（山東朱氏藥業(yè)集團(tuán)有限公司 山東 274300）

以生物技術(shù)為基礎(chǔ)研制出來的藥物在分子結(jié)構(gòu)、藥物生產(chǎn)工藝、藥物運(yùn)輸過程以及保存條件、藥效作用靶點(diǎn)等方面相較于傳統(tǒng)藥物來說存在有較大的差異。因此，在實(shí)際的制藥以及臨床使用過程中，就需要進(jìn)一步加強(qiáng)對藥物免疫毒性和免疫原性的檢測，這樣才能更好的保證生物制藥的安全性，最大限度的發(fā)揮藥物的臨床作用效果。

1.生物技術(shù)藥物的免疫毒性和免疫原性概述

所謂的生物技術(shù)藥物免疫毒性指的是藥物的受試對象在使用藥物之后可能會發(fā)生的疫抑制或增強(qiáng)、過敏反應(yīng)或自身免疫反應(yīng)情況，測定人員需要根據(jù)相關(guān)檢測結(jié)果來判斷這些癥狀的出現(xiàn)是否與藥理活性存在關(guān)聯(lián)性。而生物技術(shù)藥物的免疫原性則指的是生物藥物在進(jìn)入受試對象發(fā)揮作用后刺激受試對象所形成的特異性抗體或者產(chǎn)生致敏拎包細(xì)胞的性質(zhì)。為了更好的保證生物技術(shù)藥物的指令，必須要認(rèn)真落實(shí)生物藥物的免疫毒性和免疫原性檢測工作，這樣可以更好的提升藥物質(zhì)量，減少不良情況發(fā)生率。

2.免疫反應(yīng)的類型、免疫毒性和免疫原性的影響因素

(1)免疫反應(yīng)的類型

免疫反應(yīng)是生物技術(shù)藥物中不可避免的一種現(xiàn)象，導(dǎo)致免疫反應(yīng)發(fā)生的原因多種多樣，據(jù)相關(guān)研究表明，免疫反應(yīng)主要可以分為兩種，即經(jīng)典免疫反應(yīng)和免疫耐受崩潰。經(jīng)典免疫反應(yīng)是通過動物、微生物、植物等物質(zhì)提取的治療性蛋白所引發(fā)的。比如說馬的抗血清、鏈激酶、葡激酶以及天冬酰胺酶等等，這種免疫反應(yīng)在用藥之后可能只是短短數(shù)十秒就會發(fā)生，患者注射1次藥物就會出現(xiàn)，發(fā)生率相對比較高。而且免疫反應(yīng)發(fā)生之后的抗體，往往還有中和特性，其可能會長時間的滯留。針對這一類免疫反應(yīng)在查找發(fā)生原因時，通?？梢钥焖俨槊?。如果在臨床治療期間，應(yīng)用藥物時出現(xiàn)這種免疫反應(yīng)，那么藥物的治療效用將會因此喪失。

免疫耐受崩潰的特點(diǎn)在于發(fā)生時不如經(jīng)典免疫反應(yīng)那么激烈，其在臨床上的發(fā)生沒有規(guī)律可循，發(fā)生率比較低，可能在患者用藥幾年之后才會發(fā)生，也可能一直不發(fā)生。

(2)影響免疫毒性和免疫原性的因素

在生物技術(shù)藥物領(lǐng)域?qū)е旅庖叨拘院驮园l(fā)生的因素多種多樣，比如說結(jié)構(gòu)、處理工藝、貯存條件、污染或者是雜質(zhì)、給藥時間、劑量以及途徑等等。在對影響免疫毒性和免疫原性的因素進(jìn)行調(diào)查分析時，發(fā)現(xiàn)相對分子質(zhì)量大于10000的蛋白多肽也可能有免疫毒性和原性，相對分子質(zhì)量在5000-10000的蛋白多肽也可能有免疫原性，但是引起的免疫反應(yīng)相對比較弱，相對分子質(zhì)量在1000-5000的化合物免疫原性不可預(yù)測。相對分子質(zhì)量低的化合物僅在與蛋白制共價結(jié)合形成半抗原-蛋白復(fù)合物的時候才有免疫原性，比如說青霉素與磺胺藥物。高分子物質(zhì)的相對分子質(zhì)量可以達(dá)到100000，但是因?yàn)樵谶@一類物質(zhì)為支鏈氨基酸結(jié)構(gòu)，容易在體內(nèi)降解成為低分子物質(zhì)，所以免疫原性相對比較弱。由此可以發(fā)現(xiàn)，免疫原性除了與相對分子質(zhì)量有所關(guān)聯(lián)，還與物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)有著極為密切的聯(lián)系。此外，在調(diào)查研究中還發(fā)現(xiàn)，但凡是含有大量芳香族氨基酸，尤其是含有酪氨酸的蛋白質(zhì)，其免疫原性比較強(qiáng)。結(jié)構(gòu)復(fù)雜的物質(zhì)免疫原性強(qiáng)，如結(jié)構(gòu)簡單的物質(zhì)免疫性則比較弱。結(jié)構(gòu)復(fù)雜性與氨基酸和單糖的類型及數(shù)量等存在有一定的關(guān)聯(lián)性。

