賈前生，劉遠(yuǎn)洋

（1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)體育教研部，黑龍江大慶 163000；2.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)食品學(xué)院，黑龍江大慶 163000）

長(zhǎng)期或高強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)、工作是導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)“過度訓(xùn)練綜合征”的重要成因，它不但使機(jī)體免疫力下降，還會(huì)引發(fā)食欲不振、精神萎靡、注意力不集中等疲勞癥狀[1?2]。疲勞的產(chǎn)生機(jī)理主要與機(jī)體氧化應(yīng)激水平相關(guān)，研究表明過度訓(xùn)練會(huì)誘發(fā)細(xì)胞凋亡并引起臟器運(yùn)動(dòng)性損傷，而高氧化應(yīng)激水平會(huì)加速細(xì)胞凋亡的進(jìn)程，因而對(duì)機(jī)體氧化應(yīng)激水平的調(diào)控是延緩疲勞的重要途徑[3?5]。

多酚類天然提取物-姜黃素由于其安全性高、商業(yè)用途廣泛、具備多種藥用活性，使其成為了運(yùn)動(dòng)恢復(fù)與緩解疲勞類產(chǎn)品開發(fā)的重要研究對(duì)象[6?8]。研究證實(shí)姜黃素所具有的羥基活性基團(tuán)能夠有效阻斷自由基的轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、從而降低機(jī)體的氧化應(yīng)激水平[9]。在此基礎(chǔ)上，通過過度訓(xùn)練大鼠模型,研究發(fā)現(xiàn)姜黃素能夠減輕骨骼肌的氧化應(yīng)激損傷降低疲勞性損傷[10]、抑制臟器細(xì)胞凋亡從而保護(hù)臟器[11]以及降低與自由基產(chǎn)生相關(guān)的生化指標(biāo)水平，進(jìn)而緩解運(yùn)動(dòng)性疲勞[12?13]。

盡管姜黃素在醫(yī)藥領(lǐng)域以及運(yùn)動(dòng)恢復(fù)產(chǎn)品中極具開發(fā)潛力，但姜黃素自身的疏水結(jié)構(gòu)導(dǎo)致其水溶性極差，而人體攝入后會(huì)快速將其排除體外，姜黃素極易受到溫度、pH的影響并易發(fā)生降解，使其生物可利用度大大降低，因而尚未被視為有效的商業(yè)治療劑、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑[14?16]。為了克服姜黃素口服吸收的障礙，研究人員已嘗試使用遞送系統(tǒng)將姜黃素包埋[17]，如納米顆粒載體技術(shù)。納米顆粒載體技術(shù)在當(dāng)今的生物醫(yī)療領(lǐng)域已十分成熟，通過該技術(shù)不但可以保持姜黃素在存儲(chǔ)、運(yùn)輸以及人體消化過程中結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，還能使其更易進(jìn)入小腸上皮細(xì)胞被人體所吸收，從而提高其在生物可利用度[18?19]。王瑋琛[20]建立了小鼠疲勞模型并發(fā)現(xiàn)以玉米蛋白-多糖為載體的姜黃素納米顆粒具有良好的生物利用率，并能夠修復(fù)由疲勞引起的氧化應(yīng)激損傷。目前國(guó)內(nèi)外大部分研究重點(diǎn)在于姜黃素單體的抗氧化以及體外作用機(jī)制的探究，姜黃素納米載體相關(guān)方面的研究局限于生物可利用度的提高，納米載體技術(shù)大多處于制備優(yōu)化工藝階段；而對(duì)于姜黃素通過傳遞體系后在機(jī)體內(nèi)相關(guān)生物學(xué)活性以及物質(zhì)間協(xié)同作用的研究較少，對(duì)于姜黃素納米載體顆粒體內(nèi)抗疲勞活性的研究也尚有較大拓展空間。

因而本實(shí)驗(yàn)擬以乳鐵蛋白為載體建立姜黃素納米載體顆粒，通過體內(nèi)消化吸收實(shí)驗(yàn)以及運(yùn)動(dòng)性疲勞模型，以力竭運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)、血乳酸、肌糖原、肝糖原以及體內(nèi)相關(guān)抗氧化酶等參數(shù)對(duì)該納米載體顆粒的抗氧化性、抗疲勞活性進(jìn)行綜合評(píng)判，以期為后續(xù)姜黃素納米載體顆粒在抗疲勞營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑的相關(guān)研究中提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

