（200 r·min-1）上進(jìn)行培養(yǎng)，測(cè)定不同培養(yǎng)時(shí)間后菌液OD600的變化，繪制生長(zhǎng)曲線。每個(gè)溫度下4 瓶菌液，3 次重復(fù)。

1.3.2 葉片菌落數(shù)（colony-forming units，CFU）測(cè)定 病原菌接種60 h 后，在不同處理植株的從下往上充分展開的第3 或第4 片功能葉上隨機(jī)打取6 個(gè)直徑為9 mm 的葉圓片，將葉圓片在70%酒精中浸泡10 s，用無(wú)菌水沖洗2 遍，參照Wolfe 等（2000）的方法處理并計(jì)算葉片單位面積上的菌落數(shù)。每個(gè)處理3 株，3 次重復(fù)。

1.3.3 病情指數(shù)（disease index，DI）統(tǒng)計(jì) 病原菌接種84 h 后，參考楊子祥等（2014）的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)處理葉片發(fā)病情況，調(diào)查植株從下往上充分展開的第3、4、5 片功能葉的所有小葉，每個(gè)處理調(diào)查5 株，3 次重復(fù)。每片小葉按發(fā)病癥狀輕重程度分為5 個(gè)等級(jí)，分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為：0 級(jí)，葉片正常無(wú)病斑；Ⅰ級(jí)，葉片下表皮可見少數(shù)病斑；Ⅱ級(jí)，葉片下表皮局部有密集病斑；Ⅲ級(jí)，葉片下表皮多部位有密集病斑，但未散布整片葉；Ⅳ級(jí)，葉片下表皮全片葉可見病斑分布。計(jì)算單株病情指數(shù)。

DI=∑（各級(jí)病葉數(shù)×相應(yīng)級(jí)數(shù)）/（調(diào)查總?cè)~數(shù)×最高級(jí)數(shù)）× 100

1.3.4 葉綠素?zé)晒獬上窦皽y(cè)定 病原菌接種84 h后，將處理植株暗適應(yīng)0.5 h，選取不同處理植株的從下往上充分展開的第3 或第4 片功能葉，用IMAGING-PAM 調(diào)制葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)（Heinz-Wal，德國(guó)），參照Genty 等（1989）的方法測(cè)定被處理葉片的光系統(tǒng)Ⅱ（Photosystem Ⅱ，PS Ⅱ）實(shí)際光化學(xué)效率ΦPSⅡ。每處理3 株，3 次重復(fù)。

1.3.5 SA 含量測(cè)定 病原菌接種24 h 后，參考Zhang 等（2018）的方法測(cè)定葉片SA 含量。取0.1 g 從下往上充分展開的第3 或第4 片功能葉片凍樣充分研磨，用2 mL 內(nèi)參標(biāo)樣D4-SA（OlChemIm，捷克）終濃度為100 ng·mL-1的乙酸乙酯溶解，經(jīng)氮?dú)獯蹈珊?，?00 μL 70%甲醇復(fù)溶并離心，參照王峰（2017）的方法，使用安捷倫1290 高效液相色譜系統(tǒng)及安捷倫6460 三級(jí)串聯(lián)桿質(zhì)譜儀（Agilent Technologies，德國(guó)）對(duì)上清液進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)定葉片中SA 含量。每個(gè)處理3 株，3 次重復(fù)。

1.3.6 葉片總RNA 提取及qRT-PCR 分析 病原菌接種24 h 后，使用RNA 提取試劑盒（天根生化科技有限公司，中國(guó)）提取50～100 mg 從下往上充分展開的第3 或第4 片功能葉片總RNA，使用Fermentas RevertAid first Strand cDNA Synthesis kit反轉(zhuǎn)錄成cDNA。qRT-PCR 以番茄肌動(dòng)蛋白Actin為內(nèi)參基因，測(cè)定SA 生物合成基因PALs 與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因NPR1的相對(duì)表達(dá)量，使用iCycler iQ Multicolor 實(shí)時(shí)定量PCR 檢測(cè)系統(tǒng)儀器（Bio-Rad，美國(guó)），參照說明書進(jìn)行操作。根據(jù)SGN 上的番茄基因序列設(shè)計(jì)引物（表1），數(shù)據(jù)采用2-??CT法進(jìn)行分析（Livak &Schmittgen，2001）。每個(gè)處理3 株，3 次重復(fù)。

