李君 顧艷麗 祖文 劉洋 白圖雅 胡玉霞 張夢迪

中圖分類號(hào) R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2021）16-1988-07

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.16.12

摘 要 目的：優(yōu)化蒙藥那如-3味的醇提工藝。方法：以苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿、烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿、胡椒堿和沒食子酸含量的綜合評(píng)分為考察指標(biāo)，料液比、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時(shí)間為考察因素，采用L9（34）正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化蒙藥那如-3味的醇提工藝。結(jié)果：最優(yōu)醇提工藝為料液比1 ∶ 10（g/mL）、乙醇體積分?jǐn)?shù)75%、提取時(shí)間1.5 h。經(jīng)3次實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，那如-3味醇提物中上述8種成分的平均含量分別為1.69、1.48、14.69、0.28、0.05、0.08、26.01、17.33 mg/g（RSD為0～4.96%，n=3），平均綜合評(píng)分為19.03分（RSD=1.42%，n=3）。結(jié)論：優(yōu)化所得那如-3味醇提工藝穩(wěn)定、可行。

關(guān)鍵詞 那如-3味;蒙藥;醇提工藝;工藝優(yōu)化;綜合評(píng)分

Optimization of Ethanol Extraction Technology of Mongolian Medicine Naru-3

LI Jun1，2，3，GU Yanli3，ZU Wen4，LIU Yang3，BAI Tuya1，2，3，HU Yuxia1，2，3，ZHANG Mengdi1，2，3（1. Center for New Drug Safety Evaluation and Research， Inner Mongolia Medical University， Hohhot 010110， China; 2. Research Center for Drug Screening， Inner Mongolia Medical University， Hohhot 010110， China; 3. College of Pharmacy， Inner Mongolia Medical University， Hohhot 010110， China; 4. Library of Inner Mongolia Medical University， Hohhot 010110， China）

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To optimize ethanol extraction technology of Mongolian medicine Naru-3. METHODS： The L9（34） orthogonal design was used to optimize ethanol extraction technology of Mongolian medicine Naru-3 with solid-liquid ratio， ethanol volume fraction and extraction time as factors， using comprehensive scores for the contents of benzoylaconitine， benzoylneoaconitine， benzoylhypoaconitine， aconitine， neoaconitine， hypoaconitine， piperine and gallic acid as indexes.? RESULTS： The optimal ethanol extraction technology was that solid-liquid ratio of 1 ∶ 10（g/mL），ethanol volume fraction of 75%，extracting for 1.5 h. After 3 times of validation tests， average contents of above 8 components in ethanol extract from Naru-3 were 1.69， 1.48， 14.69， 0.28， 0.05， 0.08， 26.01， 17.33 mg/g（RSDs were 0-4.96%，n=3）， respectively. Average comprehensive score was 19.03 （RSD=1.42%， n=3）. CONCLUSIONS： The optimal ethanol extraction technology of Mongolian medicine Naru-3 is stable and feasible.

KEYWORDS? ?Naru-3; Mongolian medicine; Ethanol extraction technology; Technology optimization; Comprehensive score

蒙藥那如-3味收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·蒙藥分冊(cè)》，由訶子、制草烏、蓽茇等3味藥材組成，具消“粘”、消腫、燥“協(xié)日烏素”、祛風(fēng)、止痛、散寒之功效，臨床常用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、坐骨神經(jīng)痛及脊髓損傷的治療[1]。那如-3味處方中制草烏具有鎮(zhèn)痛、抗炎、殺菌等作用[2]，其所含的生物堿類成分既是藥效成分亦是毒性成分，且對(duì)相關(guān)制劑的有效性和安全性具有較大影響[3];訶子主要含有鞣質(zhì)類、酚酸類等成分，具有抗腫瘤、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫等作用，且訶子中的酚酸類成分是其發(fā)揮抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎作用的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)[4-5];蓽茇中含有酰胺類、萜類、揮發(fā)油類等成分，其所含的酰胺類成分胡椒堿具有抗氧化、抗炎、降脂等作用[6-8]。

