孫志超

中獸藥抗病毒成分研究進(jìn)展

孫志超

（諸城外貿(mào)有限責(zé)任公司 山東 諸城 262200）

在抗生素得到廣泛應(yīng)用以后，病毒性疾病對(duì)人畜健康的危害就上升為所有感染性疾病中最重要的一類，尤其是當(dāng)前禽流感，豬高致病性藍(lán)耳病的肆虐給我國畜牧業(yè)造成了巨大的損失。大多數(shù)病毒對(duì)抗生素等藥物不敏感，目前已成為困擾醫(yī)學(xué)界的一大難題。醫(yī)用外源性干擾素，白細(xì)胞介素-α等能抑制病毒復(fù)制，提高機(jī)體細(xì)胞免疫功能，治療前景良好，但費(fèi)用昂貴，且大量使用尚有一定不良反應(yīng)，人醫(yī)尚且難以推廣應(yīng)用，獸醫(yī)更無法大量使用。在當(dāng)今崇尚自然，回歸自然，返醭歸真的浪潮中，尋找和開發(fā)無污染低毒副作用的、新的、安全有效的、特別是具有我國自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的抗病毒藥物具有十分重要的理論，經(jīng)濟(jì)和社會(huì)意義。天然藥物具有許多化學(xué)藥物所不具備的優(yōu)點(diǎn)，而中藥是其中重要的組成部分。我國的中藥資源極為豐富，研究和使用的歷史悠久，且價(jià)格低廉，效果明顯，易于普及。近年來，國內(nèi)外有關(guān)抗病毒中藥的研究日益增多，從中篩選其有效成分已成為當(dāng)前抗病毒新藥研發(fā)的一個(gè)熱點(diǎn)。本文從近幾年中獸藥抗病毒成分的研究現(xiàn)狀做一簡單概述。

