○尹文靜

微生態(tài)制劑是一類對(duì)動(dòng)物機(jī)體有益的生物活菌，可以改善動(dòng)物胃腸道內(nèi)的菌群平衡，促進(jìn)腸道健康。微生態(tài)制劑可以在酸性的動(dòng)物胃腸道內(nèi)穩(wěn)定定植和生長(zhǎng)，能有效地抑制對(duì)動(dòng)物機(jī)體有害的菌群，如大腸桿菌、沙門氏菌等，可以顯著提高動(dòng)物機(jī)體的免疫功能，之前機(jī)體抗病力，也可以參與機(jī)體的新陳代謝，進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育。目前，在畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)中微生態(tài)制劑主要有乳酸桿菌、芽孢桿菌、雙歧桿菌、酵母菌等，可以單獨(dú)添加到動(dòng)物飼料中，也可混合添加，一般情況下，混合添加的效果優(yōu)于單獨(dú)添加。烏鱧肉質(zhì)鮮美，具有驅(qū)寒補(bǔ)血、較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。隨著抗生素的禁止使用，微生態(tài)制劑最近幾年研究較為廣泛，微生態(tài)制劑添加于魚類日糧中，可以促進(jìn)魚類生長(zhǎng)、改善腸道健康、提高免疫力。本試驗(yàn)以烏鱧為研究對(duì)象，探討其日糧中添加不同劑量的微生態(tài)制劑對(duì)其免疫功能的影響，并確定其最適添加量，以期為微生態(tài)制劑科學(xué)、合理地應(yīng)用于烏鱧的養(yǎng)殖中提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用微生態(tài)制劑采購(gòu)于山東寶來(lái)生物科技有限公司，微生態(tài)制劑由乳酸桿菌、芽孢桿菌和酵母菌組成，其比例為2：1：1，有效活菌數(shù)為1×109CFU/g。試驗(yàn)所用烏鱧購(gòu)買于當(dāng)?shù)貪O場(chǎng)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取100尾體重相近、規(guī)格整齊、健康的烏鱧按照單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，隨機(jī)分為4組，每組包含5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5尾。對(duì)照組烏鱧飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)1組、2組、3組烏鱧飼喂分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.4%、0.8%、1.2%的微生態(tài)制劑的基礎(chǔ)日糧，預(yù)試驗(yàn)1周，正式試驗(yàn)8周。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧原料組成和營(yíng)養(yǎng)成分含量如下表1所示。

表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧原料組成和營(yíng)養(yǎng)成分含量

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)開始前對(duì)烏鱧馴化1周，飼喂基礎(chǔ)日糧。每日換水量為1/3。試驗(yàn)中保持水溫在26-28℃，每日24小時(shí)充氧。每天的飼喂量為魚體重的2.5%-3.5%投喂。每天8：30和16：30各投喂1次，可根據(jù)烏鱧攝食情況決定投喂量。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

試驗(yàn)8周結(jié)束時(shí)，烏鱧禁食12小時(shí)，通過(guò)尾靜脈采血，經(jīng)4℃、4000r/min離心10分鐘，用移液槍吸取上層血清于-20℃保存?zhèn)溆?，用于測(cè)定烏鱧免疫指標(biāo)。免疫指標(biāo)主要包括溶菌酶（LZM）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH、過(guò)氧化氫酶（CAT）活性及總抗氧化能力（TAOC），試劑盒購(gòu)買于南京建成生物工程研究所。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行檢測(cè)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel2020進(jìn)行整理統(tǒng)計(jì)后，再采用SPSS22.0進(jìn)行單因素的方差分析，并用鄧肯法對(duì)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較，P＜0.05作為顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果用平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)誤呈現(xiàn)。

2 結(jié)果

烏鱧日糧添加不同水平的微生態(tài)制劑對(duì)其免疫功能的影響見(jiàn)表2。由表2數(shù)據(jù)可知，在烏鱧日糧中添加一定含量的微生態(tài)制劑可以顯著提高烏鱧機(jī)體的免疫功能。其中，試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組烏鱧血清中的總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性、溶菌酶活性顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)1組烏鱧血清中總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性、溶菌酶活性有比對(duì)照組提高的趨勢(shì)，但與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）。烏鱧日糧添加不同水平的微生態(tài)制劑對(duì)烏鱧血清中谷胱甘肽活性和過(guò)氧化氫活性無(wú)顯著影響（P＞0.05）。說(shuō)明在烏鱧日糧中添加適量的微生態(tài)制劑顯著提高了烏鱧的免疫力。

表2 試烏鱧日糧添加不同水平的微生態(tài)制劑對(duì)其免疫功能的影響

3 討論

魚類機(jī)體內(nèi)的溶菌酶是機(jī)體非特異性生物防御因子之一，對(duì)魚類機(jī)體的免疫功能起著至關(guān)重要的作用，溶菌酶可以消化和殺滅外來(lái)的致病菌，提高機(jī)體的抗病力。而魚類機(jī)體內(nèi)的總抗氧化能力、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶等可以有效地清除機(jī)體內(nèi)因氧化應(yīng)激產(chǎn)生的多余的自由基，可以延緩機(jī)體衰老及活性氧對(duì)機(jī)體的損害，進(jìn)而提高機(jī)體的免疫力及抗氧化能力。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，在烏鱧日糧中添加適量的微生態(tài)制劑可以顯著提高烏鱧的總抗氧化能力、溶菌酶活性及長(zhǎng)氧化物歧化酶活性，說(shuō)明適量的微生態(tài)制劑顯著提高了機(jī)體的免疫功能。研究表明，微生態(tài)制劑能顯著提高血清溶菌酶及超氧化物歧化酶活性，且復(fù)合微生態(tài)制劑對(duì)魚類機(jī)體的免疫力效果更好。本試驗(yàn)結(jié)果與前人研究結(jié)果類似，微生態(tài)制劑提高魚類機(jī)體免疫力與其含有的有益菌可改善機(jī)體腸道健康、提高胃腸道消化酶活性、提高對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收有關(guān)。因此，微生態(tài)制劑可以廣泛地應(yīng)用于魚類養(yǎng)殖生產(chǎn)中。

4 結(jié)語(yǔ)

本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，在烏鱧日糧中添加適量的微生態(tài)制劑可以顯著提高烏鱧的總抗氧化能力、溶菌酶活性及長(zhǎng)氧化物歧化酶活性，提高了烏鱧的免疫功能，結(jié)合本試驗(yàn)數(shù)據(jù)及成本考慮，微生態(tài)制劑最適添加量為0.8%。

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