目前，《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·蒙藥分冊(cè)》中僅收載了那如-3味組方藥材的性狀、鑒別、用法用量[1]，而未對(duì)其主要成分的含量測定作出規(guī)定;2020年版《中國藥典》（一部）及相關(guān)文獻(xiàn)中以制草烏的主要成分苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿，蓽茇的主要成分胡椒堿以及訶子的主要成分沒食子酸作為控制相應(yīng)單味藥材質(zhì)量的指標(biāo)[9-11]，難以全面反映那如-3味的整體質(zhì)量。由于制草烏中含有可影響制劑安全性的毒性成分烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿[12]，因此有必要對(duì)那如-3味中毒性成分的含量進(jìn)行控制。此外，由于目前對(duì)那如-3味醇提工藝研究的報(bào)道較少，且市售制劑為水泛丸，故為完善那如-3味提取工藝，同時(shí)為滿足后期相關(guān)緩控釋劑型改進(jìn)的需要，本研究擬對(duì)那如-3味的醇提工藝進(jìn)行優(yōu)化，為成型工藝奠定基礎(chǔ)。

超高效液相色譜-電噴霧質(zhì)譜技術(shù)（UPLC-ESI-MS）無需將各成分分離，僅通過提取成分離子對(duì)即可準(zhǔn)確定量，極大地縮短了分析時(shí)間且具有較好的選擇性[13]。多反應(yīng)監(jiān)測模式（MRM）可進(jìn)一步提高檢測靈敏度，且各成分目標(biāo)峰均在不同通道內(nèi)獨(dú)立顯示，降低了各待測成分難以分離所致的不良影響，在中藥復(fù)雜成分的定量分析中得以廣泛應(yīng)用[14]。正交實(shí)驗(yàn)通過正交設(shè)計(jì)表來安排和分析實(shí)驗(yàn)過程所涉及的各個(gè)因素，從各因素的所有水平中挑選具有代表性的水平進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并結(jié)合綜合評(píng)價(jià)來找出最優(yōu)的水平組合，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于各科研領(lǐng)域[15]?；诖?，本研究采用UPLC-ESI-MS法同時(shí)測定那如-3味中苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿、烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿、胡椒堿和沒食子酸的含量;同時(shí)，以這8種成分含量為指標(biāo)，以料液比、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時(shí)間為考察因素[16-17]，采用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化那如-3味的醇提工藝，旨在為其質(zhì)量控制和相關(guān)制劑開發(fā)提供參考。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用主要儀器有LC-MS8045型三重四極桿UPLC-ESI-MS聯(lián)用系統(tǒng)及配備的LC-20AD型輸液泵、DGU-20A5R型在線脫氣機(jī)、SIL-20AC型自動(dòng)進(jìn)樣器、CTO-20A型柱溫箱、CBM-20A型系統(tǒng)控制器、FCV-20AH2型閥切換系統(tǒng)，AP135W型十萬分之一電子天平（日本Shimadzu公司）;KH-500DV型數(shù)控超聲波清洗器（昆山禾創(chuàng)超聲有限公司）;2TB-A型磁力加熱攪拌電熱套（山東鄄城華魯電熱儀器有限公司）等。

1.2 藥品與試劑

苯甲酰烏頭原堿（批號(hào)111794-201705，純度≥98.7%）、苯甲酰新烏頭原堿（批號(hào)111795-201804，純度≥96.7%）、苯甲酰次烏頭原堿（批號(hào)111796-201705，純度≥98.6%）、烏頭堿（批號(hào)110720-201708，純度≥94.7%）、新烏頭堿（批號(hào)110799-201807，純度≥98.3%）、次烏頭堿（批號(hào)110798-201609，純度≥99.2%）、胡椒堿（批號(hào)110775-201705，純度≥98.9%）、沒食子酸（批號(hào)110831-201805，純度≥98.8%）對(duì)照品均購自中國食品藥品檢定研究院;甲醇、乙腈均為色譜純，甲酸、乙酸銨均為分析純，水為超純水。

制草烏（批號(hào)20210111）、蓽茇（批號(hào)20210111）、訶子（批號(hào)20210111）飲片均購自北京同仁堂（亳州）飲片有限責(zé)任公司，經(jīng)內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院渠弼教授鑒定，分別為毛茛科植物北烏頭Aconitum kusnezoffii Reichb.干燥塊根的炮制品，胡椒科植物蓽茇Piper longum L.的干燥近成熟或成熟果穗，使君子科植物絨毛訶子Terminalia chebula Retz.var tomemtella Kurt.的干燥成熟果實(shí)。

