張國福，薛 雯，王紅艷，于志波，張耀中，吳亞玉，金 巖*

(1.山東省農(nóng)藥檢定所，山東 濟(jì)南 250100；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，山東 泰安 271018)

姜(ZingiberofficinaleRosc.)為姜科姜屬的多年生草本植物，是一種重要的經(jīng)濟(jì)作物，在我國種植廣泛，具有重要的經(jīng)濟(jì)價值[1-3]。在姜的整個生育期中，病蟲害種類繁多，其中姜炭疽病發(fā)生較普遍，主要危害葉片、葉鞘和莖，病斑多從葉尖、葉緣開始，初為水漬狀褐色小斑，后擴(kuò)展成梭形、橢圓形或不定形病斑，到發(fā)病后期，數(shù)個病斑連合成斑塊，葉片變褐變枯，嚴(yán)重影響光合作用[7-9]。通常病株率30%～50%，輕度影響生產(chǎn)，少數(shù)發(fā)病較重的地區(qū)，病株率達(dá)80%以上，可導(dǎo)致部分植株枯死，嚴(yán)重影響生姜的品質(zhì)、產(chǎn)量和種植者的收益[5-6]。

姜炭疽病病原菌是膠胞炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)和辣椒刺盤孢菌(Colletotrichumcapsici)，在北方病菌以菌絲體和分生孢子盤在病部或隨病殘體在土壤中越冬，南方病原在田間寄主作物上輾轉(zhuǎn)傳播為害，無明顯越冬期。本研究開展了450g/L咪鮮胺水乳劑和25%嘧菌酯懸浮劑防治姜炭疽病的室內(nèi)活性測定、安全性及田間藥效試驗，以期為評價防治姜炭疽病有效、安全的農(nóng)藥品種提供相關(guān)的田間防治技術(shù)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料 供試菌種：姜炭疽病菌從山東省泰安市范鎮(zhèn)大姜田炭疽病發(fā)病病株上分離得到，采用常規(guī)PDA培養(yǎng)基進(jìn)行純化培養(yǎng)并分離鑒定。

供試植物：魯姜一號、魯中大姜和山農(nóng)一號3個主栽品種進(jìn)行藥劑安全性試驗，選擇生長一致的3～4葉期生姜植株。

試驗場地：青島市萊西樸木前水口村；江西省永豐縣沙溪鎮(zhèn)梅林村；陜西省漢中市勉縣新街子鎮(zhèn)。

1.2 試驗藥劑 97%咪鮮胺原藥；450g/L咪鮮胺水乳劑；95%嘧菌酯原藥；25%嘧菌酯懸浮劑。

將97%咪鮮胺原藥、95%嘧菌酯原藥配成1×104mg/L母液，其中溶劑為丙酮，于冰箱中4℃下貯藏備用，使用時用含有0.1%的吐溫80的水溶液稀釋至適當(dāng)濃度。

1.3 試驗方法

1.3.1 室內(nèi)活性測定試驗 采用菌絲生長速率法測定2種殺菌劑對姜炭疽病菌的抑制作用。將姜炭疽病菌接種于PDA培養(yǎng)基上，于25±1℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)預(yù)培養(yǎng)3d，用直徑7mm的打孔器在靠近菌落邊緣的同一圓周上打取菌餅，接種到含有不同藥劑濃度的培養(yǎng)基平板上(咪鮮胺：0.012 5、0.025、0.05、0.1、0.2mg/L；嘧菌酯：1.25、2.5、5.0、10.0、20mg/L)，每皿一片，置于25±1℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)3d，用十字交叉法測定各處理的菌落生長直徑，以清水為對照。每濃度處理重復(fù)4次。通過菌絲生長抑制概率值和藥劑濃度對數(shù)值之間的線性回歸分析，求出各藥劑對菌株的有效抑制中濃度(EC50值)、置信區(qū)間及相關(guān)系數(shù)(r)[10-11]。

