黃錦源，代蔭梅

首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院婦科，北京100026

卵巢癌發(fā)病率和病死率均居女性惡性腫瘤的第八位［1］。盡管卵巢癌的手術(shù)、化療相關(guān)研究取得較多進(jìn)展，但卵巢癌患者的5 年生存率并沒有得到實(shí)質(zhì)性改善［2］。研究卵巢癌發(fā)生發(fā)展的分子基礎(chǔ)，尋找更有效的治療策略具有重要意義。長鏈非編碼RNA（lncRNA）是一類轉(zhuǎn)錄長度大于200個(gè)核苷酸的非蛋白質(zhì)編碼RNA，通過多種機(jī)制對(duì)一系列生物過程發(fā)揮廣泛的調(diào)節(jié)作用［3］。同源異型盒基因轉(zhuǎn)錄反義基因間RNA（HOTAIR）最早是由RINN 等發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)反式調(diào)控基因表達(dá)的lncRNA［4-6］。多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，HOTAIR 與卵巢癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，且在卵巢癌的診斷、治療和預(yù)后評(píng)估方面均有一定應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)收集相關(guān)研究并綜述如下。

1 HOTAIR在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制

1.1 HOTAIR 與卵巢癌易感性的關(guān)系 單核苷酸多態(tài)性是指一個(gè)基因共享序列中的單個(gè)核苷酸在物種個(gè)體間或在個(gè)體的成對(duì)染色體中改變超過1%時(shí)所導(dǎo)致的DNA序列多態(tài)性。HOTAIR單核苷酸多態(tài)性已被證明與肺癌、胃癌、宮頸癌等多種惡性腫瘤密切相關(guān)［7］。WU 等［8］研究顯示，HOTAIR rs4759314和rs7958904 與上皮性卵巢癌易感性顯著相關(guān)；在中國人群中，HOTAIR rs4759314 的AG 基因型和AA基因型攜帶者患上皮性卵巢癌風(fēng)險(xiǎn)顯著升高，而HOTAIR rs7958904 的C 等位基因攜帶者可顯著降低患上皮性卵巢癌的風(fēng)險(xiǎn)。QIU 等［9］研究發(fā)現(xiàn)，在中國人群中，HOTAIR rs920778 的 TT 基因型和 T 等位基因攜帶者患卵巢癌風(fēng)險(xiǎn)升高，與晚期腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后不良顯著相關(guān)，而未發(fā)現(xiàn)與患者年齡、腫瘤分化或組織亞型之間的相關(guān)性；此外，攜帶HOTAIR rs920778 TT 基因型和CT基因型患者的總生存期比攜帶CC 基因型的患者顯著縮短。后來的一項(xiàng)研究顯示，在伊朗人群中，HOTAIR rs4759314 G 和 rs1899663 T 攜帶 者 對(duì)卵巢癌的易感性增高［10］。這些發(fā)現(xiàn)表明，HOTAIR 單核苷酸多態(tài)性與卵巢癌的易感性密切相關(guān)，提示在普通 人 群 中 篩 查 HOTAIR rs4759314、rs7958904、rs920778、rs1899663 以及識(shí)別基因型和等位基因類型有助于篩查卵巢癌易感人群，對(duì)于卵巢癌的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷具有重要意義。

1.2 HOTAIR與卵巢癌發(fā)病的關(guān)系 HOTAIR已被證明可以促進(jìn)肝癌、肺癌、結(jié)直腸癌、宮頸癌等多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，被認(rèn)為是一種癌基因［11-14］。HOTAIR 也與卵巢癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。HOTAIR 可競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合 miR-1、miR-214-3p 和 miR-330-5p 調(diào)節(jié)絲裂原活化蛋白激酶1 的表達(dá)，競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-214 和miR-217 調(diào)節(jié)磷脂酰肌醇3 激酶調(diào)節(jié)亞基3 的表達(dá)，從而促進(jìn)卵巢癌SKOV3 細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲［15-16］。李經(jīng)緯等［17］證實(shí)，HOTAIR 能夠通過抑制miR-519d 的表達(dá)，發(fā)揮促進(jìn)卵巢癌SKOV3 細(xì)胞增殖的作用。此外，HOTAIR 可通過競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源性RNA 調(diào)控網(wǎng)絡(luò)負(fù)性調(diào)控miR-206 的表達(dá)，正向刺激細(xì)胞周期蛋白（Cyclin）D1 和Cyclin D2的表達(dá)，促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期進(jìn)展、細(xì)胞遷移和侵襲［18］。下調(diào)卵巢癌細(xì)胞中HOTAIR 的表達(dá)可通過抑制HOXA7基因的表達(dá)從而抑制細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；HOTAIR 和HOXA7 基因下調(diào)均可抑制腫瘤生長［19］。ZHANG 等［20］研究證實(shí)，HOTAIR 通過競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-373，正向調(diào)節(jié)Rab22a蛋白的表達(dá)，而Rab22a能夠調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖和上皮－間質(zhì)轉(zhuǎn)化過程。

