吳新花

（廣西南寧上林縣婦幼保健院，廣西 南寧，530500）

丙型肝炎是由于感染丙型肝炎病毒（HCV）導致的典型全球性傳染性疾病，HCV的傳播途徑比較多，主要有血液傳播、母嬰傳播、性接觸傳播、家庭內傳播等，但是至今對于準確的傳播途徑仍然未能十分明確，表明HCV的傳播還有很多隱性或者綜合的途徑[1]。當前臨床還未研制出有效的丙型肝炎疫苗。因此需要探尋靈敏、準確的HCV檢驗技術，早期發(fā)現(xiàn)HCV感染者，避免造成廣泛傳播[2-3]。基于此，本文對丙型肝炎臨床檢驗技術現(xiàn)狀及研究進展展開綜述，內容如下。

1 抗-HCV檢驗技術

抗-HCV檢驗技術是出現(xiàn)最早，研究和應用時間最久的HCV檢測技術。HCV感染者的外周血中HCV的含量和病毒抗原含量均比較低，用一般的檢測方式很難檢出，該種檢測方式是臨床經(jīng)過十幾年的改進最終得到的有效檢驗方式，并經(jīng)過臨床不斷演變得出雙抗原加薪、蛋白芯片檢測法、酶聯(lián)免疫吸附試驗、充足免疫印跡法、免疫層析法、蛋白芯片檢測法、間接酶聯(lián)免疫吸附試驗等多種可靠實用的方法，其中酶聯(lián)免疫吸附試驗因其具有成本低、操作簡單、檢測結果滿意等優(yōu)點被認為是當前臨床最實用和應用最廣的抗-HCV檢驗技術[4-5]?？?HCV檢驗技術能夠依照其所用的抗原時間和類型先后分成三代，第一代應用病毒基因組非結構區(qū)獲取IgG試劑盒所需的抗原，能夠很大程度降低HCV的輸血感染率，但是使用后存在假陽性率高、抗體檢出時間長、靈敏度比較低等不足；第二代試劑包含C100抗原、HCV核心區(qū)多肽5C22-3、非結構區(qū)抗原C33C、抗-C33C、抗-C22-3感染之后檢驗得出敏感性和特異性均比較好，通常在HCV感染之后的8-12周能夠檢測發(fā)現(xiàn)；第三代HCV抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑中有重組NSS多肽成分存在，能夠在一定程度上降低核心區(qū)抗原的比例，同時也能夠提升非結構區(qū)NSS區(qū)C33C抗原占比數(shù)據(jù)，添加NSS區(qū)抗原、敏感性和特異性均更優(yōu)[6-7]。

2 HCV抗原檢測技術

目前HCV抗原檢驗技術的不斷更新和應用，有研究認為單克隆抗體、抗原抗體復合物解離劑是改良HCV抗原檢驗技術的關鍵。近年來，國外有一些研究嘗試推出定性、定量法相關的雙抗體夾心法對血清標本中總HCV或游離HCV核心抗原酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒[8]。以上新型的檢驗技術與RT-PCR技術相比，進一步對操作進行簡化、縮短檢驗用時、增腔環(huán)境適應性，同時也能夠進一步控制假陽性率，特別適用于急性HCV的診斷、HCV血清學轉換前期的抗-HCV陽性感染病毒血癥分析、HCV感染者在就醫(yī)過程中的病毒血癥的跟蹤觀察等，HCV核心抗原存在的時間僅僅只有27-70天，因此延長的難度比較大，同時HCV核心抗原的檢測仍然不能夠脫離抗-HCV檢驗而單獨進行[9-10]。HCV核心抗原檢測的結果受到HCV核心區(qū)基因變異的影響，因此HCV抗原檢測的敏感度也是動態(tài)變化的[11]?；诖耍胍牧籍斍巴茝V的試劑盒，便要著重提升單克隆抗體的天然抗原構象表位親和力。

3 HCV-RNA核酸擴增檢測技術

HCV-RNA核酸擴增檢測技術當前在臨床主要用于HCV感染途徑確定之后使用，在外周血中即可檢出HCV RNA，在HCV感染發(fā)生的14天內便能夠檢測到HCV RNA，同時在感染恢復之前血清各物質水平又會再次達到新的高峰[12]。體內HCV RNA的水平會隨著飲食的變化而發(fā)生變化，當攝入的食物中脂肪、蛋白含量比較高時，HCV RNA會因與脂質、脂蛋白相結合而使得檢出的水平遠遠比日常水平更低，這是引起檢驗結果不準確的主要原因之一[13]。另外HCV-RNA核酸擴增檢測技術還需要應用高標準的設備進行支持和經(jīng)驗豐富的操作人員操作，并且這種檢驗技術的操作比較繁瑣、檢驗用時長，因此在臨床的可行性不太高，很難大范圍的使用[14-15]。HCV-RNA核酸擴增檢測技術會因不同廠商的研發(fā)，設備和方法也都各不相同，PCR的臨床應用更廣，檢驗效果也得到認可，尤其是以套式PCR技術最佳，當前臨床應用最多，檢驗效果最好的是熒光定量PCR技術，該種檢驗技術的靈敏度比較高，并且檢測是自動定量，因此使用比較方便[16]。

4 同時檢測HCV核心抗原和抗-HCV技術

抗原抗體聯(lián)合檢驗技術是目前臨床專家經(jīng)過大量實踐分析出的HCV篩查試劑盒和血清學聯(lián)合檢驗的新技術，當前比較成熟的是外周蛋白抗體以及部分核心抗體和HCV核心抗原相結合的檢測試劑盒[17]。HCV核心抗原是HCV感染者體內出現(xiàn)的早期感染指標，差不多與HCV RNA同時出現(xiàn)，表明核心抗原和HCV RNA的動力學變化緊密相關[18]。HCV核心抗原檢測主要是依據(jù)雙抗體夾心法定性檢測或血清樣品HCV核心抗原水平定量檢測，這種檢驗技術大多數(shù)情況下不會因樣品內含有抗-HCV而出現(xiàn)檢驗準確度不高的情況，檢驗結果比較靈敏和準確，該種檢驗技術也能夠用于HCV的早期急性HCv的臨床診斷中[19]。相信在不久的將來，市場上會不斷出現(xiàn)各種聯(lián)合檢驗技術，通過兩步檢驗輕松實現(xiàn)早期篩查、診斷和輔助治療的目的，但是如何進一步縮短檢驗用時還是日后研究的方向。

5 結語

綜上所述，HCV檢驗技術目前主要包括抗-HCV檢驗技術、HCV抗原檢測技術、HCV-RNA核酸擴增檢測技術、HCV核心抗原和抗-HCV聯(lián)合檢驗技術四種，各有其優(yōu)缺點，并且每種檢驗技術都在不斷的改良中。對于HCV檢驗來說，需要在檢驗過程中具體依照患者身體出現(xiàn)的各種病變指標，將實際情況作為基礎來展開相關檢驗工作，能夠更符合臨床實際需求，也能達到檢驗所需的目的。日后臨床對于HCV的檢驗不僅要研究出更多更新的檢驗技術，還要注意解決檢驗靈敏度低、檢驗用時長、檢驗結果易受影響等問題，使得更好的完成檢驗目的，促進患者早期康復。