馬葭葭,張建國,朱雨晴,岑 瑛,楊 敏*
(吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院·吉林吉林·132101)
隨著社會節(jié)奏的不斷加快、各種壓力不斷增大,大多數(shù)人的身體呈現(xiàn)亞健康狀態(tài)。我國存在睡眠障礙的人數(shù)超過3億,成年人的失眠發(fā)生率高達38.2%,頸椎病患者大約有兩億人,且均呈逐年上升的趨勢,改善睡眠質(zhì)量、緩解頸椎酸痛是現(xiàn)代人面臨的急需解決的問題。目前,國內(nèi)外對此類功能綜合性護頸枕的研究較少,相關(guān)產(chǎn)品市場空白。中藥配方中的藥物平緩,適合芳香療法,天然冰片可開竅醒神、抗菌[1],薄荷可清利頭目[2],磁石可鎮(zhèn)靜安神、平肝潛陽,丁香、艾葉、薄荷均有抗菌、抗炎[3,4,5]的功效。中藥安神助眠按摩護頸枕實現(xiàn)了多種功效的結(jié)合,緩解人們的需求,解決了市場中此類產(chǎn)品功效單一的問題,將中藥應(yīng)用的形式加以創(chuàng)新,為傳統(tǒng)中藥進一步的產(chǎn)品開發(fā)和臨床應(yīng)用提供參考。
天然冰片、丁香、艾葉、薄荷、磁石(購于吉林大藥房)。
超聲波提取機(濟寧天華超聲電子儀器有限公司,THC);數(shù)顯控溫智能電熱套(力辰科儀)。
2.1.1 揮發(fā)油的制備
天然冰片本是龍腦香的樹脂和揮發(fā)油中取得的結(jié)晶,不再進行提取操作。
藥理實驗中天然冰片混懸液的制備[6]:取天然冰片適量,用研缽研碎,過100目篩,取過篩后天然冰片粉末0.5g,向其中加入3%的吐溫-80,超聲30min,使其溶解,然后加入蒸餾水定容至25ml,配制成20mg/ml的天然冰片混懸液,超聲30min,加入揮發(fā)油中。
稱取丁香適量,粉碎,參照文獻[7]進行超聲波輔助水蒸氣蒸餾法提取,過150目篩,按料液比為1∶15加入蒸餾水,超聲波功率為300w,萃取時間1h。結(jié)果提取丁香揮發(fā)油的平均取得率為18.125%。
稱取艾葉適量,粉碎,參照文獻[8]進行水蒸氣蒸餾法提取艾葉中的揮發(fā)油。將艾葉粉末置于1000 ml圓底燒瓶中,按料液比為1∶7加入蒸餾水,冷浸2h后按水蒸汽蒸餾法加熱提取?;亓?h后,分出揮發(fā)油,加入少量無水硫酸鈉干燥,即得到揮發(fā)油產(chǎn)品。重復(fù)上述操作提取所有艾葉的揮發(fā)油,注意保存。按每克艾葉提取的揮發(fā)油體積(ml)計算揮發(fā)油提取率為0.79%。稱取薄荷適量,粉碎,參照文獻[9]水蒸氣蒸餾,料液比為1∶9放入500ml三頸燒瓶中,加入適量二次蒸餾水,浸泡一段時間,浸泡時間1.5 h,于100℃條件下回流一段時間,獲得蒸餾液提取時間3.0 h時。轉(zhuǎn)入分液漏斗中加入2.0 g氯化鈉促進油水分離,靜置24 h,加入適量無水硫酸鈉對其進行干燥處理,純化后稱重。結(jié)果所得薄荷揮發(fā)油的提取率為1.05%。
2.1.2 中藥香囊的制備
將丁香、艾葉、薄荷的藥粉、揮發(fā)油和天然冰片分裝放入香囊內(nèi)。
將香囊放入護頸枕內(nèi),把磁石放在對應(yīng)需要按摩的穴位即風池穴、風府穴、大椎穴、天柱穴、肩井穴處。
2.2.1 抗疲勞實驗測定負重游泳時間
選取昆明種雄性小鼠40只,日齡40天左右,平均體質(zhì)量(20±5)g。正常喂養(yǎng)小鼠,維持正常自由節(jié)律。
小鼠隨機分為正常對照組(空白組)10只,試驗組30只。將試驗組的30只小鼠分為低、中、高(1∶2∶3)香薰用量不同的3組,每組10只。
低、中、高用量組小鼠分別灌胃中藥揮發(fā)油滴鼻液10μL/(只·次)、20μL/(只·次)、30μL/(只·次)(將揮發(fā)油、吐溫-80和蒸餾水以1∶2∶47的比例配成對應(yīng)的滴鼻液),每天兩次,空白對照組所用的滴鼻液為生理鹽水,連續(xù)14d。末次給藥30min后,將小鼠尾部負荷適宜重量的鐵釘,放入長50寬30高40的水池內(nèi),水溫保持在(27.0±0.5)℃,進行負重游泳[10],記錄小鼠游泳時間。