UV-2600 紫外可見分光光度計(jì) 日本島津公司；1260 型高效液相色譜 安捷倫科技（中國(guó)）有限公司；FC酶標(biāo)儀 美國(guó)賽默飛世爾科技公司；MYP11-2A恒溫磁力攪拌器 德國(guó)IKA公司；H1850 臺(tái)式高速離心機(jī) 湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司；Zetasizer Nano ZS粒度分析儀 英國(guó)馬爾文儀器；TCS SP2 激光共聚焦顯微鏡（Confocal Laser Scanning Microscopy,CLSM）德國(guó)Leica公司；Morris恒溫水池 北京智鼠多寶生物科技有限責(zé)任公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 姜黃素納米載體的制備 乳鐵蛋白-姜黃素納米載體顆粒的制備，參考江萍[21]的方法稍作修改，配制質(zhì)量濃度為1 mg/mL的姜黃素?zé)o水乙醇溶液并于超聲?。?5 ℃，80 W）中超聲2 h使姜黃素充分溶解；配制質(zhì)量濃度為1 mg/mL的乳鐵蛋白Tris-HCl緩沖液（pH=7.5），將一體積姜黃素溶液快速導(dǎo)入五體積乳鐵蛋白溶液中，于4 ℃靜置12 h后用0.22 μm的PES水系濾膜除去未被包埋的姜黃素，將濾液凍干后得到天然乳鐵蛋白-姜黃素納米載體顆粒。

1.2.2 姜黃素的檢測(cè)方法 姜黃素的HPLC檢測(cè)參考張聰聰[22]的方法稍加修改，進(jìn)樣體積10 μL，流動(dòng)相A為甲醇溶液，流動(dòng)相B為5%的乙酸水溶液，流動(dòng)相比例為85:15，等度洗脫流速0.5 mL/min；柱溫箱溫度30 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)425 nm，洗脫時(shí)間15 min。標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度分別為10、20、50、100、200 ng/mL，以將大黃素為內(nèi)標(biāo)，以姜黃素峰面積與內(nèi)標(biāo)大黃素峰面積之比為Y軸，以姜黃素濃度為X軸作圖。

1.2.3 負(fù)載率和包封率的測(cè)定 負(fù)載率[21]：稱取一定量納米載體顆粒溶解于甲醇中，磁力攪拌2 h后，在4000 r/min條件下離心分離30 min取上層清液；包封率：稱取一定量納米載體顆粒溶解于蒸餾水中，在8000 r/min條件下離心30 min，取上層清液進(jìn)行測(cè)定（方法如1.2.2），姜黃素的負(fù)載率和包封率按如下公式計(jì)算：

式中：M清為上清液中姜黃素的總質(zhì)量，M姜為載體顆粒中姜黃素的總質(zhì)量，M總為納米載體顆粒的總質(zhì)量。

1.2.4 姜黃素納米載體的結(jié)構(gòu)表征

1.2.4.1 粒徑分析 分別將天然乳鐵蛋白以及天然乳鐵蛋白-姜黃素納米載體顆粒復(fù)溶于純凈水溶液中，配制成蛋白濃度約為0.2 mg/mL的溶液，持續(xù)攪拌30 min確保充分混勻后，在室溫下使用粒度分析儀進(jìn)行分析，系統(tǒng)平衡時(shí)間120 s，每組樣品掃描次數(shù)12 次。

1.2.4.2 激光共聚焦 根據(jù)Wang[20]的方法稍加修改，用異丙醇配置濃度為0.1%(m/v)的尼羅藍(lán)染液。將乳鐵蛋白-姜黃素納米載體顆粒復(fù)溶液稀釋后，取10 mL樣品溶液于試管中，用移液槍準(zhǔn)確加入400 μL尼羅藍(lán)后充分振蕩混勻，并用錫紙包裹避光染色30 min。染色結(jié)束后取1 μL溶液于載玻片上，在20 倍物鏡視野下手動(dòng)調(diào)焦并進(jìn)行成像并觀測(cè)樣品顯微結(jié)構(gòu)。

