姜 黎，劉 暢，司 雨，吉小敏，田長彥*

(1. 中國科學(xué)院新疆生態(tài)與地理研究所 荒漠與綠洲生態(tài)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 烏魯木齊 830011；2. 中國科學(xué)院大學(xué)，北京 100039； 3. 南京野生植物綜合利用研究院，江蘇 南京211111； 4. 新疆林科院造林治沙研究所，新疆 烏魯木齊 830063； 5. 新疆精河荒漠生態(tài)系統(tǒng)國家定位觀測(cè)研究站，新疆 精河 8333001)

目前，土地鹽堿化是世界上公認(rèn)需要共同面對(duì)的棘手問題，全世界鹽堿地面積達(dá)9.45億公頃，約占陸地總面積的十分之一[1]。我國是世界上鹽堿地面積最大的國家，其總面積占全國可利用土地面積的二十分之一[2]，另外我國不同地區(qū)的土壤組成成分差異很大，如新疆、沿海地區(qū)以Cl-鹽堿土為主，而松嫩平原以CO32-鹽堿土為主等[3]。因此，面對(duì)日益嚴(yán)重的鹽堿化土地問題，迫切需要改良鹽堿地的技術(shù)。改良的物理和化學(xué)方法不僅需投入高昂的費(fèi)用，而且會(huì)將Na+、Cl-等鹽分離子和一些植物生長所必需的礦質(zhì)元素清除，造成土地貧瘠等次生問題[4]。在實(shí)施鹽堿地生物恢復(fù)和改良過程中，鹽生植物為材料的生物修復(fù)是鹽堿地恢復(fù)的重要途徑，而直接播種是生物修復(fù)中最經(jīng)濟(jì)、方便的技術(shù)[5]。

剛毛檉柳(Tamarixhispida)為檉柳科檉柳屬(TamarixL.)植物，一種多年生木本泌鹽植物，主要分布于中國、蒙古、俄羅斯、中亞、伊朗和阿富汗，在我國主要分布于新疆、青海、甘肅、寧夏和內(nèi)蒙古西部[6]。剛毛檉柳生境主要是以Cl-鹽堿土為主的新疆、甘肅等干旱地區(qū)[6]，處于干旱區(qū)的新疆，土壤中鋰豐度較高，且主要以氯化鋰形態(tài)存在土壤表層，與相對(duì)應(yīng)的，新疆荒漠植物的鋰含量也較高[7-8]。許多研究重點(diǎn)報(bào)道了鹽堿脅迫對(duì)檉柳的種子萌發(fā)、幼苗生長和生理生態(tài)的影響[10-14]，例如姬慧娟等和孫紅葉等研究了有關(guān)溫度、鹽分、水分等環(huán)境因素對(duì)剛毛檉柳種子萌發(fā)影響[6,9]，但尚未有不同類型的鹽分對(duì)剛毛檉柳種子萌發(fā)影響相關(guān)研究報(bào)道。基于剛毛檉柳生長對(duì)鹽分的響應(yīng)，假設(shè)剛毛檉柳種子萌發(fā)過程中將對(duì)鹽分有較高耐性，但可能會(huì)對(duì)不同類型鹽分響應(yīng)不同。針對(duì)上述問題和假設(shè)，提出以下問題：1)在不同濃度鹽處理下剛毛檉柳種子萌發(fā)如何響應(yīng)？2)剛毛檉柳種子萌發(fā)是否會(huì)對(duì)不同類型鹽分表現(xiàn)出差異？本研究旨在為利用鹽堿地發(fā)展剛毛檉柳種植產(chǎn)業(yè)提供了理論依據(jù)，同時(shí)為干旱區(qū)剛毛檉柳保護(hù)提供合理的保育策略。

1 材料與方法

1.1 剛毛檉柳種子采集

2018年10月，完全成熟的剛毛檉柳種子采集于中國科學(xué)院吐魯番沙漠植物園。種子在室溫下晾干清理干凈，然后將清理干凈的剛毛檉柳種子保存于信封中備用。

1.2 萌發(fā)試驗(yàn)

在50 mm培養(yǎng)皿中放入2張濾紙，加入氯化鈉(NaCl)、碳酸鈉(Na2CO3)、硫酸鈉(Na2SO4)以及氯化鋰(LiCl)溶液至濾紙飽和，每皿放入25粒種子，4組重復(fù)。每種鹽分設(shè)7個(gè)處理，分別為：50、100、200、300、400、600和800 mmol/L，均以蒸餾水為對(duì)照(CK)，置于溫變周期為10℃/25℃(暗/光=10 h/14 h)的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每天補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水分。萌發(fā)過程中每24 h觀察記錄1次萌發(fā)情況，種子萌發(fā)以胚根露出種皮為準(zhǔn)，連續(xù)觀察記錄10 d，計(jì)算其萌發(fā)率、萌發(fā)指數(shù)和成苗率，測(cè)定每個(gè)種子的根長。

