陳志琳，杜洪志，萬(wàn)宛若，李 瑋

(貴州中醫(yī)藥大學(xué)，貴州 貴陽(yáng) 550025)

石菖蒲來(lái)源于天南星科植物石菖蒲AcorustatarinowiiSchott 的干燥根莖。其味辛、苦，性溫；歸心、胃經(jīng)；具有開(kāi)竅豁痰、醒神益智、化濕開(kāi)胃之功。用于治療神昏癲癇、健忘失眠、耳鳴耳聾、脘痞不饑、禁口下痢等癥[1]。石菖蒲主含揮發(fā)性成分及苯甲酸類、多糖等[2]。其揮發(fā)性成分主要為單貼、倍半萜、苯丙素等。其揮發(fā)性成分具有鎮(zhèn)靜、抗驚厥[3]，興奮抗抑郁[4]，抗癲癇[5]，引藥入腦[6]等藥理作用。在傳統(tǒng)中醫(yī)臨床中，石菖蒲是芳香寧神、滌痰開(kāi)竅之要藥，臨床上多生用。

2005年版《貴州省中藥飲片炮制規(guī)范》收載的石菖蒲的炮制方法為麩炒，麩炒之后能增強(qiáng)化濕開(kāi)胃的作用[7]。中醫(yī)理論認(rèn)為，氣味芳香的藥物能化濕辟濁，振奮脾胃，石菖蒲揮發(fā)油具有特殊芳香之氣，其揮發(fā)性成分可能為化濕開(kāi)胃的主要藥效成分，而麩炒石菖蒲炮制前后其揮發(fā)油成分如何發(fā)生變化，目前未見(jiàn)相關(guān)研究報(bào)道。為了探明石菖蒲麩炒前后揮發(fā)油成分的變化，本實(shí)驗(yàn)采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)，對(duì)石菖蒲麩炒前后揮發(fā)油成分進(jìn)行分析，研究相關(guān)成分的量變和質(zhì)變規(guī)律，擬為進(jìn)一步優(yōu)化炮制工藝，制定飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，闡明麩炒炮制“增強(qiáng)化濕開(kāi)胃”的作用機(jī)理奠定良好的研究基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

HP6890-5975C氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)安捷倫公司)；揮發(fā)油提取器；電子天平(型號(hào)：ML4002E，梅特勒-托利多儀器上海有限公司)；電熱鼓風(fēng)干燥箱(型號(hào)：GZX-9140MBE，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)等。

1.2 材料

實(shí)驗(yàn)用石菖蒲采自貴陽(yáng)市百花湖，經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)孫慶文教授鑒定為天南星科植物石菖蒲 Acortw tatarinowii Schott 的干燥根莖。麩炒品為實(shí)驗(yàn)室自制。

2 方法

2.1 樣品制備

2.1.1 生品飲片的制備

取石菖蒲適量除去雜質(zhì)，洗凈，潤(rùn)透，切厚片，于烘箱中40 ℃烘干，即得。

2.1.2 麩炒品的制備

取適量蜜麩于預(yù)熱適中的炒制容器內(nèi)，待麩下煙起，迅速投入石菖蒲片，文火翻炒至藥物表面呈黃色，具焦香氣，立即取出，篩去麥麩，攤開(kāi)晾涼。每100 kg石菖蒲片，用蜜麩12.5 kg[7]。

2.2 石菖蒲揮發(fā)油的提取

分別稱取石菖蒲生品、麩炒品粗粉(過(guò)二號(hào)篩)50 g，參照《中國(guó)藥典》2015版四部通則揮發(fā)油測(cè)定法甲法提取。所得揮發(fā)油用無(wú)水硫酸鈉脫水后備用。揮發(fā)油生品和麩炒品均為淡黃色透明油狀物，麩炒品顏色略深，具有特殊香氣。

2.3 GC-MS分析條件

2.3.1 氣相色譜條件

色譜柱為HP-5MS(60 m×0.25 mm×0.25 μm)彈性石英毛細(xì)管柱，初始溫度52 ℃(保留2 min)，以3 ℃/min升溫至124 ℃，以2 ℃/min升溫至190 ℃，再以10 ℃/min升溫至260 ℃，汽化室溫度250 ℃；載氣為高純He(99.999%)，載氣流量1.0 mL/min；運(yùn)行時(shí)間：66 min；溶劑延遲時(shí)間：6.0 min；柱前壓16.88 psi，分流比50∶1。

