孫華中，潘祝彬，趙金都，周玉良，高群

(安徽省兒童醫(yī)院，安徽 合肥 230022)

0 引言

肝母細(xì)胞瘤(Hepatoblastoma，HB)是一種原發(fā)于肝臟的胚胎性惡性腫瘤，也是兒童期最常見的惡性肝臟實(shí)體腫瘤[1]。在西方國(guó)家，HB的發(fā)病率約為1-2/1000000，亞洲人群發(fā)病率稍高[2,3]。近年來HB發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，從1922年到2004年，其發(fā)病率逐年增長(zhǎng)約4%，在1975年到2009年這30多年中，HB確診患者數(shù)量約增加了1倍[4-6]。其增長(zhǎng)幅度遠(yuǎn)超其他兒童惡性腫瘤，已經(jīng)成為了危害兒童健康的主要惡性腫瘤之一[7]。手術(shù)和化療是HB臨床治療的主要措施。國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道HB患兒的3年生存率為72.73%，5年生存率為50.0%[8]。目前，HB的發(fā)病機(jī)制并不明確，可能與遺傳因素、免疫應(yīng)答、低出生體重、染色體異常等多種不良因素有關(guān)[6]。其中，免疫調(diào)節(jié)與多種腫瘤的發(fā)生與發(fā)展關(guān)系密切，肝母細(xì)胞瘤也起到重要作用，本文就近些年關(guān)于肝母細(xì)胞瘤的免疫學(xué)研究做相關(guān)整理。

1 肝母細(xì)胞瘤與信號(hào)通路

1.1 P53信號(hào)通路

P53是一種轉(zhuǎn)錄因子，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)。在細(xì)胞受到癌基因激活、氧化應(yīng)激、核糖體應(yīng)激、DNA損傷以及缺氧等情況刺激時(shí)，可以轉(zhuǎn)錄和(或)激活下游大量基因，從而啟動(dòng)P53應(yīng)答基因的轉(zhuǎn)錄，阻滯細(xì)胞周期發(fā)展、加速細(xì)胞凋亡。水崢嶸等[11]對(duì)20例乳腺癌患者的GP73(系肝癌早期診斷和術(shù)后復(fù)發(fā)病情評(píng)估的理想血清標(biāo)記物)和P53表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)GP73和P53均過表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞較GP73單獨(dú)過表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞的增殖能力下降，凋亡水平上升。丁志丹等[12]研究發(fā)現(xiàn)P53在肺癌中低表達(dá)，并與STAT3蛋白(系STAT蛋白質(zhì)家族的成員，在細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡中起關(guān)鍵作用)的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，P53可能通過下調(diào)STAT3的表達(dá)，進(jìn)而抑制A549細(xì)胞生長(zhǎng)與發(fā)展，并且抑制其凋亡。Vaughan等[13]研究指出，P53關(guān)鍵的致癌途徑是：突變的P53可以通過控制腫瘤起始細(xì)胞的功能，并且誘導(dǎo)、激活其致瘤性。P53在肝母細(xì)胞瘤中也有相關(guān)報(bào)道。綜上說明抑制P53基因的突變對(duì)腫瘤治療具可行性，甚至在HB的治療中也能起到相應(yīng)的作用。

1.2 PI3K-AKT通路

PI3K-AKT通路是當(dāng)前已知的研究中最為清晰的信號(hào)通路之一。AKT是PI3K下游的主要效應(yīng)物。近幾年，研究人員發(fā)現(xiàn)PI3K-AKT信號(hào)通路是所有的散發(fā)性腫瘤中最常見的信號(hào)通路。Dey JH等[15]通過實(shí)驗(yàn)，降低細(xì)胞外信號(hào)，調(diào)節(jié)AKT、ERK1 / 2和磷脂酶Cgamma的活性，從而阻止了兩種腫瘤細(xì)胞的增殖。說明通過調(diào)節(jié)AKT通路上的細(xì)胞活性，可以抑制腫瘤細(xì)胞的增值。Pan Zhang等[16]發(fā)現(xiàn)應(yīng)用塞來昔布，可以通過下調(diào)Akt / mTOR信號(hào)通路和COX-2表達(dá)，進(jìn)而增強(qiáng)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞對(duì)放射治療的敏感性。說明通過調(diào)節(jié)Akt信號(hào)通路可以增加非小細(xì)胞肺癌放療的治療效果。Kobayashi T等[17]發(fā)現(xiàn)AKT和MAPK信號(hào)傳導(dǎo)是肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞中EGFR / HO-1途徑的主要介質(zhì)，從而說明這條信號(hào)通路參與肝母細(xì)胞瘤的發(fā)生發(fā)展。

1.3 NF-kB信號(hào)通路

NF-kB(核因子-kB)是細(xì)胞內(nèi)重要的核轉(zhuǎn)錄因子。它參與機(jī)體的免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、抑制細(xì)胞凋亡、與腫瘤的多個(gè)過程密切相關(guān)，因此通過藥物可能可以抑制NF-kB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，從而會(huì)成為腫瘤的治療手段。IL-2、IFN-a、IFN-b、GM-CSF、G-CSF、TNF-a這六種生長(zhǎng)因子均有研究證明與NF-kB的信號(hào)通路有關(guān)，也是被批準(zhǔn)應(yīng)用于腫瘤臨床治療的幾種細(xì)胞因子。Chen T等[19]研究發(fā)現(xiàn)可通過調(diào)節(jié)miR-21 /PTEN軸，滅活PI3K / AKT和NF-κB信號(hào)通路來抑制腎癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、遷移和侵襲，從而說明調(diào)節(jié)該通道可以抑制腎癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。Simó R等[21]研究證明TNFα減少了人類HepG2肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞產(chǎn)生的SHBG，通過HepG2細(xì)胞中的NF-kB激活降低肝臟HNF-4水平，這說明NF-kB也參與了肝母細(xì)胞瘤的發(fā)生發(fā)展，抑制了肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，這可能也是肝母細(xì)胞瘤的將來的治療方法之一。