2 方法與結(jié)果

2.1 那如-3味的制備

分別稱取制草烏、蓽茇、訶子飲片150、90、300 g，粉碎，混勻，過60目篩，即得那如-3味。

2.2 那如-3味中苯甲酰烏頭原堿等8種成分的含量測定

2.2.1 色譜與質(zhì)譜條件 色譜條件如下：以Shim-pack GIST-HP C18（2.1 mm×100 mm，3 μm）為色譜柱，以甲醇（A）-0.1%甲酸溶液（B）為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫（0～0.3 min，5%A;0.3～2 min，5%A→50%A;2～4 min，50%A→55%A;4～6 min，55%A→100%A;6～7 min，100%A;7～7.01 min，100%A→5%A;7.01～10 min，5%A）;流速為0.25 mL/min;柱溫為35 ℃;進(jìn)樣量為3 μL。質(zhì)譜條件如下：以ESI為離子源，采用MRM方式進(jìn)行正、負(fù)離子掃描;霧化氣流量為3 L/min;加熱氣流量為10 L/min;接口溫度為300 ℃;脫溶劑溫度為526 ℃;加熱塊溫度為400 ℃。8種待測成分的質(zhì)譜參數(shù)見表1（表中，Q1表示前四極桿的預(yù)桿電壓，Q3表示后四極桿的預(yù)桿電壓），二級(jí)質(zhì)譜圖見圖1。

2.2.2 混合對(duì)照品溶液的制備 精密稱取苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿、烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿、胡椒堿、沒食子酸對(duì)照品各適量，分別置于25 mL量瓶中，加甲醇溶解，制成上述8種成分質(zhì)量濃度分別為228、212、200、200、212、160、368、340 μg/mL的單一對(duì)照品貯備液;分別精密量取上述各單一對(duì)照品貯備液適量，置于同一5 mL量瓶中，加甲醇稀釋，制成上述8種成分質(zhì)量濃度分別為0.456、0.424、1.600、0.080、0.212、0.320、1.472、4.080 μg/mL的混合對(duì)照品溶液。所有溶液均于4 ℃保存，備用。

2.2.3 供試品溶液的制備 稱取“2.1”項(xiàng)下那如-3味約9.0 g，置于圓底燒瓶中，加85%乙醇90 mL，稱定質(zhì)量，用磁力加熱攪拌電熱套加熱提取1.0 h，冷卻至室溫，再次稱定質(zhì)量，用85%乙醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，混勻。取上述提取液10 μL，加入甲醇-水溶液（1 ∶ 1，V/V，下同）990 μL，渦旋混勻30 s;取上述混合溶液100 μL，加入甲醇-水溶液900 μL，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜濾過，即得。

2.2.4 專屬性考察 取上述空白溶液（甲醇-水溶液）、混合對(duì)照品溶液、供試品溶液適量，按“2.2.1”項(xiàng)下試驗(yàn)條件進(jìn)樣分析，記錄色譜圖。結(jié)果，在供試品溶液中，各待測成分的出峰位置與混合對(duì)照品基本一致，且空白溶液對(duì)測定無干擾，詳見圖2。

2.2.5 線性關(guān)系考察 取“2.2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液適量，加50%甲醇稀釋，制成苯甲酰烏頭原堿質(zhì)量濃度分別為2.28、4.56、9.12、22.80、45.60、91.20、182.40、228.00 ng/mL，苯甲酰新烏頭原堿質(zhì)量濃度分別為2.12、4.24、8.48、21.20、42.40、84.80、169.60、212.00 ng/mL，苯甲酰次烏頭原堿質(zhì)量濃度分別為8.00、16.00、32.00、80.00、160.00、320.00、640.00、800.00 ng/mL，烏頭堿質(zhì)量濃度分別為0.40、0.80、1.60、4.00、8.00、16.00、32.00、40.00 ng/mL，新烏頭堿質(zhì)量濃度分別為1.06、2.12、4.24、10.60、21.20、42.40、84.80、106.00 ng/mL，次烏頭堿質(zhì)量濃度分別為1.60、3.20、6.40、16.00、32.00、64.00、128.00、160.00 ng/mL，胡椒堿質(zhì)量濃度分別為7.36、14.72、29.44、73.60、147.20、294.40、588.80、736.00 ng/mL，沒食子酸質(zhì)量濃度分別為20.40、40.80、81.60、204.00、408.00、816.00、1 632.00、2 040.00 ng/mL的系列線性溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下試驗(yàn)條件進(jìn)樣分析，記錄峰面積。以各待測成分的質(zhì)量濃度（X，ng/mL）為橫坐標(biāo)、峰面積（Y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表2。

2.2.6 定量限考察 取“2.2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液適量，用甲醇-水溶液稀釋，按“2.2.1”項(xiàng)下試驗(yàn)條件進(jìn)樣測定，以信噪比≥10計(jì)算定量限。結(jié)果，苯甲酰烏頭原堿等8種成分的定量限分別為2.28、2.00、8.00、1.60、0.40、1.06、7.36、20.40 ng/mL。