2.3.2 質(zhì)譜條件

離子源為EI源；離子源溫度230 ℃；發(fā)射電流34.6 μA；四極桿溫度150 ℃；倍增器電壓1953 V；電子能量70 eV；接口溫度280 ℃；質(zhì)量范圍29～500 amu。

2.4 數(shù)據(jù)處理

對(duì)總離子流圖中的各峰經(jīng)質(zhì)譜計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索及核對(duì)Nist17和Wiley275標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖，采用峰面積歸一化法對(duì)各組分進(jìn)行成分檢測(cè)和相對(duì)百分含量分析。

3 結(jié)果與討論

根據(jù)2.3項(xiàng)“GC-MS分析條件”，對(duì)石菖蒲生品和麩炒炮制品的揮發(fā)油進(jìn)行GC-MS分析，得生品和炮制品的總離子流圖，結(jié)果見(jiàn)圖1，麩炒前后揮發(fā)油中相對(duì)百分含量，結(jié)果見(jiàn)表1。

圖1 石菖蒲生品及炮制品總離子流圖

表1 石菖蒲麩炒前后揮發(fā)油的化學(xué)成分分析

通過(guò)GC-MS分析，從石菖蒲生品的揮發(fā)油中檢出74個(gè)色譜峰，鑒定了71種成分，從麩炒石菖蒲的揮發(fā)油中檢測(cè)出74個(gè)色譜峰，鑒定了71種成分。

石菖蒲經(jīng)過(guò)麩炒后揮發(fā)油成分發(fā)生了質(zhì)和量的變化，揮發(fā)油中的β-細(xì)辛醚等20個(gè)成分的相對(duì)含量有所增加，棕櫚酸等44個(gè)成分的相對(duì)含量降低，生成了肉桂醛(Cinnamaldehyde)、γ-細(xì)辛醚(γ-Asarone)、二十五(碳)烷(Pentacosane)3個(gè)新成分。α-萜品油烯(α-Terpinolene)、α-芳樟醇(Linalool)、4(14)，11-桉葉二烯[E-dudesma-4(14)，11-diene]這3種成分消失。Tatriene、β-金合歡烯(β-Farnesene)、香柏酮(N-ootkatone)、δ-欖香稀(δ-EIemene)、十五烷酸(Pentadecanoicacid)這5個(gè)成分炮制前后含量無(wú)變化。分析認(rèn)為，造成麩炒前后石菖蒲揮發(fā)油成分和含量的差異，除了與揮發(fā)油的揮發(fā)性及易氧化性有關(guān)外，可能與輔料、炮制溫度等因素加快了揮發(fā)油中某些成分轉(zhuǎn)化的速度有關(guān)。

β-細(xì)辛醚、α-細(xì)辛醚、反式甲基異丁香酚為石菖蒲主要揮發(fā)性成分物質(zhì)，經(jīng)麩炒后含量增加，分析認(rèn)為石菖蒲麩炒后化濕開(kāi)胃作用增強(qiáng)可能與主要揮發(fā)性成分含量增加相關(guān)，但其作用機(jī)制如何，尚待進(jìn)一步結(jié)合現(xiàn)代藥效學(xué)研究。

炮制可達(dá)到增效、減毒、改變藥性、增加新成分、擴(kuò)大藥用范圍的目的，以滿足臨床所需。通過(guò)對(duì)石菖蒲麩炒前后揮發(fā)油成分的分析，不僅為石菖蒲飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究及優(yōu)化炮制工藝奠定良好的研究基礎(chǔ)，同時(shí)，也為后期結(jié)合藥效學(xué)研究，進(jìn)一步明確石菖蒲麩炒前后藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及闡明炮制機(jī)理提供重要參考依據(jù)。為更好開(kāi)發(fā)利用石菖蒲植物資源，充分發(fā)揮臨床應(yīng)用，提供一定的科學(xué)依據(jù)。