由于目前信號(hào)通路的研究比較多，除了以上的一些經(jīng)典的信號(hào)通路意外，還發(fā)現(xiàn)Wnt信號(hào)可能在HB發(fā)生發(fā)展中也起到較為重要的作用[22-23]。此外，已報(bào)道的與HB發(fā)生和發(fā)展相關(guān)的分子機(jī)制還包括IGF2/H19、Notch、Hedgehog等信號(hào)通路[24-25]。

2 PD-1/PD-L1

PD-1(程序性死亡受體-1)/PD-L1(程序性死亡受體-1配體)是近些年發(fā)現(xiàn)的參與腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸機(jī)制的重要分子。PD-L1于多種腫瘤中高表達(dá)，其與淋巴細(xì)胞表面的PD -l結(jié)合后，可以降低機(jī)體的免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤的抵抗作用，從而發(fā)生腫瘤免疫逃逸。Almozyan等[26]對(duì)TCGA侵襲性乳腺癌基因的數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行分析統(tǒng)計(jì)，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)PD-L1的表達(dá)與乳腺癌干細(xì)胞關(guān)系密切，在其發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。Drakes ML等[27]的研究結(jié)果顯示：PD-l和PD-Ll在卵巢癌患者晚期與較低分期中表達(dá)量不同，在晚期中的表達(dá)量更多，與卵巢癌的分期呈負(fù)相關(guān)。Calderaro J等[28]的報(bào)道發(fā)現(xiàn)PD-L1在一種可能來源于肝臟干細(xì)胞的特定亞型肝癌中有表達(dá)。說明PD-L1在肝癌的發(fā)生發(fā)展中可能也起到相關(guān)作用。Schneider S等[29]發(fā)現(xiàn)PD-1的表達(dá)量與原發(fā)癌和是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，這一點(diǎn)可以作為腫瘤診斷和評(píng)估患者預(yù)后的重要指標(biāo)。Takahiro Aoki MD等[30]的研究發(fā)現(xiàn)，PD-L1在肝母細(xì)胞瘤腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出較強(qiáng)的染色，說明PD-L1存在于肝母細(xì)胞中，但其機(jī)體機(jī)制尚無相關(guān)研究。綜上所述，PD-l和 PD-LI與腫瘤的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后情況關(guān)系密切。也與肝母細(xì)胞瘤有著千絲萬縷的關(guān)系，但由于相關(guān)研究較少，具體作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

3 肝母細(xì)胞瘤與CD8+T淋巴細(xì)胞

T淋巴細(xì)胞是來源于骨髓的淋巴干細(xì)胞，在胸腺中發(fā)育成熟，然后通過淋巴循環(huán)和血液循環(huán)，分布到全身各個(gè)免疫器官及相關(guān)組織中，再發(fā)揮其免疫功能[31]。細(xì)胞毒性T(殺手T細(xì)胞)細(xì)胞是T淋巴細(xì)胞的一個(gè)分支，其表面標(biāo)志物是CD8，CD8+細(xì)胞毒T細(xì)胞其主要功能是：通過獲得性的免疫應(yīng)答，來清除病毒和抵抗腫瘤細(xì)胞發(fā)展。越來越多的研究顯示免疫代謝在適應(yīng)性免疫的過程中起著至關(guān)重要的作用，特別是抗腫瘤T細(xì)胞反應(yīng)[32]。腫瘤與免疫細(xì)胞之間的相互代謝作用可導(dǎo)致T細(xì)胞功能障礙，進(jìn)而出現(xiàn)免疫逃逸[33]?；罨腡細(xì)胞分泌的IFN-γ在固有和適應(yīng)性免疫中均可起關(guān)鍵作用[34]。鄭玉軍等[37]的報(bào)道中顯示，晚期肺癌患者與正常人對(duì)比，其CD8+T水平明顯升高，這說明肺癌患者的細(xì)胞免疫功能正處于抑制狀態(tài)。Ooft ML等[38]發(fā)現(xiàn)在鼻咽癌患者中，其腫瘤浸潤(rùn)的細(xì)胞毒性和輔助性T細(xì)胞表達(dá)都很高。Takahiro Aoki MD等[30]的報(bào)道顯示肝母細(xì)胞瘤腫瘤細(xì)胞中存在浸潤(rùn)的CD8+T細(xì)胞。而且有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者的腫瘤浸潤(rùn)性CD8+T細(xì)胞數(shù)量更高。這些研究都說明CD8+T在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。但是，目前關(guān)于肝母細(xì)胞瘤在CD8+T細(xì)胞中的研究還很少，其具體的作用機(jī)理也不明確，這也是我們需要進(jìn)行進(jìn)一步探究的。

通過以上總結(jié)發(fā)現(xiàn)，目前關(guān)于肝母細(xì)胞瘤的研究主要集中在信號(hào)通路上。CD8+T細(xì)胞等免疫細(xì)胞也參與了眾多腫瘤的發(fā)生發(fā)展，并存在于在肝母細(xì)胞瘤中。但其是否在肝母細(xì)胞瘤的發(fā)生、發(fā)展甚至預(yù)后過程中起到重要作用，這需要我們進(jìn)一步探索。免疫治療已應(yīng)用于多項(xiàng)實(shí)體瘤的治療中，在肝母細(xì)胞瘤中能否實(shí)現(xiàn)，其重要的靶向調(diào)控點(diǎn)目前亦未找到，這也需要進(jìn)一步研究。