QIU 等［21］闡明了 HOTAIR 在漿液性卵巢癌細(xì)胞增殖過程中起到關(guān)鍵作用，部分通過調(diào)節(jié)Cyclin E、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3 和 BRCA1 等細(xì)胞周期和凋亡相關(guān)蛋白來調(diào)節(jié)卵巢癌細(xì)胞周期進(jìn)程和細(xì)胞凋亡過程。而在鉑誘導(dǎo)的DNA 損傷反應(yīng)過程中，HOTAIR 可調(diào)節(jié)激活基因表達(dá)（包括Chk1 和γ-H2AX），以抑制卵巢癌細(xì)胞周期進(jìn)程［22］。ZHANG等［23］證實(shí)，HOTAIR充當(dāng)miRNA海綿“吸附”miR-206，導(dǎo)致T-box 轉(zhuǎn)錄因子3 表達(dá)上調(diào)，從而維持卵巢癌干細(xì)胞的干細(xì)胞特性。而下調(diào)卵巢癌干細(xì)胞中HOTAIR 表達(dá)則可以抑制上皮－間質(zhì)轉(zhuǎn)化，減少體外細(xì)胞的遷移和侵襲，抑制體內(nèi)腫瘤生長和轉(zhuǎn)移［24］。此外，HOTAIR 的敲除既可以通過抑制MMP和上皮－間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)基因表達(dá)來減少高轉(zhuǎn)移性上皮性卵巢癌細(xì)胞系的遷移和侵襲，也能夠顯著降低上皮性卵巢癌體內(nèi)腹膜轉(zhuǎn)移模型腫瘤的直徑，減少腫瘤灶的數(shù)量并抑制腫瘤體內(nèi)轉(zhuǎn)移［25］。另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，抑制卵巢癌細(xì)胞中HOTAIR 的表達(dá)，能夠減少Snail 蛋白的表達(dá)，增加上皮型鈣黏蛋白的表達(dá)，從而顯著降低卵巢癌細(xì)胞的侵襲能力和對(duì)裸鼠的致瘤能力［26］。

2 HOTAIR在卵巢癌診斷中的應(yīng)用

由于卵巢癌早期缺乏特征性癥狀和有效的篩查方法，約70%的卵巢癌患者確診時(shí)已為晚期，積極尋找有效的卵巢癌標(biāo)志物對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)卵巢癌非常重要［27］。ZHANG 等［23］發(fā)現(xiàn)，與卵巢良性上皮性腫瘤患者相比，卵巢癌患者循環(huán)中HOTAIR 的表達(dá)水平更高，循環(huán)HOTAIR 用于區(qū)分卵巢癌和卵巢良性腫瘤的ROC 曲線下面積（AUC）為0.867，特異度和敏感度分別為82.4%和80.0%，約登指數(shù)0.624。李洋等［28］研究發(fā)現(xiàn)，卵巢癌患者血清中HOTAIR 的表達(dá)較健康對(duì)照組顯著升高，AUC 為0.947。因此，循環(huán)HOTAIR 有望成為卵巢癌早期診斷的一種生物標(biāo)志物。此外，牛荔等［29］研究發(fā)現(xiàn)，血清糖類抗原125>200 kU/L 患者的HOTAIR 陽性率和相對(duì)表達(dá)量高于≤200 kU/L 的患者，但是聯(lián)合使用HOTAIR和糖類抗原125 等其他生物標(biāo)志物是否比單獨(dú)指標(biāo)檢測(cè)有更好的診斷效能，還需要進(jìn)一步驗(yàn)證。

