自2014年諾貝爾化學獎授予了超分辨顯微技術(shù)以來,超分辨成像技術(shù)取得了巨大進步,進一步提高了成像的分辨率。然而,受限于熒光分子單位時間內(nèi)發(fā)出的光子數(shù),超分辨成像技術(shù)在時間分辨率和空間分辨率上難于獲得同等提高。
近日,發(fā)表在《Nature Biotechnology》上的一項題為“Sparse Deconvolution Improves the Resolution of LiveCell Super-Resolution Fluorescence Microscopy”的研究中,來自哈爾濱工業(yè)大學和北京大學的研究團隊發(fā)明了基于新計算原理的超分辨顯微成像技術(shù),進一步拓展了熒光顯微鏡的分辨率極限。在時空分辨率上,他們成功將空間分辨率從110 nm提高到60 nm,同時保持毫秒級的時間分辨率。
研究人員通過提出“熒光圖像的分辨率提高等價于圖像的相對稀疏性增加”這個通用先驗知識,結(jié)合之前提出的信號時空連續(xù)性先驗知識,發(fā)明了兩步迭代解卷積算法,即Sparse deconvolution方法,突破了現(xiàn)有熒光顯微系統(tǒng)的光學硬件限制,首次實現(xiàn)通用計算熒光超分辨率成像。結(jié)合自主研發(fā)的超分辨率結(jié)構(gòu)光(Structured Illumination Microscopy,SIM)系統(tǒng),實現(xiàn)目前活細胞光學成像中最高空間分辨率(60 nm)下,速度最快(564 Hz)、成像時間最長(1 h以上)的超分辨成像。結(jié)合商業(yè)的轉(zhuǎn)盤共聚焦結(jié)構(gòu)光顯微鏡,實現(xiàn)四色、三維、長時間的活細胞超分辨成像。該工作在活細胞中實現(xiàn)了同時高時空分辨率長時程成像且方法具有普適性,可以廣泛用于寬場成像和其他超分辨成像技術(shù)以提高這些成像方法的分辨率。
(來源:科技部)