構(gòu)建快篩快檢研發(fā)應(yīng)用體系，提高市場(chǎng)打假效能。廣東省所為落實(shí)監(jiān)管新要求，不斷在快篩快檢技術(shù)上發(fā)力，建立非法添加數(shù)據(jù)庫(kù)410種、產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫(kù)360種，非法添加快篩方法30多種，申請(qǐng)發(fā)明專利45項(xiàng)，已被授權(quán)31項(xiàng)。其中25項(xiàng)實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)品化，涵蓋藥品、保健食品、化妝品和食品領(lǐng)域，基本覆蓋市場(chǎng)上常見非法添加藥物。2012年,西布曲明快篩方法獲省科學(xué)技術(shù)三等獎(jiǎng)。2013年,《食品藥品中非法添加化學(xué)成分的監(jiān)督檢驗(yàn)系統(tǒng)技術(shù)策略及其應(yīng)用》獲省科學(xué)技術(shù)二等獎(jiǎng)。2014年，全國(guó)藥檢系統(tǒng)中首個(gè)非法添加快檢技術(shù)系統(tǒng)研究平臺(tái)啟動(dòng)。同時(shí)，該所通過舉辦培訓(xùn)班、開展競(jìng)賽等形式，推廣了快篩快檢技術(shù)在基層一線的應(yīng)用。

1.2.5 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

1.2.5.1 姜黃素納米載體顆粒的體內(nèi)吸收 選取健康SD種大鼠20 只隨機(jī)分為2 組，自由采食飲水，給予樣品前12 h禁食不禁水。分別給予姜黃素含量為100 mg/kg·bw·d的姜黃素納米載體顆粒和姜黃素溶液，并于灌胃后第0、15、30、45、60、90、120、180、240、300 min尾部采血0.3 mL，置入含有肝素的抗凝管中。

在血漿姜黃素的測(cè)定時(shí)，取100 μL血漿樣本加入10 μL大黃素（20 μg/mL），渦旋3 min后加入0.25 mL乙酸乙酯并劇烈振蕩搖勻，在4000 r/min條件下離心5 min，取上層有機(jī)相用以姜黃素的測(cè)定，測(cè)定方法見1.2.2。

1.2.5.2 運(yùn)動(dòng)性疲勞實(shí)驗(yàn) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛥⒖己闧23]稍加修改，選取健康大鼠60 只隨機(jī)分為5 組，即對(duì)照組（Blank）、疲勞模型組（Con）、疲勞低劑量組Low（20 mg/kg·bw·d）、疲勞中劑量組Mid（60 mg/kg·bw·d）和疲勞高劑量組High（100 mg/kg·bw·d）。除對(duì)照組外，四組疲勞組于第1 周無(wú)負(fù)重游泳至力竭，于第2 周鼠尾負(fù)重約體重5%、第3、4 周負(fù)重10%，水溫30 ℃，每周休息1 d并記錄體重?？倢?shí)驗(yàn)周期持續(xù)28 d，期間采用灌胃法給予樣品，對(duì)照組及模型組提供0.9%生理鹽水，其余每組按劑量組給予乳鐵蛋白-姜黃素納米載體顆粒3 mL/d，當(dāng)大鼠在水中沉沒持續(xù)10 s后未上浮即為力竭，記錄時(shí)間計(jì)為力竭時(shí)長(zhǎng)（min）。

1.2.6 肝臟、肌肉以及血清樣本的采集 分別于最后一次大鼠游泳前、游泳后0、30、60、90 min鼠尾采血，并置于抗凝管中，1500 r/min條件下離心5 min，后用以測(cè)定血乳酸的含量。鼠尾采血結(jié)束后立即處死大鼠，眼球取血，并將采集到的新鮮血液于4 ℃靜置1 h后，在1500 r/min條件下分離15 min取上層血清，分別用以測(cè)定血漿姜黃素水平、血乳酸（LA）、血尿素氮（BUN）含量。解剖后，摘取肱四頭肌及肝臟組織，用0.9%NaCl清理后制成10%組織勻漿，分別用以測(cè)定肌糖原（MG）、肝糖原（LG）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）含量嚴(yán)格按照試劑盒操作說(shuō)明測(cè)定，剩余血清保存于?70 ℃超低溫冰箱中備用。

1.3 數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用SPSS 19.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差（Mean±SD）表示，多樣本間比較采用T-Test，P<0.05 為差異顯著，P<0.01 為差異極顯著。采用Origin 2017 軟件進(jìn)行圖表處理及圖譜分析處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 姜黃素的HPLC分析及結(jié)構(gòu)表征

2.1.1 姜黃素的HPLC分析 血漿空白對(duì)照組、姜黃素標(biāo)準(zhǔn)品及血漿樣本液相色譜圖見圖1，線性回歸方程為Y=0.94X+234.82，R2=0.9963。

