陳靜 徐發(fā)林

[摘要] 目的 探討解脲脲原體（UU）感染對(duì)胎齡<32周早產(chǎn)兒呼吸系統(tǒng)的影響，以期為降低胎齡<32周早產(chǎn)兒感染率提供臨床依據(jù)。 方法 選取2018年11月至2019年11月我院早產(chǎn)兒80例（胎齡均<32周），將其分為UU感染組與UU非感染組，取早產(chǎn)兒鼻咽部分泌物并采用熒光定量PCR技術(shù)進(jìn)行UU檢測，比較不同胎齡UU感染組中患兒有創(chuàng)呼吸機(jī)使用時(shí)間、支氣管肺發(fā)育不良（BPD）發(fā)生率的差異。 結(jié)果 UU陽性檢出率，PCR法陽性率為33.75%，培養(yǎng)法陽性率為30.0%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。胎齡在25～26周的早產(chǎn)兒UU感染率，PCR法為61.11%（11/18），培養(yǎng)法為55.56%（10/18）;26+1～28周的早產(chǎn)兒UU感染率為35.29%（6/17）;28+1～30周的早產(chǎn)兒UU感染率，PCR法為25.0%（7/28），培養(yǎng)法為21.43%（6/28）;30+1～32周的早產(chǎn)兒UU感染率，PCR法為17.65%（3/17），培養(yǎng)法為11.76%（2/17）。早產(chǎn)兒胎齡越小，UU感染率越高，各組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。呼吸系統(tǒng)發(fā)病率顯示，早產(chǎn)兒胎齡與機(jī)械通氣時(shí)間越長和支氣管肺發(fā)育不良呈明顯負(fù)相關(guān)，PROM：R=-0.994;BPD：R=-0.951，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果表明BPD發(fā)病率越高，有創(chuàng)呼吸機(jī)應(yīng)用時(shí)間越長。 結(jié)論 UU感染與早產(chǎn)胎齡有一定關(guān)系，UU感染對(duì)早產(chǎn)兒呼吸系統(tǒng)有一定影響，在產(chǎn)前保健中應(yīng)加強(qiáng)孕婦UU檢測和治療。

[關(guān)鍵詞] 解脲脲原體;呼吸系統(tǒng);并發(fā)癥;早產(chǎn)胎齡;檢測

[Abstract] Objective To explore the impacts of ureaplasma urealyticum（UU） infection on respiratory system of premature infants with gestational age less than 32 weeks， so as to provide clinical basis for reducing the infection rate of premature infants with gestational age less than 32 weeks. Methods A total of 80 premature infants（all gestational ages were less than 32 weeks） admitted to our hospital from November 2018 to November 2019 were selected and divided into the UU infection group（case） and the UU non-infection group（case）. Nasopharyngeal secretions of premature infants were collected and detected for UU using fluorescent quantitative PCR technology， and the use time of invasive ventilator and the difference in the incidence of bronchopulmonary dysplasia（BPD） among children within the UU infection group for different gestational ages were compared. Results The comparison of the positive detection rate of UU between， the positive rate of PCR method was 33.75%， and the positive rate of culture method was 30.00%， with no statistically significant difference（P>0.05）. The infection rate of UU in premature infants with gestational age from 25 to 26 weeks was 61.11%（11/18） by PCR method and 55.56%（10/18） by culture method. The infection rate of UU in premature infants with gestational age from 26+1 to 28 weeks was 35.29%（6/17）. The infection rate of UU in premature infants with gestational age from 28+1 to 30 weeks was 25.00%（7/28） by PCR method and 21.43%（6/28） by culture method. The infection rate of UU in premature infants with gestational age from 30+1 to 32 weeks was 17.65%（3/17） by PCR method and 11.76%（2/17） by culture method. The smaller the gestational age was， the higher the UU infection rate was， and the difference was not statistically significant among groups. Comparison of respiratory system morbidity showed a significant negative correlation between gestational age and longer duration of mechanical ventilation and bronchopulmonary dysplasia in premature infants， In terms of PROM， R=-0.994. In terms of BPD， R=-0.951. And the differences were statistically significant. The results showed that the higher incidence of BPD was， the longer the application time of invasive ventilator was. Conclusion UU infection has a certain correlation with premature gestational age and has a certain impact on the respiratory system of premature infants. Therefore， the detection and treatment of UU in pregnant women should be strengthened in prenatal nursing.

