劉金喜，張國晴，蔣長生，朱學(xué)泰**

（1．西北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，甘肅 蘭州 730070；2．甘肅連城國家級(jí)自然保護(hù)區(qū)管理局，甘肅 蘭州 730070）

甘肅連城自然保護(hù)區(qū)位于甘肅省的中部，蘭州市的西北部[1]，東經(jīng) 102°26′～102°55′，北緯 36°33′～36°48′[2]，總面積 47 930 km2，地處祁連山山地與黃土高原的過渡地帶，氣候?qū)倨钸B山山地—隴中北部溫帶半干旱區(qū)，降雨少，光熱適中，年平均氣溫7．4℃，年蒸發(fā)量1 542 mm，年均降水量419 mm[3]。其特殊的地理位置和生態(tài)環(huán)境，為大型真菌提供了適宜的生長條件。研究通過對(duì)該保護(hù)區(qū)分布的大型真菌進(jìn)行3年的系統(tǒng)調(diào)查，以此為基礎(chǔ)對(duì)該保護(hù)區(qū)的大型真菌資源進(jìn)行研究和評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 制定采樣計(jì)劃

由于大型真菌子實(shí)體的生長受到溫度、濕度等多種條件的影響，研究結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)資料[4-5]，根據(jù)大型真菌的分布特點(diǎn)，制定采樣計(jì)劃并確定采樣路線。

1.2 標(biāo)本采集

按照采樣計(jì)劃實(shí)施采樣，做好采樣記錄。拍攝清晰的生境照片，制備分子材料，保存完整的子實(shí)體標(biāo)本以備后續(xù)分析鑒定；記錄采集地海拔高度。此外，對(duì)當(dāng)?shù)卮笮驼婢藤Q(mào)情況以及民眾對(duì)野生食用菌的食用情況進(jìn)行調(diào)查并記錄。

1.3 鑒定與分類

1.3.1 形態(tài)學(xué)研究

觀察子實(shí)體大小、菌蓋、菌柄、菌環(huán)、菌托的特征以及菌褶和菌管的疏密、深淺、分叉、顏色、傷變等宏觀形態(tài)；用顯微鏡觀察其孢子、囊狀體、菌髓、子實(shí)層等顯微結(jié)構(gòu)。

1.3.2 分子生物學(xué)鑒定

用CTAB法或真菌DNA提取試劑盒提取標(biāo)本總DNA，對(duì)ITS或nrLSU等片段進(jìn)行擴(kuò)增；PCR產(chǎn)物用1%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測，擴(kuò)增成功的PCR產(chǎn)物送北京奧科鼎盛生物公司進(jìn)行測序，擴(kuò)增失敗的重新進(jìn)行擴(kuò)增或提取總DNA。將所得序列信息在GenBank或Unite數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行同源性比對(duì)，根據(jù)比對(duì)數(shù)據(jù)中同源性最高的物種，以及通過系統(tǒng)發(fā)育樹分析對(duì)該標(biāo)本進(jìn)行物種鑒定。

大型真菌的物種名確定以Index Fungorum[6]全球在線系統(tǒng)最新檢索為準(zhǔn)，食毒性參考《中國食用菌名錄》[7]《中國毒蘑菇名錄》[8]《廣東大型真菌志》[9]《日本新菌類圖鑒Ⅱ》[10]《中國熱帶真菌》[11]《中國經(jīng)濟(jì)真菌》[12]《毒蘑菇識(shí)別與中毒防治》[13]《中國藥用真菌圖鑒》[14]《中國真菌總匯》[15]《中國大型真菌原色圖鑒》[16]《中國大型真菌物資源圖鑒》[17]等文獻(xiàn)[18-20]，并結(jié)合當(dāng)?shù)氐氖常ㄋ帲┯玫恼{(diào)查結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 保護(hù)區(qū)大型真菌資源

經(jīng)過3年的采樣調(diào)查，共采集得到大型真菌標(biāo)本1 600余株，鑒定出大型真菌物種數(shù)284種，隸屬于2門、7綱、17目、66科、142屬，包含有食用菌46種、藥用菌41種以及毒菌29種。

2.2 保護(hù)區(qū)大型真菌科屬種統(tǒng)計(jì)

連城自然保護(hù)區(qū)大型真菌資源科屬種的數(shù)量統(tǒng)計(jì)見表1。

表1 連城自然保護(hù)區(qū)大型真菌資源數(shù)量統(tǒng)計(jì)Tab.1 Statistics of the number of species ofmacrofungal in Liancheng nature reserve

