沈陽(yáng)市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 （遼寧 沈陽(yáng) 110041）

內(nèi)容提要：目的：分析全自動(dòng)微生物鑒定藥敏分析儀對(duì)臨床相關(guān)細(xì)菌的鑒定能力及應(yīng)用價(jià)值。方法：選擇本院臨床院內(nèi)標(biāo)本120例患者，其呼吸道、生殖道、泌尿系統(tǒng)、血液樣本當(dāng)中分離出的菌株，以及本院醫(yī)學(xué)資料庫(kù)當(dāng)中保存的參考菌株60例，以及4例國(guó)家資料庫(kù)提供的質(zhì)控菌株作為本次檢測(cè)的樣本。選擇德國(guó)西門(mén)子公司生產(chǎn)的MicroScan AutoScan-4細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀，以及相對(duì)應(yīng)的6套鑒定標(biāo)卡作為實(shí)驗(yàn)儀器，對(duì)比不同菌株的鑒定正確率、鑒定耗費(fèi)時(shí)間以及藥敏試驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果：5例質(zhì)控菌株各自檢測(cè)十次，共50次，鑒定重復(fù)率為100%，60例革蘭氏陽(yáng)性菌鑒定正確率為92.54%，60例革蘭氏陰性菌中鑒定正確率為97.5%。結(jié)論：藥敏分析儀具有較好的檢測(cè)效果，可以在比較短的時(shí)間內(nèi)給出準(zhǔn)確的鑒定結(jié)果。

本文主要采取德國(guó)公司生產(chǎn)的MicroScan AutoScan-4細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀，進(jìn)行臨床鑒定分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2018年2月～2019年11月本院臨床院內(nèi)標(biāo)本120例患者，其呼吸道、生殖道、泌尿系統(tǒng)、血液樣本當(dāng)中分離出的菌株，以及本院醫(yī)學(xué)資料庫(kù)當(dāng)中保存的參考菌株60例，以及4例國(guó)家資料庫(kù)提供的質(zhì)控菌株作為本次檢測(cè)的樣本。其中革蘭氏陰性菌60例，革蘭氏陽(yáng)性菌60例，菌株類(lèi)型不重復(fù)。排除標(biāo)準(zhǔn)：不在MicroScan AutoScan-4細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀鑒定范圍內(nèi)的菌株。

1.2 方法

（1）儀器設(shè)備與應(yīng)用：采用德國(guó)西門(mén)子公司生產(chǎn)的MicroScan AutoScan-4型全自動(dòng)微生物藥敏分析鑒定儀，以及對(duì)應(yīng)的6種鑒定標(biāo)卡。通過(guò)色澤對(duì)比檢測(cè)方式，按照波形不同，對(duì)于每一種鑒定標(biāo)卡的光路進(jìn)行對(duì)比，在15min之內(nèi)，對(duì)6種標(biāo)卡的16個(gè)方位卡槽進(jìn)行置換檢測(cè)。其中標(biāo)卡1主要檢測(cè)革蘭氏陰性桿菌，標(biāo)卡2主要檢測(cè)革蘭氏陽(yáng)性桿菌，兩種標(biāo)卡的鑒定時(shí)間均控制在3～10h之內(nèi)。對(duì)于兩種標(biāo)卡的鑒定結(jié)果進(jìn)行全面的數(shù)據(jù)比對(duì)。

（2）檢測(cè)方法：在比對(duì)之前，詳細(xì)閱讀不同標(biāo)卡當(dāng)中的藥敏實(shí)驗(yàn)要求，并將樣本接種到配比好的羊血培養(yǎng)基上，并用哥倫比亞瓊脂，按照5%的濃度進(jìn)行相關(guān)配比。鑒定環(huán)境要控制在34～35.5°C，血液培養(yǎng)時(shí)間控制在19～24h之內(nèi)。

（3）嚴(yán)格保障培養(yǎng)皿本身無(wú)菌，并采用氯化鈉溶液的配比菌懸液等，對(duì)于儀器本身進(jìn)行管理。檢測(cè)過(guò)程當(dāng)中，將盛有藥敏卡的分析儀放在儀器的檢測(cè)架上，并攜帶到孵育倉(cāng)當(dāng)中，對(duì)于藥敏實(shí)驗(yàn)的鑒定樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定范圍的有效查找。

（4）對(duì)本研究所選取的大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌等幾種質(zhì)控菌株各檢測(cè)十次，鑒定重復(fù)性。并分析采集到的120株病原菌和本院數(shù)據(jù)庫(kù)當(dāng)中保存的參考菌株，進(jìn)行正確性以及鑒定時(shí)間的分析，分析上述菌株的藥敏鑒定結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

按照首選鑒定、低分辨鑒定和屬對(duì)種錯(cuò)鑒定三種評(píng)價(jià)方式，對(duì)于上述菌株的藥敏試驗(yàn)結(jié)果以及正確率和鑒定時(shí)間進(jìn)行控制。

2.結(jié)果

2.1 MicroScan AutoScan-4細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀鑒定準(zhǔn)確率分析

大腸桿菌、微球菌等四種菌株鑒定時(shí)間為3～9h，平均（6.54±1.42）h，其中超過(guò)70%的菌株在4h之內(nèi)完成鑒定，革蘭氏陰性菌藥敏符合率為94.25%，革蘭氏陽(yáng)性菌藥敏符合率為94.38%。幾種檢測(cè)方式之間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。詳見(jiàn)表1。