2.2.2 凝神入眠效果測睡眠發(fā)生率
選取昆明種雄性小鼠20只,日齡40天左右,平均體質(zhì)量(20±5)g。正常喂養(yǎng)小鼠,維持正常自由節(jié)律。
小鼠隨機分為正常對照組(空白組)10只,試驗組10只。
熏香處理小鼠,當天實驗之前小鼠禁食不進水,15點為飼料投放時間,在投放飼料之后的2 h內(nèi),觀察記錄各組入睡動物數(shù),小鼠翻正反射消失達1 min以上的鼠數(shù)為入睡動物數(shù),測小鼠睡眠發(fā)生率[11]。小鼠睡眠發(fā)生率=每組小鼠入睡只數(shù)/每組小鼠總只數(shù)×100%。
由中藥學(xué)專業(yè)人員組成10人評定小組,分別使用中藥安神助眠護頸枕,并就感官感受對護頸枕的功效進行評價,評價標準見表1。
表1 中藥護頸枕感官檢測的標準
2.4.1 香味質(zhì)量檢測
根據(jù)一般人體所占空間的大小,應(yīng)于護頸枕周圍15cm內(nèi)可聞到護頸枕的香味。
2.4.2 穴位檢測
磁石在護頸枕上的位置對應(yīng)人體穴位,可起到按摩磁療的作用。
經(jīng)檢測,在人體頭部周圍合適的范圍內(nèi)散有護頸枕的香味,磁石放置位置準確貼合人體穴位,符合護頸枕質(zhì)量檢測要求。
3.2.1 抗疲勞實驗測定負重游泳時間結(jié)果與分析
不同用量組對小鼠負重游泳時間的影響如表2所示。
表2 不同用量組對小鼠負重游泳時間的影響(n=10,±S)
表2 不同用量組對小鼠負重游泳時間的影響(n=10,±S)
組別 游泳時間/s空白對照組 78.05±13.03a低用量組 91.45±10.23a中用量組 109.05±12.67b高用量組 145.86±24.90c
從表2可以看出,與空白組比較,不同用量的組別都能延長小鼠負重游泳時間。與空白對照組相比,低用量組延長小鼠負重游泳時間差異不顯著(P>0.05),中用量組和高用量組延長小鼠負重游泳時間差異顯著(P<0.05)。實驗結(jié)果表明,不同用量組均能延長小鼠負重游泳時間,且高用量時效果最好。所以中藥提取揮發(fā)油具有一定的抗疲勞效果,且其抗疲勞效果隨揮發(fā)油使用量的增加而逐漸顯著。
3.2.2 凝神入眠實驗測定小鼠睡眠發(fā)生率結(jié)果與分析小鼠睡眠數(shù)量及睡眠發(fā)生率如表3所示。
表3 小鼠睡眠數(shù)量及睡眠發(fā)生率(n=10,±S)
表3 小鼠睡眠數(shù)量及睡眠發(fā)生率(n=10,±S)
組別 睡眠發(fā)生率/% 12h睡眠時間/min空白對照組 30 233.88±23.74a低用量組 30 255.36±29.48b中用量組 60 298.64±25.34c高用量組 70 353.37±27.36d
從表3可以看出,與空白組比較,不同用量的組都能延長小鼠的睡眠時間,中、高用量組能顯著提高小鼠睡眠發(fā)生率。與空白對照組相比,低用量組、中用量組以及高用量組延長小鼠睡眠時間差異顯著(P<0.05),且睡眠延長率分別為17.17%、39.72%、86.88%。實驗結(jié)果表明,不同用量組均能延長小鼠睡眠時間,且高用量時效果最好。所以中藥提取揮發(fā)油具有一定的安神助眠效果,且隨揮發(fā)油使用量增加而增高。
中藥學(xué)專業(yè)人員對中藥護頸枕感官檢測結(jié)果如表4所示。
表4 中藥護頸枕感官檢測結(jié)果(n=10,±S)
表4 中藥護頸枕感官檢測結(jié)果(n=10,±S)
組別 分數(shù)/分安神助眠 24.6±2.07抗疲勞 23.9±1.20舒適度 34.2±1.60總分數(shù) 82.7±3.30
感官檢測結(jié)果表明,中藥護頸枕的安神助眠、抗疲勞功效及舒適度都表現(xiàn)良好。
實驗過程中發(fā)現(xiàn)白芷淀粉含量過高,難以提取,所以本品中去除白芷。另,由于運動方式的限制、不便于批量操作[12]、實驗數(shù)據(jù)誤差較大,所以去除小鼠抗疲勞爬桿實驗。