[Key words] Ureaplasma urealyticum; Respiratory system; Complication; Premature gestational age; Detection

早產(chǎn)兒指妊娠不足37周的活產(chǎn)新生兒，其因器官發(fā)育不完全及免疫功能低下，出生后對(duì)外界抵抗力低于正常新生兒，存活率較低[1]。目前宮內(nèi)感染被認(rèn)為可能是導(dǎo)致早產(chǎn)的主要原因之一[2]。解脲脲原體（Ureaplasma urealyticum，UU）主要寄生于人體泌尿生殖道，孕婦感染UU可引起宮內(nèi)感染，從而導(dǎo)致胎膜早破（Premature rupture of membranes，PROM）、絨毛膜羊膜炎及早產(chǎn)等;UU感染可通過母嬰垂直傳遞，新生兒感染后可導(dǎo)致先天性肺炎、支氣管肺發(fā)育不良（Bronchopulmonary dysplasia，BPD）等。近年來，關(guān)于UU感染的研究報(bào)道日益增多，其所引起的泌尿生殖道感染也正在逐步受到重視。楊耀鋒等[3]指出UU感染與早產(chǎn)兒支氣管肺發(fā)育不良密切相關(guān)，是早產(chǎn)兒BPD產(chǎn)生的重要原因之一。但目前關(guān)于UU感染對(duì)早產(chǎn)兒呼吸系統(tǒng)的影響多集中在某一具體胎齡，對(duì)于UU感染對(duì)不同胎齡早產(chǎn)兒呼吸系統(tǒng)的研究較少。因此，本重點(diǎn)研究UU感染對(duì)胎齡<32周中不同胎齡的早產(chǎn)兒呼吸系統(tǒng)的影響，進(jìn)一步分析UU感染對(duì)不同胎齡早產(chǎn)兒呼吸系統(tǒng)的影響，以期為臨床針對(duì)不同胎齡早產(chǎn)兒UU感染造成呼吸系統(tǒng)疾病的治療提供理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年11月至2019年11月期間我院早產(chǎn)兒80例（胎齡均<32周），無窒息史和畸形，其中25周<胎齡≤26周18例，26周<胎齡≤28周17例，28周<胎齡≤30周28例，30周<胎齡<32周17例。詳細(xì)記錄患兒的臨床資料，如母親的情況、患兒的情況、入院后的檢查和治療過程等，并由患兒母親自愿簽訂知情同意書，以協(xié)助本研究的進(jìn)行。所有患兒的臨床資料均完整。本研究方案已通過本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)? BPD的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2001年美國多家國立衛(wèi)生研究機(jī)構(gòu)（NICHD/NHLBL/ORD）聯(lián)合BPD研究組發(fā)布BPD定義及診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，患兒在出生后的28 d仍需要持續(xù)使用氧或機(jī)械通氣，同時(shí)肺部具有典型的雙肺紋增粗、透亮度差、呈毛玻璃樣、局限性肺氣腫或囊腔樣改變等典型的X線表現(xiàn)。若胎齡<32周，根據(jù)糾正胎齡36周或出院時(shí)所需FiO2分為：①輕度：不需氧;②中度：FiO2<30%;③重度：FiO2≥30%和（或）需要正壓通氣。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)[5]? ①合并嚴(yán)重疾病者;②合并嚴(yán)重心腦血管疾病者;③治療期間服用對(duì)本研究有干擾的藥物者;④中途脫落病例。

1.3 材料

UU培養(yǎng)試劑盒由生物梅里埃公司提供，UU聚合酶連反應(yīng)（PCR-熒光探針）檢測試劑盒由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供（國械注準(zhǔn)：2015340 1995）。

1.4 方法

樣本采集：早產(chǎn)兒在出生后24 h內(nèi)使用無菌棉拭子經(jīng)鼻腔至鼻咽后部快速旋轉(zhuǎn)2周，1份拭子用于UU分裂培養(yǎng)檢測，另一份拭子置于裝有無菌生理鹽水的離心管中，-80℃保存，用于PCR檢測。