表1.MicroScan AutoScan-4細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀鑒定準(zhǔn)確率

2.2 菌株鑒定準(zhǔn)確率對(duì)比

5例質(zhì)控菌株各自檢測(cè)10次，共50次，鑒定重復(fù)率為100%，60例革蘭氏陽(yáng)性菌鑒定正確率為92.54%，60例革蘭氏陰性菌中鑒定正確率為97.54%。詳見(jiàn)表2。

表2.鑒定準(zhǔn)確率

2.3 兩組鑒定平均時(shí)間情況對(duì)比

大腸桿菌、微球菌等四種菌株鑒定時(shí)間為3～9h，平均（6.54±1.42）h，其中超過(guò)70%的菌株在4h之內(nèi)完成鑒定。詳見(jiàn)表3。

表3.兩組鑒定平均時(shí)間情況對(duì)比(%)

3.討論

鑒定細(xì)菌本質(zhì)上是對(duì)細(xì)菌的分類(lèi)，長(zhǎng)期以來(lái)實(shí)驗(yàn)室主要通過(guò)傳統(tǒng)鑒定方法，耗時(shí)長(zhǎng)，且誤差大，更容易受到試驗(yàn)人員主觀判斷的影響。全自動(dòng)鑒定藥敏分析儀是在20世紀(jì)的中期得到研發(fā)和應(yīng)用，其原理在于根據(jù)細(xì)菌酶系統(tǒng)的差異性，各新陳代謝的產(chǎn)物不同，因此生化特性有顯著差異，會(huì)產(chǎn)生不同顏色的變化，因此進(jìn)行分類(lèi)。目前全自動(dòng)微生物藥敏分析儀分為兩類(lèi)進(jìn)行檢測(cè)，并具備對(duì)應(yīng)的鑒定卡，具有較高的敏感性，能夠?qū)?00種以上細(xì)菌精準(zhǔn)區(qū)分鑒定，從而支持臨床應(yīng)用。全自動(dòng)方法能夠有效提高鑒定效率，大幅縮短鑒定時(shí)間，具有較好的重復(fù)性，操作簡(jiǎn)便，提高鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

目前醫(yī)療研究領(lǐng)域主要應(yīng)用的藥敏檢測(cè)方法包含比濁法與熒光測(cè)定法。本研究選擇的全自動(dòng)微生物藥敏分析儀是通過(guò)比濁法進(jìn)行鑒定，其具有良好的重復(fù)性以及時(shí)效性，操作簡(jiǎn)便，能夠?qū)?xì)菌種類(lèi)進(jìn)行精確劃分。儀器可以在不同分辨率下觀察細(xì)菌，更為準(zhǔn)確地評(píng)估細(xì)菌耐藥性，可用于藥物的研究以及臨床用藥指導(dǎo)，具有較高實(shí)踐價(jià)值。本文多采用的MicroScan AutoScan-4全自動(dòng)微生物藥敏分析儀可在多個(gè)稀釋梯度進(jìn)行檢測(cè)，儀器采用6個(gè)測(cè)試孔位，在加入一定的菌懸液之后，可應(yīng)用光電比濁儀進(jìn)行對(duì)比分析[1-4]。MicroScan AutoScan-4全自動(dòng)微生物藥敏分析儀目前已經(jīng)在我國(guó)的多個(gè)公共醫(yī)療檢測(cè)機(jī)構(gòu)當(dāng)中得到了廣泛的應(yīng)用，該儀器應(yīng)用比濁法來(lái)進(jìn)行菌株的對(duì)比工作，每15min就可以進(jìn)行一次比著鑒定，通過(guò)透光度的比對(duì)，來(lái)從曲線圖譜當(dāng)中獲得相對(duì)應(yīng)的菌株藥敏鑒定結(jié)果。該儀器配備的曲線分析圖，可以得到比較準(zhǔn)確地分析圖譜對(duì)于頭孢西丁指導(dǎo)下的不同菌株耐藥程度，進(jìn)行渾濁性反饋[5]。如果頭孢西丁篩選呈現(xiàn)陽(yáng)性，也就是說(shuō)葡萄球菌等菌株對(duì)于甲氧西林的耐藥性比較顯著，而如果沒(méi)有出現(xiàn)渾濁反應(yīng)現(xiàn)象，就可以表明該菌株對(duì)于甲氧西林呈現(xiàn)敏感。從本研究當(dāng)中可以看出，四種質(zhì)控菌株的整體鑒定重復(fù)率可以達(dá)到百分之百，大腸桿菌、微球菌等四種菌株鑒定時(shí)間為3～9h，平均（6.54±1.42）h，其中超過(guò)70%的菌株在4h之內(nèi)完成鑒定。

綜上所述，使用全自動(dòng)微生物藥敏分析儀可以提高細(xì)菌分析鑒定的準(zhǔn)確性和效率，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)檢測(cè)，在短時(shí)間內(nèi)提供鑒定結(jié)果，滿(mǎn)足臨床的應(yīng)用。鑒定結(jié)果用于指導(dǎo)臨床用藥，能夠滿(mǎn)足臨床準(zhǔn)確用藥的規(guī)范，促進(jìn)患者早日康復(fù)。同時(shí)應(yīng)用于藥物研發(fā)中也具有實(shí)踐價(jià)值，能夠提高藥物研發(fā)的準(zhǔn)確性，在很多醫(yī)療機(jī)構(gòu)中得到應(yīng)用。