隨著生物技術(shù)藥物的產(chǎn)品純度不斷提高，雜質(zhì)相關(guān)的抗體減少。一般來說，免疫耐受崩潰通常需要幾個月才會發(fā)生，因此給藥的頻率和持續(xù)時間對免疫原性的產(chǎn)生具有極為重要的意義，比如說用于治療多發(fā)性硬化癥的干擾素β。給藥途徑對蛋白質(zhì)的免疫原性有一定影響。據(jù)相關(guān)研究表明對具有免疫原性的蛋白質(zhì)不適合通過皮下注射給藥，但是從本質(zhì)上來說，皮下注射無法使得蛋白質(zhì)從非免疫原性變?yōu)榫哂忻庖咴裕淖兘o藥途徑也難以真正的使得原本具有的免疫原性消失，其僅僅能夠使得免疫原性的蛋白發(fā)生免疫反應(yīng)的機(jī)率增加。

3.生物技術(shù)藥物的免疫性毒性和免疫原性研究分析的項(xiàng)的

(1)非臨床免疫原性及免疫毒性研究

如果藥物的免疫毒性和免疫原性存在問題，那么勢必會使得患者出現(xiàn)藥物過敏和抗藥物免疫反應(yīng)，藥物可能無法發(fā)揮治療疾病，幫助患者恢復(fù)健康。針對非臨床生物技術(shù)藥物進(jìn)行免疫毒性和免疫原性研究，可以準(zhǔn)確的評估生物技術(shù)藥物在免疫毒性與免疫原性方面是否存在問題，探究其免疫毒性和免疫原性的強(qiáng)弱，分析藥物是否會對患者健康產(chǎn)生不良影響。針對非臨床生物技術(shù)藥物在對免疫毒性與免疫原性進(jìn)行評估時，可以通過分析蛋白質(zhì)藥物的過敏反應(yīng)獲取相關(guān)數(shù)據(jù)情況，然后結(jié)合實(shí)際情況進(jìn)行分析。需要注意的是并非所有生物技術(shù)藥物的免疫毒性與免疫原性強(qiáng)弱，都可以借助蛋白質(zhì)藥物進(jìn)行檢測和分析，因?yàn)樵趯?shí)際的藥物使用中，并不是所有的蛋白質(zhì)免疫原都屬于過敏原。

除了通過分析蛋白質(zhì)藥物的過敏反應(yīng)了解生物技術(shù)藥物的免疫毒性與免疫原性強(qiáng)弱之外，還可以通過分析抗體了解生物技術(shù)藥物的免疫毒性與免疫原性強(qiáng)弱。但是，當(dāng)前為了保證相關(guān)操作的安全性，一般都是以動物作為檢驗(yàn)對象，動物與人類具有諸多相似點(diǎn)，在藥物試驗(yàn)期間動物可能會出現(xiàn)的諸多反應(yīng)也將會在人體出現(xiàn)。然而實(shí)際上在動物身上觀察到的一些免疫反應(yīng)也不能百分之百保證會在人體身上出現(xiàn)，因?yàn)槎唠m然有共通點(diǎn)，但實(shí)際上也是存在有巨大差異的。所以在檢測之后還需要綜合多方面的因素，評估生物技術(shù)藥物的免疫毒性和免疫原性可能會對用藥者產(chǎn)生的負(fù)面影響，提前做好預(yù)防工作。

