董曉茜，鄢長(zhǎng)余，于遠(yuǎn)洋

（1 遼寧省中醫(yī)藥研究院，遼寧 沈陽(yáng)；2 大連市檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證技術(shù)服務(wù)中心，遼寧 大連）

0 引言

心可舒膠囊是由丹參、葛根、三七、山楂、木香五味藥材制成的復(fù)方制劑，具有活血化瘀、行氣止痛的作用。在臨床中，經(jīng)常用于治療氣滯血瘀型冠心病引起的胸悶、頭痛、高血脂等癥[1]。該制劑現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第二冊(cè)，僅有性狀、木香和丹參的薄層鑒別項(xiàng)，無(wú)法很好的控制其投料的藥材質(zhì)量。因此本實(shí)驗(yàn)參考中國(guó)藥典《2015》年版一部[2]木香項(xiàng)下及其相關(guān)文獻(xiàn)[3-6]對(duì)木香中的指標(biāo)性成分木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯建立了含量測(cè)定方法。結(jié)果表明該方法可以對(duì)木香的藥材質(zhì)量進(jìn)行控制。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Waters2489/2695 液相色譜儀；Sartorius BP211D、SartoriusBP221S 電子天平。

1.2 試劑與試藥

木香烴內(nèi)酯（111524-201509 99.0%）和去氫木香內(nèi)酯（111525-201912 99.5%）對(duì)照品均來(lái)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；甲醇為色譜純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 含量測(cè)定

2.1.1 色譜條件

采用Agilent Extend-C18（4.6mm×250mm，5μm）色譜柱，以甲醇-水(65 ∶35)；檢測(cè)波長(zhǎng):225nm；流速:1.0ml/min；柱溫:30℃。

2.1.2 溶液的制備

2.1.2.1 對(duì)照品溶液

精密稱取木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯對(duì)照品，加甲醇制成每1ml 含20μg 的溶液。

2.1.2.2 供試品溶液

取本品內(nèi)容物，研細(xì)，混勻，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理40min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.1.2.3 陰性樣品溶液

取缺木香的陰性樣品，按“2.1.2.2”項(xiàng)下的方法制備陰性樣品溶液并進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖，結(jié)果陰性無(wú)干擾。

2.2 方法學(xué)驗(yàn)證

2.2.1 線性范圍的考察

精密吸取木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯對(duì)照品溶液，分別制成每1ml 含5μg、10μg、20μg、40μg、80μg、100μg 的溶液。在上述色譜條件下分別進(jìn)樣測(cè)定。以質(zhì)量濃度（X，mg/ml）為橫坐標(biāo)，峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯的回歸方程分別為Y=584113026X-1915（R2=0.9999）和Y=408213776X-2033（R2=0.9999），分別在0.05-0.99μg 和0.05-1.02μg(R2=0.9999)范圍內(nèi)線性良好。

2.2.2 精密度考察

取同一供試品溶液連續(xù)進(jìn)樣6 次，測(cè)得木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯峰面積的RSD 分別為0.5%和0.8%。結(jié)果表明，儀器精密度良好。

2.2.3 穩(wěn)定性考察

取同一供試品溶液，分別于0h、2h、4h、6h、12h、24h 進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果顯示木香烴內(nèi)酯峰面積的RSD 為0.6%、去氫木香內(nèi)酯峰面積的RSD 為0.2%。表明供試品溶液中兩種物質(zhì)均在24h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.4 重復(fù)性考察

取同一批供試品，平行制備6 份供試品溶液，測(cè)定，記錄各組分色譜峰面積。木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯含量測(cè)定結(jié)果的RSD 分別為0.2%和0.3%。

2.2.5 加樣回收率試驗(yàn)

取已知含量的心可舒膠囊約0.25g，精密稱定，共9 份，分別加入木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯對(duì)照品母液1ml、2ml、3ml，按“2.1.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，測(cè)定，計(jì)算加樣回收率(表1、表2)。木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯的平均回收率(n=9)分別為98.8%和99.5%，RSD 分別為1.5%和1.4%。

表1 木香烴內(nèi)酯加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=9)

表2 去氫木香內(nèi)酯樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=9)

3 討論

（1）本實(shí)驗(yàn)為了兼顧木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯的熱不穩(wěn)定性，選擇了超聲處理提取方式[7-10]。比較了無(wú)水乙醇、甲醇、70%甲醇作為提取溶劑，結(jié)果表明甲醇提取效率較高，并考察提取溶劑的體積和超聲時(shí)間，根據(jù)測(cè)定結(jié)果，最終選擇甲醇溶液50ml 超聲處理40min 作為供試品溶液的提取方法。

（2）參考文獻(xiàn)[2]中木香含量測(cè)定項(xiàng)下的流動(dòng)相，并查閱了相關(guān)文獻(xiàn)[11-13]，對(duì)甲醇-水和甲醇-0.1%磷酸溶液等系統(tǒng)進(jìn)行了研究，結(jié)果表明酸的加入對(duì)兩種對(duì)照品的峰形、分離度、出峰時(shí)間等并無(wú)明顯區(qū)別，故而選擇甲醇-水流動(dòng)相系統(tǒng)。