表1 qRT-PCR 分析所用引物

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SAS 8.0 軟件對(duì)各處理進(jìn)行在5%水平上（Tukey 法）的差異顯著性分析，運(yùn)用OriginPro 2019b 進(jìn)行圖形繪制。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度對(duì)Pst DC3000 體外生長(zhǎng)的影響

為了探究不同溫度對(duì)PstDC3000 自身生長(zhǎng)的影響，將相同濃度的PstDC3000（OD600≈ 0.01）分別置于24 ℃常溫和30 ℃亞高溫的搖床上進(jìn)行培養(yǎng)，測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)的菌液濃度，繪制生長(zhǎng)曲線（圖1）。結(jié)果表明，2 種溫度下PstDC3000 的增殖速度并無(wú)顯著差異，說明體外培養(yǎng)時(shí)，與24 ℃常溫相比，30 ℃亞高溫對(duì)PstDC3000 的生長(zhǎng)并無(wú)顯著影響。

圖1 溫度對(duì)Pst DC3000 體外生長(zhǎng)的影響

2.2 亞高溫對(duì)番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病發(fā)生的影響

如圖2-A、2-B、2-C 所示，相比于常溫，亞高溫下Moneymaker 和LA3472 葉片感病表型均更加嚴(yán)重，葉片菌落數(shù)均顯著增多，病情指數(shù)均顯著增加。

植物葉片光系統(tǒng)Ⅱ（PSⅡ）對(duì)各種逆境脅迫的響應(yīng)較為敏感，故PSⅡ的實(shí)際光化學(xué)效率ΦPSⅡ可以作為衡量葉片受脅迫程度的重要指標(biāo)（岑海燕等，2018）。如圖2-D、2-E 所示，在未進(jìn)行病原菌接種的Mock 條件下，亞高溫處理對(duì)Moneymaker和LA3472 番茄葉片ΦPSⅡ的影響并不顯著；但在接種PstDC3000 后，Moneymaker 的ΦPSⅡ在常溫下和亞高溫下分別降低了0.145 和0.197，即亞高溫使Moneymaker 接種后的受脅迫程度比常溫下加重了36%；LA3472 在接種病原菌后，常溫處理的ΦPSⅡ僅降低了0.065，而亞高溫處理的ΦPSⅡ則降低了0.124，即亞高溫使LA3472 接種后的受脅迫程度比常溫下加重了91%。上述試驗(yàn)結(jié)果表明，單獨(dú)的亞高溫處理不會(huì)對(duì)Moneymaker 和LA3472 葉片造成脅迫，但亞高溫處理會(huì)加重PstDC3000 造成的生物脅迫，即亞高溫增加了抗性不同的2 份番茄材料對(duì)PstDC3000 的敏感性，且對(duì)LA3472 的抗病性的抑制更為明顯。

圖2 亞高溫對(duì)番茄接種Pst DC3000 后葉片表型（A）、葉片菌落數(shù)（B）、病情指數(shù)（C）和ΦPSⅡ（D、E）的影響

2.3 亞高溫對(duì)番茄接種Pst DC3000 后SA 含量及合成基因PALs 表達(dá)量的影響

植物響應(yīng)病原菌后會(huì)誘導(dǎo)SA 合成關(guān)鍵酶苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonialyase，PAL）編碼基因上調(diào)表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)SA 的生物合成和積累（Kim &Hwang，2014）；SA 則通過綁定NPR1（nonexpresser of PR genes 1）蛋白進(jìn)入細(xì)胞核中，激活下游病程相關(guān)基因（pathogenesis-related genes，PR genes）的表達(dá)（Mou et al.，2003）。為探究亞高溫是否影響不同抗病路徑中的SA 信號(hào)途徑，首先對(duì)番茄PTI 和ETI 響應(yīng)中SA 含量及其合成基因PALs 的表達(dá)量進(jìn)行測(cè)定。

接種PstDC3000 后，常溫下Moneymaker 和LA3472 葉片中的SA 含量均顯著上升，亞高溫環(huán)境下雖然SA 含量也有一定程度的上升，但亞高溫顯著抑制了SA 在2 份番茄材料中的積累，Moneymaker 和LA3472 葉片的SA 含量分別比常溫對(duì)照下降了50%和58%（圖3）。