圖1 姜黃素標(biāo)品及血漿樣本Fig.1 Curcumin standard and plasma samples

2.1.2 姜黃素納米載體顆粒結(jié)構(gòu)表征 實(shí)驗(yàn)通過HPLC法測(cè)定姜黃素納米載體顆粒的負(fù)載率為（152.03±2.43）mg/g，包封率約為63.57%±0.74%；乳鐵蛋白和姜黃素納米載體顆粒的水溶液經(jīng)粒度分析儀測(cè)定所得粒徑分布圖如圖2，可以發(fā)現(xiàn)乳鐵蛋白（圖2A）和姜黃素納米載體顆粒（圖2B）的粒徑分布均較為均一，乳鐵蛋白粒徑（163.4 nm）明顯低于姜黃素納米載體顆粒（593.8 nm）。Chen等[24]在制備大豆分離蛋白姜黃素納米載體時(shí)發(fā)現(xiàn)，姜黃素負(fù)載量較高的納米顆粒會(huì)形成較大粒徑分布的顆粒體，與本文結(jié)果相符。這可能時(shí)由于乳鐵蛋白載體顆粒負(fù)載了姜黃素后，會(huì)通過姜黃素顆粒間的橋連作用，形成了更大粒徑的聚集體并能夠形成壓穩(wěn)定狀態(tài)的分散系。此外，通過CLSM（圖2C）實(shí)驗(yàn)結(jié)果也可以發(fā)現(xiàn)，姜黃素納米載體顆粒能夠以較為均一穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)在溶液中存在。

圖2 粒徑分布及CLSMFig.2 Particle size distribution and CLSM

2.1.3 姜黃素納米載體顆粒的體內(nèi)吸收 實(shí)驗(yàn)通過HPLC對(duì)大鼠6 h內(nèi)姜黃素的血藥濃度進(jìn)行了測(cè)定，并繪制了血藥濃度與時(shí)間的姜黃素動(dòng)態(tài)變化曲線如圖3。從圖中可以發(fā)現(xiàn)，姜黃素能夠迅速提升血藥濃度并在約30 min后達(dá)到峰值，隨后血藥濃度迅速降低并于60 min后血藥濃度趨于平緩，這可能是由于姜黃素水溶性極差，從而影響其直接服用[14]，此外由于首過效應(yīng)致使姜黃素在消化道滅活、代謝，進(jìn)入體循環(huán)的藥量減少[25]；而姜黃素納米顆粒則需要約50 min使血藥濃度達(dá)到峰值并能夠維持一段時(shí)間，隨后在4 h內(nèi)血藥濃度緩慢回落，這可能是由于姜黃素納米載體顆粒能極大提高姜黃素在溶液體系中的濃度，因而血藥濃度峰值較姜黃素水溶液高，另一方面納米載體顆粒對(duì)姜黃素起到了保護(hù)作用，降低了首過效應(yīng)，納米載體的緩釋效果也能夠使姜黃素在體內(nèi)得到更充分的吸收、代謝[26]。

圖3 姜黃素動(dòng)態(tài)變化Fig.3 Dynamic changes of Curcumin

2.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

2.2.1 運(yùn)動(dòng)型疲勞實(shí)驗(yàn) 通過力竭游泳運(yùn)動(dòng)的時(shí)長(zhǎng)能夠較為客觀的評(píng)判受試樣品的抗疲勞功效。在造模后各組大鼠在個(gè)體質(zhì)量上并未出現(xiàn)顯著差異（P>0.05），且無(wú)死亡樣本，但模型組終末體重略低于劑量組。根據(jù)表1 數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，模型組以及三組劑量組大鼠的力竭時(shí)長(zhǎng)與對(duì)照組相比極顯著降低（P<0.01），表明運(yùn)動(dòng)性疲勞造模成功。與模型組相比，低劑量組未能顯著提高力竭運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)（P>0.05），中、高劑量組能夠顯著提高力竭運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)（P<0.05），表明中、高劑量組的姜黃素納米載體顆粒具有良好的抗運(yùn)動(dòng)性疲勞效果，其中高劑量組效果更佳，時(shí)長(zhǎng)約提高了55.07%。

表1 大鼠體質(zhì)量與力竭運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)Table 1 Body weight and duration of exhaustive exercise in rats

