黎裕元 蔡葵 魏亞明 吳敏華 朱琳睿 陽雪新

Duffy抗原是位于細(xì)胞膜表面的糖蛋白，其相對(duì)分子質(zhì)量為35 000～50 000，是一種趨化因子受體[1]，基因位于1號(hào)染色體上，該血型系統(tǒng)主要包含F(xiàn)ya、Fyb、Fy3、Fy4、Fy5、Fy6，這6種抗原。在人群中產(chǎn)生的表現(xiàn)型主要有Fy（a+b+）、Fy（a+b-）、Fy（a-b+）、Fy（a-b-），在我國(guó)Fya屬于高頻抗原，因此Fya（a-b+）屬于稀有血型。抗-Fya大多數(shù)由于輸血而產(chǎn)生，天然產(chǎn)生的抗-Fya抗體非常罕見?？?Fya大多能夠引起輕微的遲緩性的溶血性輸血反應(yīng)，也有嚴(yán)重的急性溶血反應(yīng)的報(bào)道[2]。筆者在佛山市第一人民醫(yī)院工作期間，在1名消化道出血的患者中檢出抗-Fya抗體，其鑒定過程和輸血策略分析如下。

資料與方法

1 一般資料 譚某，女，6 4歲，漢族，廣東人，患者于1 0余天前無明顯誘因出現(xiàn)上腹部不適，有腹瀉2天，1 0余次/天，為柏油樣便，1天前出現(xiàn)發(fā)熱，最高體溫3 8.8℃。既往有手術(shù)史，有輸血史。孕產(chǎn)史：孕4產(chǎn)3。血常規(guī)結(jié)果為：血紅蛋白（H b）5 0 g/L，考慮患者有進(jìn)行性出血，申請(qǐng)輸去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞2 U。

2 試劑與儀器 抗A、抗B血型定型試劑（長(zhǎng)春博德，批號(hào)：20190907）、標(biāo)準(zhǔn)A細(xì)胞、B細(xì)胞、O細(xì)胞（奧森多，批號(hào)：A382Z），R h分型卡（江陰力博，批號(hào)：202008012）、ABO及RhD血型微柱凝膠卡（奧森多，批號(hào)：ABR181J）、抗人球蛋白微柱凝膠卡（伯樂，批號(hào)：50531.58.10）、抗人球蛋白微柱凝膠卡（奧森多，批號(hào)：AHC161J）、抗體篩查細(xì)胞（奧森多，批號(hào)：3SS864Z）、抗體篩查細(xì)胞（上海血液中心，批號(hào)：20200731）、抗體鑒定細(xì)胞（Reagens，批號(hào)：732017）、IgG抗-Fya單克隆試劑（IMMUCOR）、IgG抗-Fya單克隆試劑（IMMUCOR）、全自動(dòng)血庫系統(tǒng)（江陰力博）、全自動(dòng)血型分析儀（奧森多AutoVision）、孵育箱（達(dá)亞美）、微柱凝膠卡離心機(jī)（達(dá)亞美）、BLISS液（奧森多，批號(hào)：280591）、樣本稀釋液（伯樂，批號(hào)：057610001）。

3 方法 ABO血型及Rh血型、Rh分型、交叉配血、抗體篩查均通過全自動(dòng)血型分析儀，用微柱凝膠法進(jìn)行檢測(cè)?？贵w鑒定和Duffy血型測(cè)定則通過手工加卡的方法，通過微柱凝膠法進(jìn)行檢測(cè)。所有的實(shí)驗(yàn)均按照文獻(xiàn)[3]及試劑的說明書進(jìn)行操作，所有的實(shí)驗(yàn)都有質(zhì)量保證措施。

結(jié) 果

1 血型鑒定 患者的血型為A型RhD陽性（表1），Rh分型的結(jié)果為CCDee（表2）。

表1 ABO及RhD血型鑒定結(jié)果

表2 Rh分型鑒定結(jié)果

2 抗體篩查 患者與奧森多廠家的抗體篩查細(xì)胞I、III細(xì)胞

反應(yīng)陽性，強(qiáng)度為1+，與II號(hào)細(xì)胞反應(yīng)陰性（表3）。與 上海血液中心的抗篩細(xì)胞I、II、III抗篩細(xì)胞反應(yīng)陽性，強(qiáng)度均為1+（表4）。尚未能確定抗體的性質(zhì)，未能排除抗-Fya、Jka、Leb、S、s、M、N、Dia等抗體，需要進(jìn)一步進(jìn)行抗體鑒定。

表3 與奧森多廠家的抗體篩查細(xì)胞反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表4 與上海血液中心的抗體篩查細(xì)胞反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 抗體鑒定 采用Reagens廠家生產(chǎn)的1-11號(hào)抗體鑒定細(xì)胞在抗人球蛋白微柱凝膠卡中進(jìn)行凝集反應(yīng)，結(jié)果患者與3、4、8、10、11號(hào)細(xì)胞反應(yīng)陽性，強(qiáng)度1+，其余細(xì)胞陰性（表5）。3、4、8、11號(hào)細(xì)胞的Fya抗原為純合子，1號(hào)、9號(hào)為雜合子，考慮患者體內(nèi)抗體強(qiáng)度較低，僅能與Fya抗原為純合子的抗篩細(xì)胞反應(yīng)，與雜合子不反應(yīng)。綜合分析，患者產(chǎn)生抗-Fya抗體。