（續(xù)表1）

由表1可知，連城自然保護(hù)區(qū)大型真菌科、屬、種數(shù)量繁多，共列出66科、127屬、246種，另有15屬、38種的科級(jí)分類地位未定，故未列入表中。

2.2.1 優(yōu)勢科

在科的水平上，把物種數(shù)≥10種的科定為優(yōu)勢科[20]，連城自然保護(hù)區(qū)大型真菌優(yōu)勢科統(tǒng)計(jì)見表2。

表2 連城自然保護(hù)區(qū)大型真菌優(yōu)勢科統(tǒng)計(jì)Tab.2 Statistics of dominant families ofmacrofungal in Liancheng nature reserve

由表2所示，優(yōu)勢科共有6個(gè)，包含28屬、87種，占總種數(shù)的30.63%，總屬數(shù)的19.72%，總科數(shù)的9.09%。連城保護(hù)區(qū)的優(yōu)勢科按物種數(shù)多少，依次為蘑菇科20種、小脆柄菇科17種、絲蓋傘科16種、多孔菌科14種、層腹菌科10種和小菇科10種。蘑菇科常見種有雙孢蘑菇（Agaricus bisporus）、大紫蘑 （Agaricus augustus）、野蘑菇 （Agaricus arvensis）等；小脆柄菇科常見種有晶粒小鬼傘（Coprinellus micaceus）、輻毛小鬼傘 （Coprinellus radians）和庭院小鬼傘（Coprinellus xanthothrix）等；絲蓋傘科常見種有斑紋絲蓋傘（Inocybemaculata）、光帽絲蓋傘（Inocybe nitidiuscula）和褐鱗絲蓋傘（Inocybe cervicolor）等；多孔菌科常見種有木蹄層孔菌（Fomes fomentarius）、樹舌靈芝（Ganoderma applanatum）和漏斗多孔菌（Lentinus arcularius）等；層腹菌科常見種有多形盔孢傘（Galerina triscopa）、紋緣盔孢菌（Galerina marginata）和溝條盔孢傘（Galerina vittiformis）等；小菇科常見種有黃緣小菇（Mycena citrinomarginata）、棒柄小菇 （Mycena clavicularis）和盔蓋小菇（Mycena galericulata）等。

2.2.2 優(yōu)勢屬

在屬水平上，將物種數(shù)≥5種定為優(yōu)勢屬[21]。連城自然保護(hù)區(qū)大型真菌優(yōu)勢屬統(tǒng)計(jì)見表3。

表3 連城自然保護(hù)區(qū)大型真菌優(yōu)勢屬統(tǒng)計(jì)Tab.3 Statistics of dominantgenera ofmacrofungi in Liancheng nature reserve

由表3所示，連城保護(hù)區(qū)的優(yōu)勢屬共13個(gè)，占總屬數(shù)的 9．2%；包含有 92個(gè)種，占總種數(shù)的32．4%。物種數(shù)前五的優(yōu)勢屬依次為絲蓋傘屬16種、蘑菇屬9種、杯傘屬8種、白蛋巢菌屬7種、小脆柄菇屬7種。

2.3 保護(hù)區(qū)大型真菌資源評(píng)價(jià)

保護(hù)區(qū)大型真菌資源十分豐富，其資源評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)見圖1。

圖1 連城自然保護(hù)區(qū)大型真菌資源Fig．1 Macrofungal resources in Liancheng nature reserve

由圖1所示，在已鑒定出的284種大型真菌中，包含食用菌46種，占總種數(shù)的16．20%；藥用菌41種，占總種數(shù)的14．44%；食藥兼用菌15種，占總種數(shù)的5．28%；毒菌29種，占總種數(shù)的10．21%；食毒不明種153種，占總種數(shù)的53．87%。

食用菌的分布主要集中在蘑菇科、牛肝菌科、小菇科、口蘑科和香蘑科。保護(hù)區(qū)常見的食用菌有焰耳（Guepinia helvelloides）、粘鉚釘菇（Gomphidius glutinosus）、異色疣柄牛肝菌 （Leccinum versipelle）、絨蓋美柄牛肝菌（Caloboletus panniformis）、絨邊乳菇（Lactarius pubescens）、松乳菇（Lactarius deliciosus）、大紫蘑（Agaricus augustus）、雙孢蘑菇、平田頭菇（Agrocybe pediades）、多脂鱗傘（Pholiota adiposa）、淺黃綠杯傘（Clitocybe odora）、灰色香蘑（Lepista luscina）、紫丁香蘑 （Lepista nuda）、淡色香蘑 （Lepista irina）、花臉香蘑 （Lepista sordida）、斑玉蕈（Hypsizygusmarmoreus）、肺形側(cè)耳（Pleurotus pulmonarius）、裂褶菌 （Schizophyllum commune）、紅鱗口蘑 （Tricholoma vaccinum）和雕紋口蘑（Tricholoma scalpturatum）。