2.2.2 乳酸變化曲線 通過對(duì)大鼠力竭游泳前后血乳酸含量變化的監(jiān)測(cè)，可以判斷大鼠的疲勞程度以及恢復(fù)狀況[27]，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖4，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示力竭游泳前運(yùn)動(dòng)性疲勞模型下大鼠的血乳酸含量極顯著高于對(duì)照組（P<0.01），且模型組與劑量組組間差異不顯著（P>0.05）。游后0 min，模型組、Low、Mid、High四組大鼠血乳酸分別上升了17.49%、13.32%、8.30%、7.69%；游后30 min，四組大鼠乳酸分別下降了1.35%、1.77%、2.28%、4.45%；60 min后，四組大鼠乳酸分別下降了2.76%、3.56%、4.89%、8.67%；90 min后，四組大鼠乳酸分別下降了3.89%、5.40%、7.14%、13.06%。可以發(fā)現(xiàn)，大鼠在給予高劑量后，其體內(nèi)的血乳酸含量較其他組別升高最少，并且在90 min內(nèi)血乳酸相對(duì)含量下降最快，表明姜黃素納米顆粒能具有減少乳酸堆積的功效，在運(yùn)動(dòng)性疲勞模型下減少乳酸堆積能力與劑量正相關(guān)。

圖4 血乳酸動(dòng)態(tài)變化Fig.4 Dynamic changes of blood lactic acid

2.3 肌糖原、肝糖原與血尿素氮

機(jī)體在運(yùn)動(dòng)的過程中會(huì)首先消耗肌糖原，為了維持運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度所需的能量供給會(huì)逐漸消耗肝糖原。因而機(jī)體肌糖原與肝糖原的水平降低與體力耗盡具有一定相關(guān)性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。在運(yùn)動(dòng)性疲勞模型下大鼠的肝糖原均極顯著低于對(duì)照組（P<0.01），與模型組相比經(jīng)喂飼納米顆粒的劑量組大鼠肝糖原均有極顯著提升（P<0.01）；與對(duì)照組相比,模型組與低劑量組大鼠的肌糖原含量均顯著降低（P<0.01，P<0.05），而中、高劑量組大鼠的肌糖原差異不顯著（P>0.05），與模型組相比僅高劑量組差異顯著（P<0.05）且含量高于模型組；血尿素氮含量的統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示三組劑量組均能夠極顯著降低血尿素氮含量（P<0.01）。表明姜黃素納米載體顆粒能夠提高肌糖原與肝糖原的儲(chǔ)備，并能夠緩減體內(nèi)蛋白質(zhì)的消耗降低血尿素氮的含量。

表2 肝糖原、肌糖原與血尿素氮Table 2 Liver glycogen,muscle glycogen and blood urea nitrogen

2.4 體內(nèi)抗氧化活性分析

疲勞癥狀的出現(xiàn)通常與機(jī)體自由基水平升高有著密切聯(lián)系，通過對(duì)血液和組織中抗氧化物酶活性的檢測(cè)能夠較為清晰的反應(yīng)機(jī)體自由基蓄積水平。本實(shí)驗(yàn)通過SOD、GSH活性以及MDA含量解析姜黃素納米載體顆粒的抗氧化活性，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表3。

表3 姜黃素納米顆粒載體對(duì)大鼠生化指標(biāo)的影響Table 3 Effects of curcumin nanoparticles on biochemical indexes in rats

SOD：經(jīng)造模的四組疲勞組的SOD酶活性極顯著低于對(duì)照組（P<0.01），與模型組相比三組劑量組均能夠顯著（極顯著）提高SOD酶的活性(P<0.05、P<0.01)，低、中、高劑量組分別提高了7.72%、11.96%和20.06%。

GSH：模型組的GSH酶活性極顯著低于對(duì)照組（P<0.01），與對(duì)照組相比,低劑量組GSH酶活性極顯著降低（P<0.01），而中、高劑量組能夠使GSH水平恢復(fù)至對(duì)照組水平（P>0.05）；與模型組相比,低劑量組能夠顯著提高GSH酶活性（P<0.05），而中、高劑量組能夠極顯著提高GSH活性（P<0.01）。

MDA：運(yùn)動(dòng)性疲勞模型下的四組大鼠血清中丙二醛的含量極顯著高于對(duì)照組（P<0.01），經(jīng)喂飼姜黃素納米載體顆粒后，三組劑量組均能使機(jī)體內(nèi)丙二醛水平極顯著低于模型組（P<0.01），其中高劑量組效果最佳，下降了約30.66%。

