王超 馬雪娜

摘要：最近這些年來(lái)，生物技術(shù)已經(jīng)從新興技術(shù)發(fā)展為普遍應(yīng)用的技術(shù)，廣泛的應(yīng)用在各行各業(yè)，當(dāng)前在大豆育種工作中也得到廣泛的應(yīng)用。所以，本文主要圍繞分子標(biāo)記技術(shù)中涉及到的相關(guān)原理及特點(diǎn)進(jìn)行分析，并且闡述目前大豆育種方面應(yīng)用生物技術(shù)的現(xiàn)狀，此外還根據(jù)多年的實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)而總結(jié)來(lái)轉(zhuǎn)基因技術(shù)在大豆育種方面的應(yīng)用，供參考。

關(guān)鍵詞：生物技術(shù);分子標(biāo)記;轉(zhuǎn)基因;大豆育種

當(dāng)前，隨著我國(guó)科研不斷的發(fā)展進(jìn)步，其中的分子生物學(xué)也得到迅速的發(fā)展，而生物技術(shù)在育種方面的應(yīng)用，更是在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中獲得理想的效果。生物技術(shù)能夠把植物、動(dòng)物甚至是微生物的基因加以提取，作為定向轉(zhuǎn)移用，從而對(duì)于種質(zhì)資源方面的拓寬更加有優(yōu)勢(shì)，同時(shí)可以充分利用雜種優(yōu)勢(shì)，在很大程度上將育種的目標(biāo)性有所提高，在縮短實(shí)際育種年限的同時(shí)可以提高育種的效率。而現(xiàn)在，我國(guó)的生物技術(shù)中的分子標(biāo)記技術(shù)已經(jīng)在大田作物的研究方面形成一定的規(guī)模，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中比較常見(jiàn)的就是在大豆和水稻以及玉米等作物的應(yīng)用，而且已經(jīng)發(fā)現(xiàn)諸多的遺傳連鎖圖。與此同時(shí)，其中的部分轉(zhuǎn)基因技術(shù)在作物育種和生產(chǎn)方面已經(jīng)得到廣泛的應(yīng)用。

1? 分子標(biāo)記技術(shù)的應(yīng)用

1.1? RAPD

根據(jù)多年的實(shí)際農(nóng)業(yè)生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，RAPD技術(shù)在大豆分類(lèi)及種質(zhì)資源方面的應(yīng)用是具有以一定的可行性的。對(duì)于大豆的種間RAPD標(biāo)記進(jìn)行相應(yīng)的分析，然后可以根據(jù)分析的結(jié)果針對(duì)不同種間的遺傳關(guān)系進(jìn)行可觀的評(píng)價(jià)。也可以利用RAPD技術(shù)針對(duì)研究育種后代品系與親本之間的遺傳關(guān)系進(jìn)行分析，從而在分子水平上分析，對(duì)于親本的遺傳特征加以明確，并且通過(guò)重組交換與多代選擇處理之后，而確定其在不同子代中的實(shí)際分布情況?？梢杂兄诠ぷ魅藛T對(duì)于優(yōu)良品種在選育的內(nèi)在因素方面更好的了解，從而可以在進(jìn)行選擇和利用優(yōu)良親本方面提供參考，并且在子代的選擇時(shí)提供直接的依據(jù)以及有價(jià)值的參考。

1.2? RFLP

RFLP是主要就是將分子雜交為作為基礎(chǔ)的一項(xiàng)技術(shù)。在生物技術(shù)中屬于一種有效的分子標(biāo)記而最先在大豆的遺傳研究工作中加以應(yīng)用。但是如果從建立品種指紋圖譜方面進(jìn)行分析，RFLP技術(shù)單個(gè)的探針信息比較有限，在鑒別效率方面表現(xiàn)一般。在實(shí)際進(jìn)行大豆抗病育種的過(guò)程當(dāng)中，RFLP技術(shù)是具有獨(dú)特作用的：一方面可以篩選出外來(lái)的病原菌，還有一方面是不需要制備病原菌種，最后也能夠克服生產(chǎn)環(huán)境的效應(yīng)，而且可以及早針對(duì)抗病性加以選擇。