圖3 亞高溫下番茄接種Pst DC3000 24 h 后SA 含量

qRT-PCR 結(jié)果表明，接種PstDC3000 后，接種后Moneymaker 的PALs 基因顯著上調(diào)，但在亞高溫下的上調(diào)幅度低于常溫；LA3472 的PALs 基因在常溫下受PstDC3000 誘導(dǎo)后的表達(dá)也均顯著增加，但在亞高溫下，除PAL10在接種病原菌后顯著上調(diào)外，PAL4、PAL6、PAL8、PAL9和PAL11在接種后的表達(dá)與Mock 條件下無(wú)顯著差異（圖4）。這與SA 含量的變化趨勢(shì)一致。說明在2 份番茄材料中PstDC3000 誘導(dǎo)的SA 積累和合成基因PALs 的表達(dá)在亞高溫下均受到了抑制。

圖4 亞高溫下番茄接種Pst DC3000 24 h 后PALs 的基因表達(dá)量

2.4 亞高溫對(duì)番茄接種Pst DC3000 后SA 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因NPR1 表達(dá)量的影響

在亞高溫和常溫下接種PstDC3000 后，Moneymaker 和LA3472 中SA 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因NPR1的表達(dá)情況與SA 含量和PALs 基因表達(dá)的變化趨勢(shì)相似（圖5）。Moneymaker 和LA3472 中NPR1的表達(dá)量在接種PstDC3000 后均顯著增加，但在亞高溫下表達(dá)量均顯著低于常溫，說明2 份材料中NPR1的表達(dá)也都受到了亞高溫的抑制。

圖5 亞高溫下番茄接種Pst DC3000 24 h 后NPR1 的基因表達(dá)量

3 討論與結(jié)論

病原物、寄主植物和環(huán)境條件構(gòu)成了植物“病害三角”，溫度是影響病原菌致病力與植物抗病性的重要環(huán)境因子。研究表明，番茄的適宜生長(zhǎng)溫度為20～25 ℃（王桂蓮和王佩圣，2019），而PstDC3000 病原菌的適宜生長(zhǎng)溫度為24～30 ℃（楊春泉，2008）。因此本試驗(yàn)選取了24 ℃和30 ℃兩個(gè)環(huán)境溫度為代表，用以研究亞高溫環(huán)境下番茄對(duì)細(xì)菌性斑點(diǎn)病病原菌的抗性變化及其內(nèi)在機(jī)制。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與24 ℃常溫相比，30 ℃亞高溫對(duì)PstDC3000 在培養(yǎng)基中的自身增殖速度沒有明顯影響，但會(huì)使2 份番茄材料葉片內(nèi)PstDC3000 的菌量均顯著增加，這與前人在擬南芥中的研究結(jié)果一致（Huot et al.，2017）。說明亞高溫可能通過調(diào)控番茄的抗病性導(dǎo)致細(xì)菌性斑點(diǎn)病的發(fā)生或加重，而和病原菌本身的生長(zhǎng)特性無(wú)關(guān)。

前人研究表明，亞高溫對(duì)植物抗病性的影響體現(xiàn)在對(duì)PTI 和ETI 的復(fù)雜調(diào)控。本試驗(yàn)中，高感番茄Moneymaker 和高抗番茄LA3472 在亞高溫下均表現(xiàn)出更嚴(yán)重的發(fā)病程度，葉片受脅迫程度均比常溫下加重，說明番茄的PTI 和Pto基因介導(dǎo)的ETI都受到了亞高溫的抑制。該結(jié)果與Wang 等（2009）對(duì)擬南芥基礎(chǔ)免疫的研究結(jié)果相一致，可能與亞高溫下抗病信號(hào)傳遞和抗性相關(guān)基因表達(dá)發(fā)生改變有關(guān)。Janda 等（2019）發(fā)現(xiàn)高于28 ℃的亞高溫處理會(huì)抑制擬南芥中受flg22 誘導(dǎo)的ROS 爆發(fā)，且抑制效果隨處理時(shí)間的延長(zhǎng)和溫度的升高而增強(qiáng)，并認(rèn)為這可能與亞高溫處理后FLS2的轉(zhuǎn)錄受抑制和細(xì)胞膜上FLS2 蛋白含量的減少有關(guān)。然而，Cheng等（2013）卻發(fā)現(xiàn)28 ℃亞高溫處理會(huì)增強(qiáng)擬南芥PTI 相關(guān)蛋白BIK1 的磷酸化，且PTI 標(biāo)記基因WRKY29和FRK1受flg22 的誘導(dǎo)表達(dá)在28 ℃亞高溫時(shí)最為顯著。因此，亞高溫對(duì)PTI 的影響還需要在更多的植物-病原互作系統(tǒng)中深入研究。而亞高溫對(duì)ETI 的影響會(huì)因R 基因種類和病原菌特性而異（Velásquez et al.，2018）。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)亞高溫降低了番茄Pto基因介導(dǎo)的其對(duì)PstDC3000 的抗性，與前人在番茄與其他病原系統(tǒng)互作的報(bào)道相一致。例如：Cf-4、Cf-9等R 基因介導(dǎo)的番茄對(duì)葉霉病病原菌的抗性在33 ℃亞高溫下會(huì)受到較大程度的抑制，與質(zhì)膜上識(shí)別病原菌效應(yīng)因子Avr9 的高親和性結(jié)合位點(diǎn)減少有關(guān)（de Jong et al.，2002）；抗南方根結(jié)線蟲的Mi-1基因在高于28 ℃的亞高溫環(huán)境中不表達(dá)或延遲表達(dá)（王銀磊 等，2014；Hu et al.，2015），其介導(dǎo)的對(duì)根結(jié)線蟲的抗性也完全喪失（Hwang et al.，2000）；具有抗番茄黃化曲葉病毒基因Ty-1/Ty-3的番茄品種9706TR 在25～33℃亞高溫環(huán)境中的病毒積累量比在20～23 ℃常溫環(huán)境中顯著增加（李佳蔚 等，2016）。

