侯孟春,廖 輝,王仕英
(阿壩師范學(xué)院資源與環(huán)境學(xué)院,四川阿壩 623000)
蒲公英(Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.)菊科,蒲公英屬多年生草本植物。我國(guó)四川、貴州、云南等地區(qū)均有分布。蒲公英富含維C、銅、蒲公英醇等多種健康營(yíng)養(yǎng)成分,有利尿、緩瀉、退黃疸、利膽等功效,能治急性乳腺炎、淋巴腺炎、瘰疬、疔毒瘡腫等疾病。蒲公英還具有一定的食用價(jià)值,腌泡的蒲公英花蕾具有提神醒腦的功效;根可以用來(lái)替代咖啡;花可以做酒等。目前,市場(chǎng)對(duì)蒲公英的需求量很大,而蒲公英的人工種植面臨著凍害等問(wèn)題。植物凍害(Plant frost)是指氣溫降至冰點(diǎn)以下,植物因細(xì)胞間隙結(jié)冰引起的傷害。植物凍害對(duì)組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性和可溶性蛋白質(zhì)含量有明顯的影響。
SOD 是生物體內(nèi)存在的一種抗氧化金屬酶,能夠催化超氧陰離子自由基歧化生成氧和過(guò)氧化氫,在機(jī)體氧化與抗氧化平衡中起到至關(guān)重要的作用[1],與很多疾病的發(fā)生、發(fā)展密不可分?;钚匝趸蚱渌^(guò)氧化物自由基對(duì)細(xì)胞膜系統(tǒng)的傷害很大,通過(guò)測(cè)定凍害條件下蒲公英組織中SOD 的活性,從而判斷此條件下植株的抗性。根據(jù)這一試驗(yàn)結(jié)果,分析總結(jié)出提高蒲公英組織中SOD 含量的方法,從而解決蒲公英人工種植的凍害問(wèn)題,提高種植產(chǎn)量,為當(dāng)?shù)胤N植戶增加收益。
取若干正常生長(zhǎng)的蒲公英植株,分為甲乙兩組。甲組提供正常的生長(zhǎng)條件(室溫),乙組提供凍害條件(零下2 ℃),其余條件均相同,培育1 周時(shí)間。試驗(yàn)時(shí)選擇長(zhǎng)勢(shì)良好、健康的植株組織進(jìn)行測(cè)定。
樣品中SOD 活性的測(cè)定,參照盧少云等人[1]用NBT 還原法進(jìn)行。
樣品中可溶性蛋白質(zhì)含量的測(cè)定,參照趙英永等人[2]考馬斯亮藍(lán)G-250 染色法進(jìn)行。
每組試驗(yàn)重復(fù)3 次,取平均值計(jì)算。
正常條件下的樣品溶液吸光度見(jiàn)表1。
表1 正常條件下的樣品溶液吸光度
將測(cè)定結(jié)果代入公式,即:
凍害條件下的樣品溶液吸光度見(jiàn)表2。
表2 凍害條件下的樣品溶液吸光度
將測(cè)定結(jié)果代入公式,即:
甲乙兩組SOD 總活性測(cè)定結(jié)果對(duì)比見(jiàn)圖1。
圖1 甲乙兩組SOD 總活性測(cè)定結(jié)果對(duì)比
根據(jù)試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析,正常條件下的蒲公英植株樣品中SOD 總活性明顯低于凍害條件下的蒲公英植株樣品中SOD 總活性。凍害條件下的蒲公英植株樣品中SOD 總活性比正常條件下的蒲公英植株樣品中SOD 總活性高6.6%。一定程度的凍害脅迫可以提升蒲公英植株組織中SOD 的活性,增強(qiáng)植株的抗性。
根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,利用一定程度的凍害脅迫來(lái)提高蒲公英植株樣品中SOD 總活性,然后選擇抗性好的植株進(jìn)一步繁殖,再進(jìn)一步使用凍害脅迫篩選出抗性最強(qiáng)的植株。利用篩選出的優(yōu)勢(shì)種進(jìn)行大量繁殖,提升蒲公英的品質(zhì)。在一定程度上解決蒲公英人工種植的凍害問(wèn)題,努力提高蒲公英的種植產(chǎn)量,增加當(dāng)?shù)胤N植戶的收益,緩解冬季市場(chǎng)上蒲公英緊缺的問(wèn)題。
試驗(yàn)的凍害脅迫程度固定,接下來(lái)試驗(yàn)小組將繼續(xù)劃分更詳細(xì)的凍害脅迫階梯,進(jìn)行更加精細(xì)的試驗(yàn)分析,進(jìn)一步探究?jī)龊γ{迫對(duì)蒲公英組織中SOD 活性的影響。