1.3? SSR與 AFLP

SSR標(biāo)記在實(shí)際大豆分子生物學(xué)和遺傳育種方面的應(yīng)用過(guò)程中可以作為RFLP標(biāo)記比較重要的補(bǔ)充，目前在大豆基因圖譜中通過(guò)利用SSR分子標(biāo)記技術(shù)，已經(jīng)成功地針對(duì)大豆屬種間的親緣進(jìn)化關(guān)系開(kāi)展明確的研究?，F(xiàn)在已經(jīng)有學(xué)者成功地把AFLP技術(shù)在當(dāng)前關(guān)于大豆遺傳圖譜構(gòu)建和遺傳多樣性的研究中加以合理的應(yīng)用，并且根據(jù)諸多的國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，可有效的將AFLP技術(shù)在大豆基因組的相關(guān)研究中加以應(yīng)用。

2? 轉(zhuǎn)基因技術(shù)在大育種中的應(yīng)用

在20世紀(jì)的80年代開(kāi)始，基因工程技術(shù)進(jìn)入了科研領(lǐng)域，全球的相關(guān)學(xué)者都將外源或者是經(jīng)體外修飾過(guò)之后的內(nèi)源基因在植物中加以導(dǎo)入，因此可以在植物性狀和品質(zhì)以及抗性等方面的改良發(fā)揮作用。轉(zhuǎn)基因技術(shù)主要就是把不同種、屬間的優(yōu)異基因，在體外進(jìn)行切割、搭配、重組操作，將不良的性狀加以刪除，之后將有效的成份進(jìn)行保留，之后把此基因?qū)氲酱蠖怪?，完成?lái)傳統(tǒng)育種所不能達(dá)到的基因重組的研究目的，在很大的程度上將育種水平進(jìn)行有效的提升，給大豆育種工作開(kāi)創(chuàng)出新的局面。

目前在育種方面應(yīng)用的轉(zhuǎn)基因技術(shù)方法主要包括農(nóng)桿菌介導(dǎo)法、基因槍法、花粉管通道法、電擊法和PEG/電擊法等幾種。針對(duì)以上的幾種方法進(jìn)行比較之后，將其各自的優(yōu)缺點(diǎn)總結(jié)如下。農(nóng)桿菌介導(dǎo)法在實(shí)際應(yīng)用中的優(yōu)點(diǎn)就是可靠性比較強(qiáng)。具有比較高的效率，但是也只有外植體中有再生能力的雙子葉植物可以進(jìn)行實(shí)際應(yīng)用;基因槍法與農(nóng)桿菌介導(dǎo)法的優(yōu)勢(shì)正相反，基因槍法的受體不會(huì)受到植物種類(lèi)器官的限制，對(duì)于單子葉植物也同樣可以進(jìn)行應(yīng)用，但是在可靠性方面表現(xiàn)比較差，相應(yīng)的轉(zhuǎn)化效率也偏低;電擊法與 PEG/電擊法現(xiàn)階段還只是可以得到轉(zhuǎn)化的愈傷組織與再生芽，所以在育種方面的功效不大。而現(xiàn)在在育種方面應(yīng)用的最為普遍的方法就是花粉管通道法，因?yàn)榇朔N技術(shù)的方法相對(duì)簡(jiǎn)單且容易執(zhí)行，尤? 其適用于植體外植株再生困難或者是再生頻率偏低的植物。

多年來(lái)我國(guó)在大豆的轉(zhuǎn)基因育種方面研究品質(zhì)改良獲得了非常優(yōu)異的成績(jī)。通過(guò)針對(duì)花粉管通道法的合理利用，我國(guó)目前已經(jīng)獲得了一批高油、高蛋白且能夠高產(chǎn)的優(yōu)良大豆品種和株系。根據(jù)相關(guān)的報(bào)道可知，采取直接導(dǎo)入高蛋白野生大豆DNA的技術(shù)方式，目前已經(jīng)獲得了東北地區(qū)蛋白含量最高的“黑生 101”，并且通過(guò)審定，榮獲國(guó)家級(jí)的發(fā)明專(zhuān)利。

3? 結(jié)語(yǔ)

我國(guó)的大豆育種的相關(guān)研究發(fā)展日新月異，通過(guò)采取生物技術(shù)針對(duì)大豆的品質(zhì)加以合理的改良，能夠在提高抗性方面發(fā)揮重要的作用。在日后的大豆育種研究工作中，相關(guān)學(xué)者應(yīng)該更加深入的針對(duì)生物技術(shù)的應(yīng)用加以研究，有效推動(dòng)生物技術(shù)在大豆育種工作中的應(yīng)用發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

[1] 張東輝，李偉峰.生物技術(shù)在大豆育種上的應(yīng)用[J].大豆科技，2004（2）：2-3.