3 HOTAIR在卵巢癌治療中的應(yīng)用

隨著臨床上化療藥物的廣泛應(yīng)用，許多卵巢癌對(duì)鉑類和紫杉醇類等化療藥物已產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致患者預(yù)后不良。因此，卵巢癌耐藥性問題已得到廣泛關(guān)注。研究表明，對(duì)順鉑耐藥的卵巢癌細(xì)胞中HOTAIR 表達(dá)水平上調(diào)，與卵巢癌細(xì)胞的鉑耐藥性之間有強(qiáng)相關(guān)性［22，30］。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，卵巢癌細(xì)胞中HOTAIR 表達(dá)升高可通過激活Wnt/β-catenin途徑誘導(dǎo)細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥［31］。HOTAIR 也可競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合 miR-138-5p，阻止 miR-138-5p 與 zeste 同源基因增強(qiáng)子2 和組蛋白去乙?；附Y(jié)合，從而促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性［30］。而下調(diào)卵巢癌細(xì)胞中HOTAIR 的表達(dá)可提高卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性［19，27］。劉健等［32］發(fā)現(xiàn)，下調(diào)卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞SKOV3中HOTAIR的表達(dá)能夠逆轉(zhuǎn)細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性，抑制胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2 途徑可能是其作用機(jī)制。自噬調(diào)節(jié)可逆轉(zhuǎn)腫瘤對(duì)化療的耐藥性，包括順鉑耐藥性。YU等［33］證實(shí)，敲除卵巢癌細(xì)胞中的HOTAIR 可通過抑制順鉑誘導(dǎo)的自噬從而增加卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑治療的敏感性。因此，HOTAIR 有望成為順鉑耐藥卵巢癌的潛在治療靶點(diǎn)。

鉑類藥物是治療卵巢癌的一線藥物，可誘導(dǎo)DNA 鏈內(nèi)和鏈間交聯(lián)，產(chǎn)生單鏈斷裂，激活核苷酸切除修復(fù)［34］。TESCHENDORFF 等［35］認(rèn)為，HOTAIR與接受化療的類型在評(píng)估治療反應(yīng)方面存在明顯的交互作用；HOTAIR 表達(dá)或其更穩(wěn)定的替代的DNA甲基化信號(hào)可能表明卵巢癌細(xì)胞中存在對(duì)卡鉑耐藥的細(xì)胞子集，并可作為逆轉(zhuǎn)卡鉑耐藥性的新靶點(diǎn)。鉑類和紫杉醇相結(jié)合的化療已成為卵巢癌的標(biāo)準(zhǔn)治療方案。紫杉醇的臨床應(yīng)用顯著改善了卵巢癌的治療效果，但紫杉醇耐藥問題也同樣影響卵巢癌患者的預(yù)后。研究證實(shí)，HOTAIR 通過上調(diào)檢查點(diǎn)激酶1蛋白水平，增強(qiáng)上皮性卵巢癌對(duì)紫杉醇的耐藥性。JIANG 等［36］也發(fā)現(xiàn)，HOTAIR 可提高卵巢癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇的耐藥性，而下調(diào)HOTAIR 表達(dá)可抑制裸鼠卵巢癌生長，并增強(qiáng)紫杉醇療效。

以HOTAIR 為靶點(diǎn)的治療有望在人類惡性腫瘤的治療中得到應(yīng)用。從理論上講，HOTAIR 的活性可以通過特定的siRNA 或類似物沉默、有序列結(jié)合作用的miRNA 競(jìng)爭(zhēng)性調(diào)節(jié)、小分子干擾或屏蔽HO?TAIR 上的結(jié)合位點(diǎn)和功能結(jié)構(gòu)域、破壞HOTAIR 的高級(jí)結(jié)構(gòu)等多種方式來阻斷，也可以使用藥物直接針對(duì)HOTAIR 下游的通路和分子來達(dá)到治療作用。李經(jīng)緯等［37］研究發(fā)現(xiàn)，氧化苦參堿以劑量依賴性方式明顯降低了卵巢癌SKOV3 細(xì)胞中HOTAIR 的表達(dá)水平，且以時(shí)間和劑量依賴性方式抑制SKOV3 細(xì)胞增殖，其機(jī)制可能與調(diào)控凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2 和Bax 表達(dá)相關(guān)。OZES 等［38］使用一種基于肽核酸的方法特異性阻斷卵巢癌細(xì)胞中HOTAIR 與EZH2 的相互作用，在體外和體內(nèi)抑制HOTAIR-EZH2 的活性，降低 NF-κB 活性和及靶基因 MMP-9 和 IL-6 的表達(dá)，從而降低HOTAIR 高表達(dá)的卵巢癌細(xì)胞株的侵襲能力，提高對(duì)鉑類耐藥的卵巢腫瘤小鼠的化療敏感性，減少腫瘤形成并提高存活率。然而，通過siRNA 或miRNA 阻斷HOTAIR 的活性多是基于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，未來還需要進(jìn)一步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)來證實(shí)。

