賀 凱 華 薇 李 東
(淮陰工學(xué)院化工學(xué)院,江蘇 淮安223001)
大麻二酚(CBD)是一種主要的植物大麻素,主要來(lái)源于大麻,占大麻提取物的40%,是大麻主要的非精神活性成分,可與體內(nèi)內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)的多種生理靶點(diǎn)結(jié)合,具有抗驚厥、鎮(zhèn)靜、催眠、抗焦慮、抗精神病、抗炎和神經(jīng)保護(hù)的性能[1]。CBD 在治療癲癇、多種癌癥、多發(fā)性動(dòng)脈硬化與帕金森病、預(yù)防心肌梗死、抑制神 經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和抑制性激素分泌等具有一定療效。研究表明,CBD 能阻礙四氫大麻酚對(duì)人體神經(jīng)系統(tǒng)的作用,由于這一特性CBD 已被FDA 批準(zhǔn)用于治療難治性癲癇[2]。
準(zhǔn)確稱取CBD 對(duì)照品10mg,乙腈溶解并定容至10 mL,得1 mg/mL CBD 標(biāo)準(zhǔn)溶液,再準(zhǔn)確移取1 mL 至10 mL 容量瓶中,乙腈定容,得100 μg/mL 的CBD 標(biāo)準(zhǔn)溶液,并逐級(jí)以乙腈稀釋,得到濃度為1、5、10、20、50 μg/mL 系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。
稱取一定質(zhì)量的化妝品精油于10 mL 容量瓶中,加入四氫呋喃溶解并定容至10 mL,經(jīng)0.22μm 濾膜過(guò)濾后,進(jìn)行HPLC 分析。
儀器為Waters 2695 高液相色譜儀(2996 PDA 檢測(cè)器),SHIMADZU WondaCract ODS-2 色譜柱(250×4.6 mm,5μm),流動(dòng)相乙腈:水=70:30(V/V)流速1 mL/min,柱溫30℃,進(jìn)樣量20 μL。
對(duì)照品溶液進(jìn)行HPLC 分析,結(jié)果見(jiàn)圖1、圖2。
圖1 CBD 標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC 色譜圖
圖2 CBD 紫外吸收曲線
分析結(jié)果顯示CBD 在240 nm 以下紫外吸收強(qiáng)度很弱,為了提高檢測(cè)的靈敏度,選擇220 nm 作為檢測(cè)波長(zhǎng)。
對(duì)1~100 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行HPLC 分析,以峰面積對(duì)濃度作圖,結(jié)果見(jiàn)圖3。結(jié)果顯示在1~100μg/mL 范圍內(nèi)工作曲線線性良好,R>0.9999。
表1 不同濃度范圍標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積
圖3 CBD 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線
配置6 個(gè)平行樣品來(lái)準(zhǔn)確考量方法的精密度,結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果
結(jié)果表明分析的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)小于0.5%,說(shuō)明方法的穩(wěn)定性高,重復(fù)性好。
圖4 樣品的HPLC 色譜圖
移取一定量的樣品溶液(本底值為24.61μg/mL),分別加入一定體積的CBD 標(biāo)準(zhǔn)品溶液,混勻后進(jìn)行HPLC 分析,計(jì)算CBD 的回收率,結(jié)果見(jiàn)表3。結(jié)果顯示方法的回收率為99.3%~101.4%,說(shuō)明本方法的回收率較好。
表3 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果
本實(shí)驗(yàn)建立了針對(duì)化妝品精油中大麻二酚的HPLC 分析方法。結(jié)果表明在1~100 μg/mL 范圍內(nèi)具有良好的線性,R>0.9999,加標(biāo)回收率在99.3~101.4%,相對(duì)偏差(RSD)小于0.5%,本方法可滿足對(duì)含CBD 成分的化妝品精油中大麻二酚含量的準(zhǔn)確測(cè)定。