吳曉利

（江南大學(xué)無錫醫(yī)學(xué)院，江蘇無錫 214122）

乙型肝炎病毒（HBV）是引發(fā)乙型肝炎的主要病原體，人體在感染乙型肝炎病毒之后的過程是一個連續(xù)且動態(tài)的，所以需要選擇一個良好的診斷方式來進(jìn)行相關(guān)的診斷[1]。PCR-ELISA 主要是通過檢測免疫標(biāo)志物，如抗一HBe、HBsAg、HBeAg、抗一HBs、抗一HBc 等，能夠?qū)Σ《镜膶?shí)際狀況進(jìn)行比較準(zhǔn)確的反應(yīng)，但是在運(yùn)用的過程中仍然存在一定的局限性。實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測HBv-DNA 含量就可以直接體現(xiàn)出乙型肝炎病毒的復(fù)制情況，所以整體的敏感性和特異性都比較高[2]。本次研究主要針對實(shí)時(shí)熒光定量PCR 與PCR-ELISA 在乙型肝炎病毒DNA 定量檢測中的應(yīng)用效果進(jìn)行了對比分析。

1 資料與方法

1.1 臨床基礎(chǔ)資料

選擇2018 年9 月—2020 年9 月收治的乙型肝炎患者22 例，將患者分成ELISA 組和PCR 組，每組均為11 人。其中，ELISA 組中的男性6 人，女性5人，年齡在25～68 歲，平均（43.82±1.28）歲；PCR組中的男性7 人，女性4 人，年齡在26～69 歲，平均（43.86±1.31）歲，以上一般資料對比P＞0.05。

1.2 方法

HBV-DNA 主要通過COBAS Amplicor 系統(tǒng)檢測，其中試劑盒由上海復(fù)星科技有限公司提供，所有的檢測操作都嚴(yán)格按照相關(guān)的規(guī)定進(jìn)行（ELISA 組）。乙型肝炎病毒免疫標(biāo)志物采用Light Cycler 配合達(dá)安試劑檢測，試劑盒主要由廈門新創(chuàng)公司提供（PCR 組）。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察分析兩組患者的可測定范圍、重復(fù)性、臨床標(biāo)本檢測結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

SPSS20.0 檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，將計(jì)數(shù)資料進(jìn)行χ2值檢驗(yàn)，對計(jì)量資料進(jìn)行T值檢驗(yàn)，P＜0.05 具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 檢測方法的可測定范圍比較

如表1 所示，兩種檢測結(jié)果差異不大，而且與血清的稀釋度有一致性，但是相比而言，Light Cycler 配合達(dá)安試劑的靈敏度比較低。

表1 兩組檢測方法的可測定范圍比較

2.2 檢測方法的重復(fù)性比較

檢測方法的重復(fù)性見表2。乙型肝炎病毒是檢測乙型肝炎疾病最主要的檢測標(biāo)志物，在整個乙性肝炎疾病藥物治療的過程中，對人體內(nèi)乙型肝炎病毒DNA 定量檢測是十分重要的。目前，臨床上檢測乙型肝炎病毒DNA 的定量方式有很多種，其中COBAS Amplicor 檢測HBV-DNA 的方法已經(jīng)獲得了國際范圍的認(rèn)可，所以整體的準(zhǔn)確性和重復(fù)性都比較高[3]。在應(yīng)用該種方法進(jìn)行檢測時(shí)，主要采用內(nèi)對照的方式，這樣可以有效地對病毒核酸的抽提以及擴(kuò)增效果進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)測，同時(shí)還能夠有效減少人體內(nèi)受到干擾因素的影響，所以在整個監(jiān)測過程中都能夠?qū)?biāo)本的初始狀態(tài)中所含有的靶核酸的含量進(jìn)行嚴(yán)格控制。但是該種檢測方式的實(shí)際價(jià)格十分昂貴，很難在臨床以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)中廣泛應(yīng)用。相比COBAS Amplicor，通過熒光定量PCR 檢測具有費(fèi)用低、省時(shí)省力等優(yōu)勢，所以目前該種方法在臨床上的應(yīng)用也比較常見[4]。

表2 檢測方法的重復(fù)性比較

2.3 臨床標(biāo)本檢測結(jié)果比較

具體標(biāo)本檢測結(jié)果詳情見表3。相比而言，Light Cycler 儀器的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的靈敏度要低于COBAS Amplicor，但是在臨床應(yīng)用過程當(dāng)中仍然可以滿足人們的需求。COBAS Amplicor 系統(tǒng)的CV 較低，所以具有較好的重復(fù)性[5]。在與COBAS Amplicor 對比的過程當(dāng)中也有較好的相關(guān)性，所以通過國產(chǎn)試劑配合進(jìn)口儀器進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR 的檢測具有一定的臨床價(jià)值。但是在應(yīng)用過程當(dāng)中一定要注意，由于國產(chǎn)的試劑盒不同制造批次所表現(xiàn)出來的質(zhì)量也不同，所以在選擇的時(shí)候一定要做好相關(guān)的管理和判斷。另外還要注意的是乙性肝炎病毒的發(fā)展程度所受到的相關(guān)因素影響比較多，例如患者自身的遺傳因素、免疫狀態(tài)以及病毒變異情況等，患者在感染乙型肝炎病毒之后整體的疾病發(fā)展是進(jìn)行狀態(tài)中的，所以臨床的相關(guān)醫(yī)護(hù)人員也要注意[6]。

3 結(jié)語

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)具有費(fèi)用低、省時(shí)等特點(diǎn)，PCR-ELISA 技術(shù)具有價(jià)格昂貴、重復(fù)性和靈敏度高等特點(diǎn)，實(shí)際臨床應(yīng)用中要根據(jù)具體情況選擇合適的方法進(jìn)行檢測。

表3 臨床標(biāo)本檢測結(jié)果比較