1.3.2 作物安全性試驗方法 按照《農(nóng)藥對作物安全性評價準(zhǔn)則》(NY/T 1965.1-2010)要求，450g/L咪鮮胺水乳劑設(shè)置 45、90、180mL/667m23個劑量，25%嘧菌酯懸浮劑設(shè)置60、120、240mL/667m23個劑量，以清水處理為對照，共4個處理，每個重復(fù)5盆，每盆播種2個姜塊，隨機(jī)區(qū)組排列，重復(fù)4次。選擇生長一致的3～4葉期生姜植株，采用ASS-4型定量噴霧塔從低劑量到高劑量順序進(jìn)行噴霧處理，以清水處理為空白對照。將處理后的生姜植株放置在環(huán)境條件為溫度20～30℃、濕度為80%的玻璃溫室內(nèi)培養(yǎng)(光暗比為14：10)，根據(jù)需要定量澆水。于施藥后7、14、21d調(diào)查生姜植株株高以及葉片數(shù)，同時觀察生姜植株形態(tài)、葉片顏色等有無變化。

1.3.3 田間藥效試驗方法 采用新加坡利農(nóng)HD-400型背負(fù)式手動噴霧器進(jìn)行全株莖葉均勻噴霧處理。試驗藥液濃度(表1)，小區(qū)面積為15～20m2，重復(fù)4次，隨機(jī)區(qū)組排列。于姜炭疽病發(fā)病前開始施藥，每次施藥間隔7～10d，共施藥3次。

表1 試驗處理設(shè)計

于末次施藥后7～10d，調(diào)查病情指數(shù)。每小區(qū)采用5點取樣，每點調(diào)查3株，每株調(diào)查10個葉片，并根據(jù)以下方法分別予以記錄

分級方法：

0級：無病斑；

1級：病斑面積占整個葉面積的5%以下；

3級：病斑面積占整個葉面積的6%～10%；

5級：病斑面積占整個葉面積的11%～25%；

7級：病斑面積占整個葉面積的26%～50%；

9級：病斑面積占整個葉面積的50%以上。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 調(diào)查結(jié)果按下列公式進(jìn)行統(tǒng)計。

試驗數(shù)據(jù)均由Microsoft Excel 2007、DPS數(shù)據(jù)處理工作平臺進(jìn)行統(tǒng)計分析，計算毒力回歸式、EC50值及相關(guān)系數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)活性測定試驗結(jié)果

表2 咪鮮胺和嘧菌酯對姜炭疽病菌的生物活性測定結(jié)果

(表2)可以看出：咪鮮胺和嘧菌酯對姜炭疽病菌均具有較高的生物活性，其中咪鮮胺對姜炭疽病菌的活性高于嘧菌酯，兩者對姜炭疽病菌的EC50值分別為0.076mg/L和1.59mg/L。咪鮮胺和嘧菌酯能夠有效的抑制姜炭疽病菌菌絲的生長，可以作為防治姜炭疽病的備選藥劑進(jìn)行田間藥效驗證。

2.2 作物安全性試驗結(jié)果

表3 450克/升咪鮮胺水乳和25%嘧菌酯懸浮劑劑對生姜安全性系數(shù)測定結(jié)果

試驗可知，450g/L咪鮮胺水乳在45、90、180mL/667m2制劑量下；25%嘧菌酯懸浮劑在60、120、240mL/667m2制劑量下噴霧處理生姜苗期植株，對3種品種的生姜葉片數(shù)、株高、生長速率以及生長速率抑制率無明顯影響，且無明顯藥害癥狀出現(xiàn)。兩種藥劑對生姜的安全系數(shù)為4.0。