2.2.7 精密度試驗(yàn) 分別取“2.2.5”項(xiàng)下苯甲酰烏頭原堿質(zhì)量濃度為45.60 ng/mL、苯甲酰新烏頭原堿質(zhì)量濃度為42.40 ng/mL、苯甲酰次烏頭原堿質(zhì)量濃度為160.00 ng/mL、烏頭堿質(zhì)量濃度為8.00 ng/mL、新烏頭堿質(zhì)量濃度為21.20 ng/mL、次烏頭堿質(zhì)量濃度為32.00 ng/mL、胡椒堿質(zhì)量濃度為147.20 ng/mL、沒食子酸質(zhì)量濃度為408.00 ng/mL的線性溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下試驗(yàn)條件于1 d內(nèi)連續(xù)進(jìn)樣6次，考察日內(nèi)精密度;按每天1次連續(xù)測定6 d，考察日間精密度。結(jié)果，8種成分的日內(nèi)、日間RSD均小于3%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.2.8 重復(fù)性試驗(yàn) 稱取“2.1”項(xiàng)下那如-3味，共6份，每份9.0 g，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.2.1”項(xiàng)下試驗(yàn)條件進(jìn)樣分析，記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算樣品中8種成分的含量。結(jié)果，8種成分含量的RSD均小于5%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

2.2.9 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.2.3”項(xiàng)下供試品溶液，分別于室溫下放置0、2、4、6、8、12、24 h時(shí)按“2.2.1”項(xiàng)下試驗(yàn)條件進(jìn)樣分析，記錄峰面積。結(jié)果，8種成分峰面積的RSD均小于5%（n=7），表明供試品溶液于室溫下放置24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.10 加樣回收率試驗(yàn) 取已知含量的“2.1”項(xiàng)下那如-3味共6份，置于圓底燒瓶中;精密稱取苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿、胡椒堿、沒食子酸對(duì)照品15.75、11.34、129.01、129.64、164.57 mg，加甲醇7 mL溶解，取上述溶液1 mL，置于上述圓底燒瓶中;另精密稱取烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿對(duì)照品2.00、5.50、10.50 mg，加甲醇5 mL溶解，取上述溶液100 μL，置于上述圓底燒瓶中，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.2.1”項(xiàng)下試驗(yàn)條件進(jìn)樣分析，記錄峰面積并計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見表3。

2.2.11 樣品含量測定 稱取“2.1”項(xiàng)下那如-3味約9.0 g，按“2.2.3” 項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.2.1”項(xiàng)下試驗(yàn)條件進(jìn)樣分析，記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算樣品中8種成分的含量。每樣品平行測定3次。

2.3 那如-3味的醇提工藝優(yōu)化

2.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果 本研究前期在參考相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上[16-17]，選擇料液比（A，g/mL）、乙醇體積分?jǐn)?shù)（B，%）、提取時(shí)間（C，h）為考察因素，每個(gè)因素設(shè)置3個(gè)水平;同時(shí)，選擇8種成分含量的綜合評(píng)分為考察指標(biāo)，采用L9（34）正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化醇提工藝。根據(jù)那如-3味各組方藥材的比例計(jì)算綜合評(píng)分：綜合評(píng)分=（制草烏中6種生物堿總含量）×27.8%+（蓽茇中胡椒堿含量）×16.7%+（訶子中沒食子酸含量）×55.5%，綜合評(píng)分越高表明提取效果越好[14-15]。那如-3味醇提工藝的因素與水平見表4，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案與結(jié)果見表5（表中，K1～K3、R均以綜合評(píng)分計(jì)算）。由表5可見，各因素對(duì)綜合評(píng)分影響的順序由高到低為A>C>B，其中A3>A1>A2、B2>B3>B1、C3>C1>C2。方差分析結(jié)果顯示，A、B、C、D（誤差）的偏差平方和分別為24.52、11.62、18.62、7.18，自由度均為2，方差分別為12.26、5.81、9.41、3.59，F(xiàn)值分別為3.41、1.62、2.62、1.00;其中，因素A、B、C對(duì)綜合評(píng)分均無顯著影響（P>0.05）。最優(yōu)提取工藝為A3B2C3，即料液比1 ∶ 10（g/mL）、乙醇體積分?jǐn)?shù)75%、提取時(shí)間1.5 h。

2.3.2 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 按處方比例稱取制草烏、蓽茇、訶子飲片，粉碎，過60目篩，稱取約180.0 g，共3份，按上述最優(yōu)提取工藝進(jìn)行3次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。結(jié)果，8種成分的平均含量分別為1.69、1.48、14.69、0.05、0.08、0.28、26.01、17.33 mg/g（RSD為0～4.96%，n=3）;平均綜合評(píng)分為19.03分（RSD=1.42%，n=3），詳見表6。