1.5 觀察指標(biāo)

①UU分離培養(yǎng)：早產(chǎn)兒鼻咽分泌物用生理鹽水清洗，接種于UU液體培養(yǎng)基。若檢測結(jié)果為陽性，培養(yǎng)基中的底物尿素被分解，培養(yǎng)基pH升高，顏色從黃色變紅色。②PCR法擴(kuò)增及檢測樣本進(jìn)行生理鹽水清洗后，進(jìn)行離心并棄去上清，加入100 μL裂解液裂解后用于PCR擴(kuò)增。在嚴(yán)格按使用說明書操作下，進(jìn)行PCR檢測。紫外線檢測儀觀察到與陽性對(duì)照同一位置出現(xiàn)UU擴(kuò)增帶則為結(jié)果陽性。③統(tǒng)計(jì)分析兩種不同檢測方法的鑒定結(jié)果，并根據(jù)其結(jié)果分為UU感染組和UU非感染組，統(tǒng)計(jì)分析兩組不同胎齡的產(chǎn)兒與UU感染陽性率，分析UU和不同胎齡早產(chǎn)兒的機(jī)械通氣最長時(shí)間以及BPD的關(guān)系及其相關(guān)危險(xiǎn)因素。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn);計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用Student t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方法比較

兩種方法共檢出UU陽性新生兒28例，陽性率為35.00%（28/80）。其中PCR法和培養(yǎng)法均陽性23例，PCR法單陽性4例，培養(yǎng)法單陽性1例。PCR法陽性27例，陽性率為33.75%（27/80），培養(yǎng)法陽性24例，陽性率為30.00%（24/80）。結(jié)果表明兩種檢測方法經(jīng)校正χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.431，P<0.01）。而兩種UU陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.823，P>0.05）。見表1。

2.2 不同早產(chǎn)胎齡與UU感染陽性率的關(guān)系

通過對(duì)不同胎齡早產(chǎn)兒UU感染率的分析比較得出，胎齡在25～26周的早產(chǎn)兒UU感染率，PCR法為61.11%（11/18），培養(yǎng)法為55.56%（10/18）;26+1～28周的早產(chǎn)兒UU感染率為35.29%（6/17）;28+1～30周的早產(chǎn)兒UU感染率為PCR法25%（7/28），培養(yǎng)法21.43%（6/28）;30+1～32周的早產(chǎn)兒UU感染率為PCR法17.65%（3/17），培養(yǎng)法為11.76%（2/17）。各組之間UU陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，早產(chǎn)兒胎齡越小，隨著早產(chǎn)兒胎齡的增加，其UU感染率逐漸下降。通過相關(guān)性分析得出，早產(chǎn)兒胎齡與UU感染率呈明顯負(fù)相關(guān)，PCR法R=-0.961，P<0.05;培養(yǎng)法R=-0.992，P<0.05。見表2。

2.3 不同早產(chǎn)胎齡與呼吸系統(tǒng)的關(guān)系

通過對(duì)不同胎齡新生兒呼吸系統(tǒng)相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生率和其早產(chǎn)胎齡比較得出，胎齡越小，各組中UU感染早產(chǎn)兒的機(jī)械通氣時(shí)間越長，支氣管肺發(fā)育不良陽性率越高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。通過相關(guān)性分析得出，早產(chǎn)兒胎齡與機(jī)械通氣時(shí)間越長和支氣管肺發(fā)育不良呈明顯負(fù)相關(guān)，PROM：R=-0.994，P<0.05;絨毛膜羊膜炎：R=-0.951，P<0.05。見表3。

