藺麗麗，邵盛男，李永利，于勝利，常 悅、郭 倩，陳玉珂

(1.吉林省水產(chǎn)技術(shù)推廣總站，吉林 長春 130012；2.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，上海 200090；3.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林 長春 130118)

輪蟲作為天然水體中主要浮游生物之一，因其繁殖迅速、營養(yǎng)豐富、體形大小適宜、能通過一定技術(shù)手段進行大量培養(yǎng)、容易被水產(chǎn)動物幼體攝食和消化吸收等優(yōu)點，被廣泛用于魚、蝦等水產(chǎn)動物的開口餌料。氨氮是我國大部分水系中主要污染指標(biāo)，水質(zhì)中氨氮濃度嚴(yán)重超標(biāo)將影響水生動物的生長，對水生動物的許多器官造成損傷，甚至導(dǎo)致其發(fā)病死亡。

在輪蟲培育過程中，輪蟲的種群生長與培養(yǎng)水體的水質(zhì)、溫度等因素密切相關(guān)，尤其在輪蟲大規(guī)模培養(yǎng)過程中一些環(huán)境因子的改變會直接導(dǎo)致輪蟲的大批量死亡，其中氨氮濃度的增加是影響輪蟲培養(yǎng)的重要因素之一。在輪蟲工廠化大規(guī)模培養(yǎng)過程中常常會采用施肥培養(yǎng)微藻或潑灑豆?jié){等方法豐富輪蟲餌料以提高其密度，然而這些肥料和餌料增加常會伴隨著有機物的不斷積累和不斷分解，從而導(dǎo)致水體中氨氮的大量積累，進而嚴(yán)重制約輪蟲產(chǎn)量的增長，甚至導(dǎo)致輪蟲的大批死亡。也有許多研究表明培養(yǎng)水體中輪蟲種群密度的降低往往伴隨著氨氮濃度的升高。Schlüt er M等(1985)研究大量培養(yǎng)過程中培養(yǎng)水體中非離子氨對海水輪蟲種群增長的影響時發(fā)現(xiàn)，當(dāng)水體中非離子氨濃度達到13.2毫克/升時輪蟲的種群增長率降低50%。Par k等(2001)研究氨氮對淡水萼花臂尾輪蟲急性毒性影響時得到氨氮在24、48和96小時的半致死濃度分別為12.3、6.7和2.3毫克/升。因此，工廠化輪蟲培養(yǎng)過程中嚴(yán)格控制水體中氨氮含量是提高輪蟲產(chǎn)量的重要技術(shù)手段。

本實驗通過研究圓形臂尾輪蟲在不同氨氮濃度、時間條件下對輪蟲的種群增長、懷卵率的影響，以探究氨氮對輪蟲的半致死濃度，進而得到在培養(yǎng)輪蟲過程中培養(yǎng)水體氨氮的安全濃度，為輪蟲的大批量培養(yǎng)等生產(chǎn)實踐及相關(guān)研究提供數(shù)據(jù)支持和理論指導(dǎo)。

一、材料與方法

1.輪蟲的來源和培養(yǎng)

試驗用圓形臂尾輪蟲來自吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)實驗室。輪蟲以鹽度為30的人工配制海水預(yù)培養(yǎng)，培養(yǎng)期間保持連續(xù)充氣，自然光照，溫度為(25±1)℃，pH為7.3～7.8。輪蟲餌料采用酵母溶液，每天投餌1次，投喂量為8×106個/毫升。

2.個體培養(yǎng)試驗

采用12孔細胞培養(yǎng)板做個體培養(yǎng)試驗。每孔加入鹽度為30的海水3毫升，輪蟲接種密度為1個/毫升。用氯化銨調(diào)節(jié)水體氨氮濃度分別為0、0.625、1.25、2.5、5、10、20毫克/升，分別在12、24、48、96小時計數(shù)培養(yǎng)板中輪蟲數(shù)量及懷卵率，每組8個重復(fù)。試驗溫度為(25±1)℃，光照為晝12∶夜12，輪蟲餌料為酵母溶液，投喂量為6.4×106個/毫升，每天投喂兩次。

3.試驗指標(biāo)的計算

懷卵率(%)＝懷卵個數(shù)/輪蟲總數(shù)×100

二、結(jié)果

1.不同氨氮濃度、時間對輪蟲存活率的影響

試驗結(jié)果表明，當(dāng)氨氮濃度小于2.5毫克/升時，隨著培養(yǎng)時間的延長，輪蟲種群密度均呈增加趨勢；當(dāng)氨氮濃度大于5毫克/升時，隨著氨氮濃度的增加，輪蟲種群增殖時間不斷縮短，即當(dāng)氨氮濃度5毫克/升時，在培養(yǎng)12～48小時種群數(shù)量基本維持穩(wěn)定，至96小時呈下降趨勢；而當(dāng)氨氮濃度為10毫克/升或20毫克/升時，在培養(yǎng)至24小時即出現(xiàn)種群數(shù)量下降，直至全部死亡。

2.不同氨氮濃度、時間對輪蟲懷卵率的影響

輪蟲懷卵率試驗結(jié)果表明，隨著氨氮濃度的升高，輪蟲的懷卵數(shù)量不斷減少。當(dāng)氨氮濃度低于5毫克/升時，輪蟲的懷卵率在培養(yǎng)24小時后呈下降趨勢；而當(dāng)氨氮濃度為10毫克/升或20毫克/升時(高于5毫克/升)，輪蟲的懷卵率在培養(yǎng)12小時后即呈下降趨勢；氨氮濃度為0.625、1.25、10、20毫克/升4組的懷卵率第48小時較第24小時均有所升高，且1.25毫克/升組＞0.625毫克/升組＞10毫克/升組＞20毫克/升組，但在培養(yǎng)至96小時，高氨氮濃度的10毫克/升組和20毫克/升組懷卵數(shù)量均為0。

三、討論

氨氮是富營養(yǎng)化水體重要的氮形態(tài)之一，高濃度的非離子態(tài)氨和銨根離子會對輪蟲產(chǎn)生應(yīng)激作用，影響輪蟲的增殖，因此輪蟲不能耐受較高濃度的氨氮。從本試驗結(jié)果來看，氨氮濃度越高，輪蟲的種群密度下降點出現(xiàn)得越早，懷卵數(shù)量也越少。可以認(rèn)為當(dāng)水體里的氨氮濃度升高，對輪蟲產(chǎn)生了較強的應(yīng)激，影響了輪蟲的正常生理活動，抑制了其繁殖。輪蟲在遇到較強的外界環(huán)境變化時，會以產(chǎn)生休眠卵的形式來抵抗這種應(yīng)激，因此，本試驗中當(dāng)氨氮濃度為0.625、1.25、10、20毫克/升時，輪蟲的懷卵率在第48小時較第24小時均有所升高，這應(yīng)該是輪蟲抵抗高濃度氨氮產(chǎn)生休眠卵的結(jié)果。實際生產(chǎn)中，高密度培養(yǎng)輪蟲時，氨氮是影響其培養(yǎng)密度的重要因素之一。從本試驗結(jié)果來看，應(yīng)盡量降低水體中的氨氮濃度，以提升輪蟲的繁殖速度，促進種群增殖。