SA 在植物PTI 和ETI 響應(yīng)中均有重要的作用（Vlot et al.，2009），且其介導(dǎo)的抗病信號(hào)途徑受到溫度、光照、濕度、CO2濃度等環(huán)境因素的調(diào)控（Zhou et al.，2004；Hua，2013；Zhang et al.，2015）。例如高濃度CO2可促進(jìn)SA 的合成和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，增加番茄對(duì)PstDC3000 和煙草花葉病毒的抗性（Zhang et al.，2015）；16 ℃亞低溫可通過增強(qiáng)擬南芥SA 合成與信號(hào)途徑，提高其對(duì)PstDC3000 的抗性（Li et al.，2020）。而在擬南芥和煙草中都發(fā)現(xiàn)SA 合成相關(guān)基因EDS1（enhanced disease susceptibility 1）和信號(hào)途徑標(biāo)記基因PR1會(huì)受亞高溫影響而呈現(xiàn)較弱的病原誘導(dǎo)表達(dá)水平，且30 ℃的亞高溫處理會(huì)使擬南芥中SA 的積累與信號(hào)傳遞受阻，降低其對(duì)PstDC3000 的基礎(chǔ)抗性（Zhao et al.，2016；Huot et al.，2017）。在 番 茄抗葉霉病病原菌的Cf-4、Cf-9基因介導(dǎo)的ETI 響應(yīng)中，SA 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因NPR1的表達(dá)在33 ℃亞高溫下也會(huì)受到抑制（de Jong et al.，2002）。本試驗(yàn)中Moneymaker 與LA3472 的SA 含量對(duì)PstDC3000 的響應(yīng)均受到亞高溫的抑制，PALs 基因在亞高溫下的表達(dá)量也顯著低于常溫對(duì)照，而PAL 在辣椒和煙草等茄科植物受病原菌誘導(dǎo)的SA合成與積累中起著重要作用（Chen et al.，2009；Seyfferth &Tsuda，2014）。2 份番茄材料中SA 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因NPR1在病原誘導(dǎo)下的表達(dá)也均受到亞高溫的抑制。這些結(jié)果與在擬南芥、煙草的基礎(chǔ)免疫和番茄Cf基因介導(dǎo)的ETI 中SA 含量變化及相關(guān)基因的表達(dá)趨勢(shì)一致，說明SA 參與亞高溫對(duì)番茄PTI 和Pto基因介導(dǎo)的ETI 的調(diào)控，推測(cè)SA 的合成與信號(hào)傳遞受抑制是番茄抗病性在亞高溫下降低的原因。

綜上，亞高溫下番茄PTI 和ETI 均被削弱，2份番茄材料對(duì)細(xì)菌性斑點(diǎn)病的敏感性都顯著增加；亞高溫抑制PTI 和ETI 中SA 的合成及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，可能是抗性不同的番茄對(duì)PstDC3000 的敏感性均增加的原因。而SA 是否參與亞高溫對(duì)番茄其他R 基因介導(dǎo)的ETI 的調(diào)控還有待探究，不受亞高溫影響的抗病途徑也值得挖掘。因此，在實(shí)際生產(chǎn)中，一方面要利用農(nóng)藝措施盡量避免作物栽培中出現(xiàn)誘發(fā)或加重病害的亞高溫環(huán)境，另一方面也可結(jié)合化學(xué)、生物手段防控亞高溫環(huán)境下番茄病害的發(fā)生。