藥用菌主要集中在馬勃科、香蘑科、層孔菌科和鬼傘科。保護(hù)區(qū)常見的藥用菌有褐環(huán)乳牛肝菌（Suillus luteus）、灰乳牛肝菌 （Suillus viscidus）、黑毛地星（Geastrum melanocephalum）、針擬木層孔菌（Phellinopsis conchata）、木蹄層孔菌（Fomes fomentarius）、樹舌靈芝（Ganoderma applanatum）、變形多孔菌（Polyporusvarius）、毛栓孔菌（Trameteshirsuta）、云芝栓孔菌 （Trametes versicolor）、晶粒小鬼傘（Coprinellus micaceus）、輻毛小鬼傘 （Coprinellus radians）、墨汁擬鬼傘 （Coprinopsis atramentaria）、野絲膜菌（Cortinarius torvus）、紫丁香蘑、花臉香蘑、白鱗馬勃（Lycoperdonmammiforme）、盔蓋小菇（Mycena galericulata）和紫蠟?zāi)?（Laccaria laccata）。

毒菌主要集中在絲蓋傘科、環(huán)柄菇科和杯傘科。保護(hù)區(qū)常見的毒菌有窩柄黃乳菇（Lactarius scrobiculatus）、斑紋絲蓋傘（Inocybemaculata Boud）、光帽絲蓋傘（Inocybe nitidiuscula）、裂絲蓋傘（Inocybe rimosa）、黃斑蘑菇 （Agaricus xanthodermus）、灰鱗環(huán)柄菇（Echinoderma asperum）、栗色環(huán)柄菇（Lepiota castanea）、細(xì)環(huán)柄菇（Lepiota clypeolaria）、冠狀環(huán)柄菇（Lepiota cristata）、赭黃裸傘（Gymnopilus penetrans）、煙色垂幕菇 （Hypholoma capnoides）、水粉杯傘（Clitocybe nebularis）、大孢花褶傘（Panaeolus papilionaceus）和金黃褐傘 （Phaeolepiota aurea）。

3 討論與結(jié)論

大型真菌具有非常豐富的營養(yǎng)價(jià)值，其子實(shí)體一般含水量85%～90%、蛋白質(zhì)3%、脂肪0．4%、碳水化合物6%、無機(jī)鹽類1%，是低熱能而美味的食材[22]。此外一些大型真菌，如樹舌靈芝（Ganoderma applanatum）、田頭菇（Agrocybe vervacti）和蜜環(huán)菌（Armillaria mellea）等，具有一定治療和預(yù)防疾病的效果，如降低膽固醇，降血脂，提高機(jī)體免疫力，預(yù)防高血壓、糖尿病、阿爾茲海默病以及抗腫瘤等。因此作為“健康食品”“菌物藥”而備受人們的青睞，被稱為“植物性食品的巔峰”[23-24]。

連城自然保護(hù)區(qū)分布的大型真菌物種豐富，但有大量的物種（53．87%）食毒性不明，嚴(yán)重影響了物種資源的開發(fā)和利用，需要進(jìn)一步加強(qiáng)研究。

大型真菌食毒性的判斷需要格外謹(jǐn)慎，在對(duì)物種進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定的基礎(chǔ)上，調(diào)查了解當(dāng)?shù)鼐用駥?duì)大型真菌的利用情況是對(duì)其食毒性進(jìn)行評(píng)價(jià)的有效途徑。以四川紅菇（Russula sichuanensis）為例，該種由李國杰等[25]于2013年發(fā)表，但其食毒性并不明確。在本研究中，對(duì)該物種子實(shí)體的氣味、味道和口感進(jìn)行了詳細(xì)的記錄，但仍無法判斷其食毒性。后通過調(diào)查訪談，了解到連城當(dāng)?shù)氐?位居民曾分別采食過該物種，由于該物種的形態(tài)特征較為獨(dú)特，不易與其它物種混淆，因而最終判斷四川紅菇為可食用。因此，對(duì)當(dāng)前食毒性不明的物種，為了能盡快厘清其價(jià)值，運(yùn)用文獻(xiàn)調(diào)查和調(diào)查訪談相結(jié)合的方法是較有效的途徑。