3 討論

泌尿生殖道支原體感染是性傳播性疾病之一。支原體是一類沒有細(xì)胞壁的，介于細(xì)菌與病毒之間的原核微生物，其種類繁多。從人泌尿生殖道分離出的8種支原體中，UU和人型支原體是最常分離和引起母嬰感染發(fā)病的兩種支原體[6]。UU作為一種條件致病微生物，在一定條件下可導(dǎo)致多種婦科疾病，如宮頸炎、非淋菌性尿道炎、盆腔感染性疾病等[7]。解脲脲原體不僅可以引起非淋球菌性尿道炎（Nongonococcal Urethritis，NGU），還可以引起不孕、流產(chǎn)和反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎;也有文獻(xiàn)報(bào)道解脲脲原體是男性不育的主要病因之一;雖然非淋球菌性尿道炎現(xiàn)已不作為性傳播疾病管理，但仍不鮮見，所以臨床工作中還存在解脲脲原體的檢測需求。UU的檢測方法主要包括培養(yǎng)法和PCR法，培養(yǎng)法操作相對(duì)簡單，一般實(shí)驗(yàn)室均可開展，但較為耗時(shí);PCR法靈敏度高，檢測快捷，但操作要求高，費(fèi)用也較高[8]。解脲脲原體結(jié)構(gòu)簡單，外觀呈高度多態(tài)性，其營養(yǎng)要求較高，生長相對(duì)緩慢、耐酸，最適pH值為6.0，目前支原體病原學(xué)檢測手段主要有分子生物學(xué)、微生物學(xué)、血清學(xué)和免疫學(xué)方法等，其中微生物學(xué)和PCR法最為常用[9]。本研究發(fā)現(xiàn)兩種方法測出的結(jié)果有顯著相關(guān)性，且UU陽性檢出率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明兩者的檢測結(jié)果可靠性相當(dāng)，而PCR法檢測更適用于臨床快速診斷。

近年來，多項(xiàng)研究指出產(chǎn)婦UU感染可能引起新生兒早產(chǎn)，并與胎兒發(fā)育遲緩、低出生體重、甚至圍產(chǎn)期胎兒死亡等不良結(jié)局有關(guān)[10]。產(chǎn)婦生殖道定植的UU可通過垂直傳播感染胎兒，最終引起胎兒感染。早在1987年，Eveline等[11]指出，患有絨毛膜羊膜炎的胎盤中，38%～60%可檢出UU，而無絨毛膜羊膜炎的胎盤中只有13%～17%檢出UU，并以此來推測UU可引起絨毛膜羊膜炎。隨著研究的進(jìn)一步深入，UU宮內(nèi)定植可導(dǎo)致胎兒肺部出現(xiàn)炎癥變化，在UU誘導(dǎo)的羊?qū)m內(nèi)絨毛膜羊膜炎模型中，Collins等[12]觀察到胎羊肺出現(xiàn)IL-1β、IL-8、IL-6升高及彈性蛋白沉積等炎癥改變。胎齡<32周的早產(chǎn)兒由于器官發(fā)育極不成熟，免疫功能低下，存活率較>32周胎齡的早產(chǎn)兒更低[13-14]。目前大多數(shù)研究重點(diǎn)在足月和未足月新生兒及不同出生體重兒之間UU感染率的比較，對(duì)胎齡<32周的早產(chǎn)兒UU感染情況目前國內(nèi)報(bào)道少。本研究發(fā)現(xiàn)胎齡小于32周早產(chǎn)兒的UU感染率為35%（28/80），說明其UU感染情況需要重視。本研究還發(fā)現(xiàn)，早產(chǎn)兒胎齡越低其UU感染率越高，胎齡在25～26周的UU感染率高達(dá)61.11%（PCR法）和55.56%（培養(yǎng)法），而胎齡在31～32周的UU感染率為17.65%（PCR法）和11.76%（培養(yǎng)法）。提示感染率與早產(chǎn)兒胎齡有關(guān)，這與國內(nèi)外學(xué)者報(bào)道一致[15-18]。此外，本研究將早產(chǎn)兒胎齡與早產(chǎn)兒相關(guān)呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥發(fā)生率作了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)機(jī)械通氣時(shí)間和支氣管肺發(fā)育不良的陽性率與胎齡呈明顯負(fù)相關(guān)，胎齡越小，早產(chǎn)兒呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥發(fā)生率越高。

綜上所述，早產(chǎn)兒胎齡（胎齡<32周）與UU感染和早產(chǎn)兒呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥有一定關(guān)系，胎齡越小其UU感染率和呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥發(fā)生率越高。在產(chǎn)前保健中應(yīng)加強(qiáng)對(duì)產(chǎn)婦UU檢測和早產(chǎn)兒呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥的治療，預(yù)防早產(chǎn)發(fā)生。

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（收稿日期：2020-08-07）