表5 抗體鑒定結(jié)果

4 Duffy血型鑒定 IgG抗-Fya、抗-Fyb單克隆抗體試劑在抗人球蛋白微柱凝膠卡中進(jìn)行Duffy血型鑒定試驗(yàn)，并設(shè)置陰性對(duì)照、陽性對(duì)照（表6）?；颊叩腄uffy血型Fy（a-b+）。

表6 患者的Duffy血型鑒定

5 交叉配血 患者隨機(jī)選擇與多個(gè)Rh分型相合的獻(xiàn)血員在抗人球蛋白微柱凝膠卡中進(jìn)行交叉配血實(shí)驗(yàn)，結(jié)果均不相合。主側(cè)陽性1+，次側(cè)陰性。

6 輸血策略的制定

6.1 獻(xiàn)血源的尋找：在患者家系中，尋找同型的家屬作為獻(xiàn)血員。由于在中國(guó)人群Fya抗原屬于高頻抗原，有文獻(xiàn)報(bào)道我國(guó)部分地區(qū)中，F(xiàn)ya抗原頻率高達(dá)99.85%[4]。因此在隨機(jī)獻(xiàn)血員中，找到缺少Fya抗原的個(gè)體極其困難。只能通過患者的家系中尋找與患者Duffy血型系統(tǒng)相容的血液。筆者在患者家屬找到8位家屬，與患者的關(guān)系、配血結(jié)果及Duffy血型定型如下（表7）。僅有一位家屬（家屬1）與患者配血相合，經(jīng)鑒定該家屬Duffy血型也為Fy（a-b+），但該家屬年齡超過法定獻(xiàn)血的最高年齡，無法進(jìn)行采血。

表7 患者與其家屬配血的結(jié)果

6.2 尋找不同種族的獻(xiàn)血者：Duffy血型在不同種族人群中分布差異很大。在黑種人，尤其是非洲西部地區(qū)，大多數(shù)人的表型為Fy（a-b-）（67%），而在白種人（34%）中，不含F(xiàn)ya抗原的個(gè)體也明顯多于中國(guó)人[2]，因此尋找來自不同種族的獻(xiàn)血者能夠提高與患者配血相合的概率。但是今年由于疫情原因，在佛山地區(qū)，未能找到來自其他種族的獻(xiàn)血者。

6.3 求助稀有血型庫：在國(guó)內(nèi)有不少地區(qū)通過對(duì)大量獻(xiàn)血者進(jìn)行Fya、Fyb抗原測(cè)定將檢出的Fya陰性供者的信息錄入稀有血型庫[5]，已解決抗-Fya抗體引起的配血不相合的問題。筆者與廣州血液中心聯(lián)系，廣州血液中心已建立Fya陰性稀有血型庫，庫存有Fya陰性的冰凍紅細(xì)胞，因此立即將患者轉(zhuǎn)至廣州的醫(yī)院繼續(xù)治療，轉(zhuǎn)院后，患者輸注交叉配血“無溶血，無凝集”的紅細(xì)胞2次，于轉(zhuǎn)院后第5天輸3.5 U，于轉(zhuǎn)院后第10天輸2 U，血紅蛋白濃度由50 g/L提升至88 g/L后，順利出院。患者血紅蛋白濃度變化如圖1。

圖1 患者血紅蛋白（g/L）變化

討 論

抗-Fya抗體可能是由于懷孕的刺激引起，但絕大多數(shù)由于輸血而產(chǎn)生[6]。該患者Duffy血型為Fy（a-b+），于30年前有過3次懷孕史，于10年前在外院進(jìn)行手術(shù)治療，并進(jìn)行輸血，但當(dāng)時(shí)并未出現(xiàn)配血困難。因此，可以推斷患者的抗-Fya抗體可能通過輸血免疫產(chǎn)生，而并非通過懷孕的刺激。該案例與國(guó)內(nèi)外產(chǎn)生抗-Fya抗體的病例相似[7-8]，提示抗-Fya抗體在體內(nèi)能夠長(zhǎng)時(shí)間存在，這個(gè)可能與該抗原的免疫傾向于產(chǎn)生長(zhǎng)壽漿細(xì)胞有關(guān)[9]。在我國(guó)Fya抗原陰性的個(gè)體極其罕見，本案例中，筆者只能通過在患者家系中、不同種族中尋找，求助稀有血型庫[7]等方式為病人篩選相合的血液。

由于Fya在國(guó)內(nèi)屬于高頻抗原，國(guó)產(chǎn)的抗體篩選細(xì)胞和抗體鑒定的譜細(xì)胞多為Fya抗原陽性[10]，例如本案例中的上海血液中心生產(chǎn)的抗體鑒定細(xì)胞，會(huì)對(duì)抗-Fya抗體的鑒定造成一定程度的困難，對(duì)懷疑產(chǎn)生抗-Fya抗體時(shí)，應(yīng)該應(yīng)用進(jìn)口的譜細(xì)胞進(jìn)行抗體鑒定。此外還建議，輸血相容性實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備多個(gè)廠家，甚至不同地區(qū)生產(chǎn)的抗體篩選細(xì)胞和抗體鑒定細(xì)胞。

紅細(xì)胞膜上缺乏Fya和Fyb抗原的個(gè)體對(duì)間日瘧原蟲有天然免疫力[6]，因此在自然選擇的壓力下，在非洲，尤其是西部，大多數(shù)人的表現(xiàn)型為Fy（a-b-）。因此，為產(chǎn)生抗-Fya抗體的患者尋找相合的紅細(xì)胞時(shí)，求助來自非洲的獻(xiàn)血者，可以提高配血成功的機(jī)率。

稀有血型庫能夠?qū)ο∮醒突颊呒皶r(shí)安全用血有重要的意義，因此呼吁國(guó)內(nèi)同行展開合作，不僅是針對(duì)Fya抗原陰性的供者庫，還應(yīng)盡快建立針對(duì)其他血型系統(tǒng)的稀有血型庫。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突