4 HOTAIR在卵巢癌預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用

尋找可靠的卵巢癌標(biāo)志物預(yù)測(cè)患者臨床轉(zhuǎn)歸至關(guān)重要。ZHANG 等［23］分析循環(huán) HOTAIR 與臨床病理參數(shù)之間的聯(lián)系，發(fā)現(xiàn)血漿HOTAIR 水平升高與FIGO 分期晚期和漿液性卵巢癌有關(guān)。另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，外周血HOTAIR 表達(dá)水平與卵巢癌術(shù)后轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)，可作為血清糖類抗原125 的輔助指標(biāo)預(yù)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)［39］。因此循環(huán)HOTAIR 檢測(cè)可作為一種非侵入性方法評(píng)估卵巢癌患者預(yù)后。此外，多項(xiàng)研究表明，上皮性卵巢癌組織中HOTAIR 的表達(dá)水平顯著高于非癌組織，HOTAIR 表達(dá)與上皮性卵巢癌的 FIGO 分期、組織學(xué)分級(jí)和轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)［18，25，28］。多因素Cox回歸分析顯示，HOTAIR表達(dá)水平是總生存期和無病生存期的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素，其高表達(dá)提示患者預(yù)后不良［25］。

漿液性卵巢癌是上皮性卵巢癌最常見的組織類型。與正常卵巢組織相比，HOTAIR 在漿液性卵巢癌組織中過度表達(dá)，并且HOTAIR 過度表達(dá)與侵襲性腫瘤表型和不良預(yù)后相關(guān)［21］。研究顯示，HO?TAIR 高表達(dá)或其更穩(wěn)定的替代的DNA 甲基化高信號(hào)可預(yù)測(cè)卡鉑治療的卵巢癌患者預(yù)后不良［35］。薈萃分析表明，HOTAIR 高表達(dá)與卵巢癌患者總生存期縮短相關(guān)［40］。因此，檢測(cè)卵巢癌組織中的HOTAIR對(duì)卵巢癌預(yù)后有良好的預(yù)測(cè)價(jià)值，HOTAIR 有望成為預(yù)測(cè)卵巢癌患者預(yù)后的分子標(biāo)志物。然而，也有研究認(rèn)為，HOTAIR 在原發(fā)性卵巢癌組織中的表達(dá)與臨床病理參數(shù)無關(guān)［35］，因此仍需要大規(guī)模和多中心的隨機(jī)試驗(yàn)來明確HOTAIR 對(duì)卵巢癌預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。

綜上所述，HOTAIR 已被證明能夠促進(jìn)卵巢癌的增殖、細(xì)胞周期進(jìn)程、遷移和侵襲，抑制細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)細(xì)胞自噬，誘導(dǎo)上皮－間充質(zhì)轉(zhuǎn)化和促進(jìn)化療耐藥性等多種病理過程，提示HOTAIR 在卵巢癌的診斷、治療和預(yù)后評(píng)估中有一定應(yīng)用價(jià)值。HOTAIR 表達(dá)分析可通過不同的定量技術(shù)進(jìn)行，如RT-PCR、基于簡單的比色觀察和電化學(xué)檢測(cè)的無PCR 診斷方法［41］。然而，組織樣本的收集可能涉及侵入性操作，是否活檢取樣、能否活檢取樣取決于臨床的初步判斷和分類，這限制了HOTAIR 檢測(cè)在臨床上的應(yīng)用。作為腫瘤組織的替代標(biāo)本，通過非侵入性操作便可獲取的循環(huán)HOTAIR 數(shù)據(jù)在診斷、治療和預(yù)后評(píng)估方面可能具有巨大的潛力。近年研究在HOTAIR 的生物學(xué)功能、作為潛在生物標(biāo)志物的開發(fā)和治療應(yīng)用等方面取得了可觀的進(jìn)展，但是HOTAIR 在卵巢癌中的生物學(xué)功能仍未被深入了解。除了已報(bào)道的HOTAIR 表達(dá)調(diào)控機(jī)制外，HOTAIR 是否通過其他機(jī)制參與卵巢癌的發(fā)生發(fā)展或化療耐藥性的產(chǎn)生，這些問題仍需要未來研究積極探索。隨著HOTAIR 下游途徑和相關(guān)分子不斷被發(fā)現(xiàn)，以HOTAIR 為靶點(diǎn)的抗腫瘤策略有望在包括卵巢癌在內(nèi)的惡性腫瘤治療中得到應(yīng)用。