3 討論

姜黃素的親脂特性致使其在人體消化系統(tǒng)中表現(xiàn)出較差的吸附性，姜黃素結(jié)構(gòu)中的羥基結(jié)構(gòu)極易發(fā)生氧化反應(yīng)而變性[28]，姜黃素得不到有效的吸收，因而生物利用率極低，而通過應(yīng)用納米載體顆粒傳遞體系使該問題得到顯著改善。通過包封率和負(fù)載率的測(cè)定，可以發(fā)現(xiàn)姜黃素在溶液體系中的溶解性大大提高；粒徑與CLSM的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)較好的說(shuō)明，納米載體顆粒在溶液體系中能夠以穩(wěn)定、均一的狀態(tài)分散；通過比對(duì)納米載體顆粒與姜黃素單體溶液的大鼠體內(nèi)吸收實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，納米載體顆粒溶液首過效應(yīng)大大降低，并能夠在人體內(nèi)存留更長(zhǎng)時(shí)間，起到了緩釋作用使人體吸收更充分[29]。隨后通過力竭游泳建立了運(yùn)動(dòng)性疲勞大鼠模型，通過4 周力竭游泳造模后大鼠的終末體質(zhì)量均有所減少，而在分別飼喂低、中、高劑量組的納米載體顆粒后發(fā)現(xiàn)，與模型組相比三組劑量組均能夠不同程度提高耐力運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)，其中高劑量組提升效果最為明顯，表明其抗疲勞效果與劑量相關(guān)；通過對(duì)力竭運(yùn)動(dòng)后大鼠血乳酸動(dòng)態(tài)變化的監(jiān)測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)，納米載體顆粒能夠有效加速血乳酸代謝水平，一定程度上延緩了由于糖原消耗過導(dǎo)致血乳酸堆積而誘發(fā)的肌肉收縮能力下降[30]，表現(xiàn)為增強(qiáng)了大鼠耐力運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)，此外，肌糖原與肝糖原儲(chǔ)備量的提升也能夠一定程度延緩血乳酸的堆積[31]，同時(shí)降低了長(zhǎng)期運(yùn)動(dòng)誘使的蛋白質(zhì)代謝所產(chǎn)生的血尿素氮含量[32]；機(jī)體疲勞的產(chǎn)生與氧化應(yīng)激水平密不可分，在長(zhǎng)期或高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)的情況下，機(jī)體內(nèi)活性氧自由基的產(chǎn)生會(huì)遠(yuǎn)超越其清除速率致使細(xì)胞受到氧化損傷[33]，實(shí)驗(yàn)通過對(duì)SOD、GSH-Px酶活性的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)姜黃素納米載體顆粒能夠加速活性氧自由基的清除速率從而保護(hù)組織和器官免受氧化損傷，并最終表現(xiàn)為過氧化代謝產(chǎn)物MDA含量的顯著降低，其抗氧化活性越高其耐力運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)越長(zhǎng)，表明乳鐵蛋白-姜黃素納米載體顆粒具有一定的抗疲勞功效。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)制備了一種具有較好包封率和負(fù)載率的乳鐵蛋白姜黃素納米載體顆粒，該顆粒在水溶液體系中具有良好的穩(wěn)定性，較姜黃素單體溶液極大的提升了單位體積內(nèi)姜黃素的溶解度，并通過大鼠體內(nèi)吸收實(shí)驗(yàn)充分佐證了其在機(jī)體內(nèi)也具備良好的緩釋作用以及保護(hù)作用，一定程度上降低了首過效應(yīng)并延長(zhǎng)了姜黃素在機(jī)體內(nèi)的存留時(shí)間，從而間接提升了其生物可利用率；通過運(yùn)動(dòng)型疲勞模型可以發(fā)現(xiàn)，納米載體顆粒能夠有效提升抗氧化物酶活性、提高機(jī)體糖原儲(chǔ)備、加速血乳酸代謝從而降低由長(zhǎng)期高或強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)引發(fā)的氧化代謝產(chǎn)物堆積、降低機(jī)體氧化應(yīng)激水平、減輕氧化損傷，并最終表現(xiàn)為大鼠力竭耐力運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)的提升，表明其具有一定的抗疲勞功效。

綜上，乳鐵蛋白姜黃素納米載體顆粒傳遞體系能夠有效提升姜黃素的生物可利用率，從而保障了其充分發(fā)揮抗疲勞活性，以期為姜黃素類相關(guān)抗疲勞制品提供理論參考。