1.3 萌發(fā)參數(shù)、成苗率和根長測(cè)定

萌發(fā)率(Germination rate,GR)=所有萌發(fā)種子數(shù)/供試種子數(shù)×100%；萌發(fā)指數(shù)(Germination Index,GI)=Σ(Gt/Dt)(Gt指在時(shí)間t日內(nèi)的萌發(fā)數(shù)，Dt為相應(yīng)的萌發(fā)天數(shù))；以種子的葉伸出水面并具備正常的根為存活個(gè)體，調(diào)查存活種子占全部種子的比例為成苗率。成苗率=(成苗數(shù)/種子總數(shù))×100%。根長采用直尺測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)分析

使用SPSS 16.0 統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)的平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤，并對(duì)所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著，采用Ducan檢驗(yàn)來比較處理間差異。

2 結(jié)果分析

2.1 LiCl、NaCl、Na2SO4、Na2CO3對(duì)剛毛檉柳種子萌發(fā)特性的影響

雙因素方差分析表明，鹽分濃度對(duì)萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)影響達(dá)到顯著水平(P<0.01)，鹽分類型顯著影響萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)(P<0.01)。伴隨著LiCl濃度增加，剛毛檉柳種子萌發(fā)率降低。在(50 mmol/L)較低濃度LiCl和Na2CO3，剛毛檉柳種子萌發(fā)率顯著降低，但同樣濃度的NaCl和Na2SO4并未顯著降低萌發(fā)率；在(200 mmol/L)較高濃度LiCl和Na2CO3，剛毛檉柳種子萌發(fā)率降低程度急劇加強(qiáng)，同樣濃度的Na2SO4顯著降低萌發(fā)率，但同樣濃度的NaCl并未顯著降低萌發(fā)率；即使在400 mmol/L NaCl，剛毛檉柳種子萌發(fā)率仍為78%，說明了剛毛檉柳對(duì)NaCl耐性較高(圖1)。試驗(yàn)表明了不同鹽分對(duì)種子萌發(fā)的抑制程度順序依次為NaCl

圖1 LiCl (A)、NaCl (B)、Na2SO4 (C)、Na2CO3 (D)對(duì)剛毛檉柳種子萌發(fā)率的影響Fig.1 Effects of LiCl (A), NaCl (B), Na2SO4 (C), Na2CO3 (D) on germination percent of T. hispida seeds

表1 LiCl、NaCl、Na2SO4、Na2CO3對(duì)剛毛檉柳種子萌發(fā)指數(shù)的影響Table 1 Effects of LiCl, NaCl, Na2SO4, and Na2CO3 ongermination index of T. hispida

2.2 萌發(fā)率與鹽分濃度之間的回歸分析

為研究剛毛檉柳種子萌發(fā)時(shí)的耐LiCl、NaCl、Na2SO4、Na2CO3程度，分別測(cè)得剛毛檉柳在不同LiCl、NaCl、Na2SO4、Na2CO3濃度處理下的萌發(fā)率，然后將萌發(fā)率與濃度之間分別進(jìn)行回歸分析。結(jié)果表明，LiCl、NaCl、Na2SO4、Na2CO3脅迫下的萌發(fā)率，均隨溶液濃度的升高而降低，萌發(fā)率與溶液濃度表現(xiàn)出顯著的負(fù)相關(guān)性，其相關(guān)系數(shù)和回歸方程如表2所示。

表2 萌發(fā)率與鹽分溶液濃度之間的回歸分析Table 2 The regression analysis of salinityconcentrations with germination percent

根據(jù)已有文獻(xiàn)，分別以剛毛檉柳種子的萌發(fā)率為75%和25%時(shí)所對(duì)應(yīng)的LiCl、NaCl、Na2SO4、Na2CO3濃度作為種子萌發(fā)時(shí)的臨界值和極限值。由計(jì)算結(jié)果可知，剛毛檉柳種子萌發(fā)臨界值和極限值分別為40 mmol/L和168 mmol/L LiCl，389 mmol/L和665 mmol/L NaCl，215 mmol/L和585 mmol/LNa2SO4，51 mmol/L和307 mmol/LNa2CO3，不同鹽分對(duì)種子萌發(fā)萌發(fā)期的耐鹽臨界值和臨界值大小表明不同鹽分對(duì)種子萌發(fā)的抑制作用，順序依次為NaCl

2.3 LiCl、NaCl、Na2SO4、Na2CO3對(duì)剛毛檉柳種子成苗率的影響

雙因素方差分析表明，鹽分濃度與鹽分類型對(duì)成苗率的影響達(dá)到顯著水平(P<0.01)。在(50 mmol/L)較低濃度LiCl和Na2CO3，剛毛檉柳成苗率顯著降低，但同樣濃度的NaCl和Na2SO4并未顯著降低成苗率；在(200 mmol/L)較高濃度LiCl和Na2CO3，剛毛檉柳成苗率降低程度急劇加強(qiáng)，同樣濃度的Na2SO4顯著降低成苗率，但同樣濃度的NaCl并未顯著降低成苗率(圖2)。試驗(yàn)結(jié)果表明不同鹽分對(duì)種子成苗率的抑制作用順序依次為NaCl