3 討論

本課題組參考文獻(xiàn)[18]，在采用等度洗脫時(shí)發(fā)現(xiàn)，制草烏中苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿、烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿等6種成分色譜峰的峰形較好，但未能分離出胡椒堿和沒食子酸，故采用梯度洗脫。結(jié)果，8種成分色譜峰的峰形均較好。同時(shí)，本課題組又對(duì)不同流動(dòng)相體系（乙腈-0.1%甲酸溶液、乙腈-5 mmol/L乙酸銨溶液、甲醇-5 mmol/L乙酸銨溶液、乙腈-水、甲醇-水、甲醇-0.1%甲酸溶液）進(jìn)行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)以乙腈-0.1%甲酸溶液為流動(dòng)相時(shí)，胡椒堿、沒食子酸的分離度和色譜峰峰形均較差;當(dāng)以乙腈-5 mmol/L乙酸銨溶液、甲醇-5 mmol/L乙酸銨溶液為流動(dòng)相時(shí)，胡椒堿、沒食子酸的色譜峰峰形較差，且與乙腈-0.1%甲酸溶液比較，苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿、烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿的響應(yīng)值均有所減弱且靈敏度較差;當(dāng)以乙腈-水、甲醇-水為流動(dòng)相時(shí)，8種成分的響應(yīng)值均較強(qiáng)，但色譜峰存在拖尾現(xiàn)象;當(dāng)以甲醇-0.1%甲酸溶液為流動(dòng)相時(shí)，各成分的色譜峰峰形對(duì)稱且靈敏度較高，故選擇甲醇-0.1%甲酸溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫。

本課題組前期通過質(zhì)譜掃描來確定了那如-3中8種成分的正、負(fù)離子檢測模式。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿、烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿、胡椒堿等7種成分，在正離子模式下可得到1個(gè)質(zhì)子，形成[M+H]+準(zhǔn)分子離子峰，故上述7種成分采用MRM正離子模式;而沒食子酸在負(fù)離子模式下的響應(yīng)值較強(qiáng)，故該成分采用MRM負(fù)離子模式。確定正、負(fù)離子檢測模式后，本課題組分別在不同碰撞能量（65、55、45、35、25、15 eV）條件下對(duì)母離子進(jìn)行掃描，選擇響應(yīng)值較強(qiáng)的兩對(duì)碎片離子作為定性離子對(duì)，響應(yīng)值最強(qiáng)的離子對(duì)作為定量離子對(duì)，通過電壓優(yōu)化確定最終碰撞能量，獲得“2.2.1”項(xiàng)下質(zhì)譜條件。

2020年版《中國藥典》（一部）中規(guī)定，制草烏中雙酯型生物堿以烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿總量計(jì)不得超過0.04%，蓽茇中胡椒堿不得低于2.50%，而未對(duì)訶子中沒食子酸含量作出規(guī)定[11]。在本研究中，測得制草烏中烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿的平均總含量為0.041%（0.41 mg/g），蓽茇中胡椒堿的平均含量為2.601%（26.01 mg/g），訶子中沒食子酸的平均含量為1.733%（17.33 mg/g）。由于本研究所用的提取條件和測定方法與《中國藥典》不同，故制草烏中雙酯型生物堿總量與藥典有出入。

2020年版《中國藥典》（一部）中制草烏采用異丙醇-乙酸乙酯提取，因異丙醇和乙酸乙酯毒性較大且不適用于工業(yè)大生產(chǎn)[11]，基于此本研究參考相關(guān)文獻(xiàn)[19]及所測各成分的理化性質(zhì)，最終選擇毒性較小且經(jīng)濟(jì)的乙醇為提取溶劑。本研究通過正交實(shí)驗(yàn)篩選得那如-3味最優(yōu)醇提工藝為料液比1 ∶ 10（g/mL），乙醇體積分?jǐn)?shù)75%，提取時(shí)間1.5 h。3次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，8種成分的平均含量分別為1.69、1.48、14.69、0.05、0.08、0.28、26.01、17.33 mg/g（RSD為0～4.96%），平均綜合評(píng)分為19.03分（RSD=1.42%）。

綜上所述，優(yōu)化所得那如-3味醇提工藝穩(wěn)定、可行。

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（收稿日期：2021-03-19 修回日期：2021-06-18）

（編輯：陳 宏）