周淼

甲酸是一種無色而有刺激氣味的液體。中國藥典規(guī)定藥物中甲酸殘留量不得大于5000ppm，但沒有統(tǒng)一的測定方法，為了保障藥物的質(zhì)量和用藥安全，在藥物分析中，能為甲酸含量的測定建立一個合適的方法，尤為重要。

本次試驗主要利用高效液相法測定藥物中甲酸含量，通過對方法的精密度、線性范圍、耐用性、專屬性、定量限及檢測限的檢測，以證明該方法適用測定甲酸殘留量的檢測要求。

1.色譜條件

色譜柱：C18，250mm×4.6mm，5μm

流動相：0.05mol/L的磷酸二氫鉀溶液，用磷酸調(diào)PH值為2.8，用0.45μm的微孔濾膜過濾，超聲。

檢測波長：210nm

檢測溫度：40℃

進(jìn)樣量：20ul

流速：0.3ml/min

運(yùn)行時間：15min

2.試驗方法

2.1甲酸含量的測定

精密量取1.0ml甲酸，放入預(yù)先盛有約20ml無二氧化碳的磨口的三角瓶中，加2～3滴酚酞指示液，用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定液（0.5mol/L）滴定至淺粉色，30秒不褪色即為終點。標(biāo)定4份取平均值。

計算：

X= %

X1= =95.0%

X2= =95.2%

X3= =95.3%

X4= =95.2%

甲酸含量均值為95.2%

2.2精密度

2.2.1 溶液制備：

☆甲酸貯備溶液：精密吸取50μl的甲酸試劑置50ml容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。

☆精密吸取甲酸貯備溶液2ml，置25ml容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。甲酸的濃度為76ug/ml。

2.2.2步驟與結(jié)果

取上述對照溶液20μl注入色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，精密度試驗結(jié)果如下：

2.3準(zhǔn)確度試驗

2.3.1測定方法：以已知甲酸含量的阿奇霉素樣品為參考品，以甲酸貯備液為待測品，將待測品加入到參考品，通過實測甲酸含量與加入含量比較，計算回收率。

2.3.2溶液制備：

精密稱取阿奇霉素樣品 2.0167g置25ml容量瓶中，加PH1.6磷酸鹽緩沖液溶解，并稀釋至刻度，搖勻（溶液PH值為2.8），作為供試品溶液。

回收溶液（1）：精密稱取阿奇霉素2.0542g置25ml容量瓶中，加PH1.6磷酸鹽緩沖液溶解，加入吸取0.3ml甲酸貯備液，再用PH1.6磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻（溶液PH值為2.8）。

回收溶液（2）：精密稱取阿奇霉素2.1452g置25ml容量瓶中，加PH1.6磷酸鹽緩沖液溶解，加入吸取0.5ml甲酸貯備液，再用PH1.6磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻（溶液PH值為2.8）。

回收溶液（3）：精密稱取阿奇霉素2.0639g置25ml容量瓶中，加PH1.6磷酸鹽緩沖液溶解，加入吸取1.0ml甲酸貯備液，再用PH1.6磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度（溶液PH值為2.8），搖勻。

2.3.3回收率試驗結(jié)果如下 ：

試驗結(jié)果表明回收率平均值為? 102.8 %，此方法的回收率好。

2.4檢測限、定量限

根據(jù)信噪比為3確定檢測限，信噪比為10確定檢定量限，檢測限濃度為2.86ug/ml，定量限濃度為9.52ug/ml。

2.5線性

分別精密吸取甲酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液0.25、0.5、1.0、2.0、5.0ml置25ml容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。取過濾液20μl進(jìn)樣。利用峰面積為y軸與甲酸含量（以μg計）為x軸，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。