圖2 LiCl、NaCl、Na2SO4、Na2CO3對(duì)剛毛檉柳成苗率的影響Fig.2 Effects of LiCl, NaCl, Na2SO4, Na2CO3 on time of 50% germination in T.hispida seeds

2.4 LiCl、NaCl、Na2SO4、Na2CO3對(duì)剛毛檉柳幼苗根長的影響

雙因素方差分析表明，鹽分濃度對(duì)根長的影響達(dá)到顯著水平(P<0.01)，鹽分類型影響根長達(dá)到顯著水平(P<0.01)。伴隨著鹽分濃度增加，剛毛檉柳幼苗根長均顯著下降(圖3)。在(50 mmol/L)較低濃度NaCl，剛毛檉柳幼苗根長顯著增加21.13%，相同濃度Na2SO4并未顯著降低幼苗根長，但50 mmol/L LiCl和Na2CO3下，剛毛檉柳幼苗根長顯著降低；100 mmol/L NaCl并未顯著降低幼苗根長，但100 mmol/L LiCl、Na2SO4和Na2CO3均顯著降低了幼苗根長。不同鹽分對(duì)幼苗根長的抑制作用順序依次為 NaCl

3 結(jié)論與討論

在鹽堿環(huán)境中，植物能否在生存第一步取決于它能否成功萌發(fā)。在植物生活史過程中，種子萌發(fā)期是對(duì)鹽脅迫十分敏感的時(shí)期之一。試驗(yàn)結(jié)果表明相對(duì)于鋰鹽，剛毛檉柳種子萌發(fā)過程中對(duì)鈉鹽表現(xiàn)出超強(qiáng)的耐性，在一種鋰鹽處理和三種鈉鹽處理下，剛毛檉柳種子萌發(fā)臨界值和極限值分別為40 mmol/L和168 mmol/L LiCl，389 mmol/L和665 mmol/L NaCl，215 mmol/L和585 mmol/L Na2SO4，51 mmol/L和307 mmol/L Na2CO3，且不同鹽分對(duì)種子萌發(fā)的抑制程度順序依次為NaCl

圖3 LiCl、NaCl、Na2SO4、Na2CO3對(duì)剛毛檉柳幼苗根長的影響Fig.3 Effects of LiCl, NaCl, Na2SO4, Na2CO3 on root length of T. hispida young seedlings

無論NaCl和Na2SO4處理，還是Na2CO3處理，剛毛檉柳在萌發(fā)過程中對(duì)鈉鹽均表現(xiàn)出超強(qiáng)的耐性。剛毛檉柳對(duì)不同鈉鹽脅迫的耐受性不同，且不同鈉鹽對(duì)種子萌發(fā)的抑制程度順序?yàn)镹aCl

植物對(duì)各種非生物脅迫耐性的差異主要是對(duì)生長環(huán)境長期適應(yīng)的結(jié)果。剛毛檉柳喜歡生長在荒漠區(qū)域河漫灘淤積、沖擊平原、湖濱附近和低凹鹽堿地，而地下水位較高的各類鹽漬化土壤正生長于此處。本研究表明所選擇的3種鈉鹽在高濃度時(shí)，對(duì)剛毛檉柳種子萌發(fā)的抑制程度不一樣，同一濃度NaCl的萌發(fā)率均高于Na2SO4，更高于Na2CO3處理；Na2CO3脅迫對(duì)剛毛檉柳種子萌發(fā)的危害最大，Na2SO4脅迫對(duì)剛毛檉柳種子萌發(fā)的危害次之，NaCl脅迫對(duì)剛毛檉柳種子萌發(fā)的危害最小。因此，說明除了Na+和Cl-的離子毒害對(duì)剛毛檉柳種子的萌發(fā)有影響之外，鹽堿性也影響種子的萌發(fā)，高濃度Na+對(duì)剛毛檉柳的種子萌發(fā)和幼苗生長具有抑制作用，同樣堿性鹽的高pH值也會(huì)對(duì)剛毛檉柳種子和幼苗生長的萌發(fā)造成嚴(yán)重危害，這與張秀玲等[17]的研究觀點(diǎn)相似，堿性鹽的高pH對(duì)植物種子萌發(fā)和幼苗生長的抑制作用大于鹽分離子的抑制作用[17]。SO42-和CO32-是二價(jià)離子，而Cl-是一價(jià)離子，剛毛檉柳在萌發(fā)過程中對(duì)不同形態(tài)鹽分(鈉鹽)表現(xiàn)顯著的差異部分可能歸因于三種離子的價(jià)態(tài)不同[4,18-19]。

綜上所述，剛毛檉柳種子萌發(fā)時(shí)對(duì)鈉鹽呈現(xiàn)出較強(qiáng)的耐性，尤其NaCl，剛毛檉柳對(duì)四種鹽脅迫響應(yīng)呈現(xiàn)出顯著的差異，僅有NaCl在低濃度(50 mmol/L)可促進(jìn)剛毛檉柳幼苗的生長，因而剛毛檉柳適宜在氯化鹽和硫酸鹽為主的鹽堿土引種栽培。