2.3 田間藥效試驗結(jié)果 450g/L咪鮮胺水乳劑防治姜炭疽病田間藥效試驗結(jié)果表明(表4)：3個試驗地中450g/L咪鮮胺水乳劑對姜炭疽病均有較好的防治效果，末次藥后7～10d防效在58.36%～87.71%，且隨著施藥劑量的增加，防治效果不斷提高。3地試驗結(jié)果中山東萊西試驗點防效最高，平均85%左右，其次是陜西漢中試驗點，平均防效80%左右，江西永豐試驗點防效最低，平均防效70%左右。

25%嘧菌酯懸浮劑防治姜炭疽病田間藥效試驗結(jié)果表明(表4)：3個試驗地中25%嘧菌酯懸浮劑對姜炭疽病均有較好的防治效果，末次藥后7～10d防效在52.14%～85.24%，且隨著施藥劑量的增加，防治效果不斷提高。3地試驗結(jié)果中陜西漢中試驗點防效最高，平均80%左右，其次是江西永豐試驗點，平均防效75%左右，山東萊西試驗點防效最低，平均防效70%左右。

表4 450g/L咪鮮胺水乳劑和25%嘧菌酯懸浮劑防治姜炭疽病田間藥效試驗結(jié)果

3 結(jié)論與討論

咪鮮胺是一種廣譜殺菌劑，對由子囊菌和半知菌引起的病害具有明顯的防效，嘧菌酯是一種高效、廣譜的甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，對幾乎所有的真菌病害具有良好的活性，可見2種藥劑用于防治姜炭疽病具有一定的理論依據(jù)。本研究室內(nèi)活性測定試驗表明，咪鮮胺、嘧菌酯對炭疽病病菌具有較高的活性，EC50值(72h)分別為0.076mg/L、1.59mg/L，說明咪鮮胺、嘧菌酯用于防治姜炭疽病具有較好的潛力。安全性試驗結(jié)果表明，咪鮮胺和嘧菌酯對姜苗均具有較好的安全性，安全系數(shù)為4.0。田間藥效試驗結(jié)果表明，450g/L咪鮮胺水乳劑試驗劑量下防效在80%左右，25%嘧菌酯懸浮劑試驗劑量下防效在75%左右，在試驗劑量下均能達(dá)到較好的防治效果。綜上各項試驗結(jié)果，450g/L咪鮮胺水乳劑和25%嘧菌酯懸浮劑在田間生產(chǎn)中用于防治姜炭疽病是可行的。因此，推薦在姜炭疽病發(fā)病前或初期使用450g/L咪鮮胺水乳劑30～45mL/667m2或者25%嘧菌酯懸浮劑40～60mL/667m2，間隔7～10d左右施藥1次，連續(xù)施藥3次，可有效防治姜炭疽病的危害。

姜炭疽病是發(fā)生普遍、分布較廣的一種重要病害，防治不及時、防治不當(dāng)將會嚴(yán)重影響姜的產(chǎn)量、品質(zhì)和商業(yè)價值。因此，在姜種植期應(yīng)注重農(nóng)業(yè)防治和藥劑防治相結(jié)合的方法防治姜炭疽病。農(nóng)業(yè)防治措施可以總結(jié)為“選好地，選好種，注重田間管理”；藥劑防治方面，由于已取得國家登記可用于防治姜炭疽病的“合理、合法”農(nóng)藥品種仍然較少，在田間防治中不乏濫用、亂用農(nóng)藥現(xiàn)象的發(fā)生，不僅影響姜的質(zhì)量安全，而且也會加劇抗藥性的發(fā)生，因此，鼓勵農(nóng)藥企業(yè)研發(fā)防治姜炭疽病的農(nóng)藥產(chǎn)品，積極開展登記工作，可以有效解決姜炭疽病防治“無藥可用”的狀態(tài)。本研究通過開展450g/L咪鮮胺水乳劑和25%嘧菌酯懸浮劑防治姜炭疽病的各項試驗研究，證明了2種藥劑防治姜炭疽病是安全有效的，可為指導(dǎo)農(nóng)業(yè)田間生產(chǎn)提供一定依據(jù)。