(2)臨床研究和上市后的免疫毒性和原性研究

免疫毒性和原性的檢測是生物技術(shù)藥物臨床安全性評價的重要組成部分，藥物引起的抗體反應(yīng)將會對藥動學(xué)、藥效和毒性等產(chǎn)生影響。抗體對于藥物作用的影響是多方面的，其既可能使得藥物作用的療效增強(qiáng)，也可能會導(dǎo)致藥物的作用減弱，并產(chǎn)生諸多副作用。比如說，給兒童注入生長激素，生長激素與抗體結(jié)合之后，使得兒童體內(nèi)原有的生長激素穩(wěn)定性增強(qiáng)，這樣對于兒童的生長發(fā)育來說實(shí)際上是極為有利的。但是抗體的產(chǎn)生也可能會對患者產(chǎn)生負(fù)面影響，比如說患者體內(nèi)的內(nèi)源性血小板生成素受到影響，那么就可能會導(dǎo)致患者血小板減少。由于免疫毒性和免疫原性的發(fā)生具有諸多不可預(yù)見性，因此為了更好的保證患者的生命和健康安全，針對新生物技術(shù)藥物在其上市1年內(nèi)應(yīng)當(dāng)定期檢測藥物抗體的變化情況。

4.生物技術(shù)藥物的免疫毒性和免疫原性研究內(nèi)容分析

（1）抗體滴度和抗體的特點(diǎn)。由于部分生物技術(shù)藥物在給藥前可能會出現(xiàn)特異性抗體，因此為了保證藥物使用的安全性，在給藥之前必須要做好抗體檢測工作。檢測時不同藥物的成分、性能存在差異，因此所應(yīng)用到的檢測方法也有所不同，在檢測工作實(shí)施之前，需要明確檢測的方法。對于生物技術(shù)藥物來說，其一般會將白蛋白作為保護(hù)劑，因此用藥過程中可能會產(chǎn)生白蛋白抗體，在將動物作為試驗(yàn)對象時，可以觀察動物的反應(yīng)情況，分析其抗體滴度以及抗體特點(diǎn)，然后做好各項(xiàng)數(shù)據(jù)記錄工作。

（2）抗體的中和活性。之所以要對抗體的中和活性進(jìn)行研究是因?yàn)樗幬镏械目贵w可能會增強(qiáng)或者是減少藥物清除，進(jìn)而使得藥物的半衰期、組織分布或者是靶器官暴露于藥物的時間，最終將會對藥物的活性與毒性產(chǎn)生影響。針對抗體中和活性在檢測時比較常用得到方法是生物學(xué)活性檢測法，比如說針對重組細(xì)胞因子采用的是國際上通用的依賴細(xì)胞株方法，將多個稀釋倍數(shù)的動物血清與重組細(xì)胞因子均勻溫孵適當(dāng)時間后，將其加大已種植依賴細(xì)胞株的培養(yǎng)半板孔里面，通過測量吸收度分析抗體是否降低重組細(xì)胞因子促進(jìn)細(xì)胞增殖的活習(xí)慣。但是需要注意的是采用基于細(xì)胞的抗體中和活性檢測，其靈敏度相對比較低。生物技術(shù)藥物在動物體內(nèi)產(chǎn)生的抗體并不一定具有中和性。如果在體外試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)抗體具有中和活性，并觀察到產(chǎn)生的抗體中和了大多數(shù)實(shí)驗(yàn)動物的藥理或者是毒理效應(yīng)的時候，可以停止繼續(xù)給藥。

（3）免疫復(fù)合物沉積?？贵w與抗原性結(jié)合將會生成免疫復(fù)合物，如果這種復(fù)合物沉積在器官中將會引發(fā)諸多病理變化，而這種病理變化還可能會導(dǎo)致毒性反應(yīng)的原因分析變得困難。因此針對免疫復(fù)合物在進(jìn)行分析時，通常使用免疫組織化學(xué)的方法檢查免疫復(fù)合物是否在組織中大量沉積，結(jié)合提示器官功能變化的血液深化指標(biāo)和尿液檢查結(jié)果，分析生物技術(shù)藥物形成的免疫復(fù)合物的沉積是否會導(dǎo)致個體的組織器官出現(xiàn)病變。此外，在檢查工作實(shí)施期間還可以應(yīng)用綜合分析法，將多種方法結(jié)合在一起分析生物技術(shù)藥物的免疫毒性和免疫原性?？傊?，生物技術(shù)藥物是制藥領(lǐng)域中的重點(diǎn)研究對象，做好相關(guān)研發(fā)工作可以為醫(yī)務(wù)工作者在臨床治療工作中提供更多的施藥選擇，達(dá)到對癥下藥的目的，可以更好的幫助患者恢復(fù)健康。但是針對生物技術(shù)藥物的免疫毒性與原性問題，在研究中必須要提高重視度，做好各項(xiàng)檢測工作，這樣才能更好的推動生物技術(shù)藥物朝著更好的方向發(fā)展，提升藥物質(zhì)量。