1 單味中藥及其有效成分抗病毒研究進(jìn)展

（1）近年來，國內(nèi)外篩選了很多單味中藥進(jìn)行抗病毒研究，大多都為清熱解毒中藥，并且多數(shù)不但具有抗病毒作用而且還具有抗菌抗炎作用。現(xiàn)選取集中經(jīng)常應(yīng)用的幾味藥介紹。（2）金銀花所含成分有綠原酸、異綠原酸、黃酮化合物、芳樟醇、雙花醇等。主要化學(xué)成分為綠原酸類化合物[1]一般認(rèn)為，綠原酸和異綠原酸是金銀花重要的抗菌成分，但研究發(fā)現(xiàn)[2]，金銀花葉中的黃酮類物質(zhì)對(duì)腸道致病菌有較強(qiáng)的抑菌作用，且抑菌效果優(yōu)于綠原酸金銀花提取物。在體外對(duì)禽流感病毒福建株偽狂犬病病毒有明顯的抑制作用，且阻斷作用明顯優(yōu)于直接殺滅作用，雙花(金銀花)噴霧劑體內(nèi)抗病毒實(shí)驗(yàn)表明，其大小劑量對(duì)小鼠流感病毒性肺炎有明顯抑制作用，大劑量(11.4g/kg·d)對(duì)小鼠肺內(nèi)流感病毒增殖有顯著抑制作用[3-7]。（3）黃柏藥用部位主要為樹皮入藥。主要含生物堿類，小檗堿，藥根堿，木蘭堿，黃柏堿，N-甲基大麥芽堿，掌葉防己堿，蝙蝠葛任堿；檸檬甙素類:黃柏樹皮含黃柏內(nèi)酯，黃柏酮，黃柏酮酸；甾醇類：黃柏樹皮含-7脫氫豆甾醇，β-谷甾醇，菜油甾醇等等。具有廣泛的藥理作用抗菌抗病毒效果明顯，蔡等[8]選擇32種天然藥物的熱水提取液，對(duì)接種了單純皰疹病毒而引發(fā)皰疹的小鼠給藥，與阿昔洛韋對(duì)照組及空白對(duì)照組比較，黃柏給藥組可延緩皰疹癥狀發(fā)作或擴(kuò)散時(shí)間，延長小鼠生存時(shí)間，并顯著降低小鼠的死亡率。（4）甘草的成分極為復(fù)雜，含有三萜類，黃酮類，多糖等活性成分。主要抗病毒成分為甘草甜素，甘草酸的鉀、鈣鹽等甘草酸水解后產(chǎn)生葡萄糖醛酸和甘草次酸，甘草苷，甘草苷元及甘露醇等"研究表明甘草具有增強(qiáng)各種免疫細(xì)胞活性，誘生干擾素等免疫增強(qiáng)作用。張氏以體內(nèi)給藥方式，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行碳粒廓清實(shí)驗(yàn)、淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、血清溶血素水平測(cè)定實(shí)驗(yàn)，研究甘草多糖對(duì)非特異性和特異性免疫系統(tǒng)的影響結(jié)果甘草多糖對(duì)正常小鼠的免疫能力有促進(jìn)作用。甘草多糖能夠影響機(jī)體的非特異性和特異性免疫功能，且在實(shí)驗(yàn)所設(shè)范圍內(nèi)呈現(xiàn)一定的劑量關(guān)系并達(dá)到陽性對(duì)照藥物水平，說明甘草多糖對(duì)正常機(jī)體的免疫能力有促進(jìn)作用[9]。（5）貫葉連翹含有許多有效成分，包括苯甲基二蒽酮(如金絲桃素及其衍生物、偽金絲桃素、間苯三酚衍生物(貫葉金絲桃、假貫葉金絲桃adhuperforin、原花青素和鞣質(zhì))以及黃酮類如蘆丁、橡黃素槲皮苷、和雙芹菜甙元。一般認(rèn)為主要成分為金絲桃素和貫葉金絲桃素[10]2.5.1王曙陽等將體外培養(yǎng)的 BHK21 細(xì)胞感染FMDV后加入金絲桃素，通過細(xì)胞病變觀察、MTT法、透射電子顯微鏡觀察、H3-UR摻入試驗(yàn)，探討了光活化金絲桃素對(duì)FMDV體外生長增殖的影響。結(jié)果表明，金絲桃素有明顯的抑制 FMDV 致 BHK21 細(xì)胞病變效應(yīng)，能抑制FMDV的增殖，抑制率可達(dá)61.82%[11]。趙曉虹等采用Klein-Defors懸浮方法進(jìn)行了金絲桃素新制劑在雞胚內(nèi)對(duì)H5N1和H9N2亞型兩種強(qiáng)弱禽流感病毒的殺滅效果試驗(yàn)。結(jié)果表明，金絲桃素新制劑具有較好的殺病毒作用[12]Moraleda等通過鴨乙肝病毒(DHBV)模型研究HY對(duì)乙肝病毒的抗病毒活性，感染了DHBV的D2細(xì)胞在含一定濃度的HY的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，每日更換培養(yǎng)液，在不同時(shí)間測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液的感染性。結(jié)果表明，HY不同的濃度結(jié)果為，濃度為1~10ug/ml，可在5d內(nèi)或更長時(shí)間中阻斷D2細(xì)胞產(chǎn)生病毒顆粒；100ug/ml HY對(duì)細(xì)胞有毒性。Westernblot分析表明，HY引起DHBV表面抗原的釋放，并且使病毒顆粒的包膜蛋白形成不可逆的共價(jià)交聯(lián)而凝聚，也未發(fā)現(xiàn)與細(xì)胞有關(guān)的核心與包膜蛋白之間有類似的凝聚[13]。正是因?yàn)樗诳箵羟萘鞲羞^程中所起的巨大作用，引起了世界的重視。（6）魚腥草主要含揮發(fā)性成分、有機(jī)酸、甾醇、有機(jī)酸、生物堿多糖等魚腥草及其非揮發(fā)性成分具有抗病毒作用。魚腥草對(duì)多種病毒都有抑制作用。魚腥草揮發(fā)油對(duì)甲、乙型流感病毒和腮腺炎病毒均有一定的抑制效果；魚腥草乙酸乙酯提取物對(duì)甲、乙型流感病毒有較好的抑制作用[14]。魚腥草蒸餾液對(duì)甲型流感病毒有抑制作用[15]。魚腥草提取物4g(生藥)/ml，灌胃及滴鼻給藥對(duì)副流感病毒感染小鼠均有明顯預(yù)防保護(hù)作用，魚腥草煎劑1:10劑量對(duì)流感病毒亞洲甲型京科68-1株有抑制作用，并能延緩孤兒病毒Ｅ-CH011的致細(xì)胞病變作用。魚腥草以乙醇提取得到幾個(gè)非揮發(fā)性成分，其中魚腥草素Ⅲ對(duì)流感病毒FM1感染小鼠有預(yù)防保護(hù)作用。對(duì)EMC和HSVⅡ作用不明顯，合成魚腥草素的衍生物亦有較強(qiáng)的抗病毒作用。新鮮的魚腥草植物制備得水蒸氣蒸餾物對(duì)單純皰診1型病毒、流感病毒和人體免疫缺陷１型病毒(HIV-1)有直接抑制活性，且無細(xì)胞毒性。魚腥草蒸餾物3個(gè)主要成分—甲基正壬基酮、丹桂醛和辛醛也能使HSV-1、流感病毒和HIV-1失活。體外實(shí)驗(yàn)顯示魚腥草抗病毒作用的有效成分為其揮發(fā)油中的非揮發(fā)部分，作用機(jī)制是通過干擾病毒包膜而殺滅具包膜的病毒。

2 中藥單體抗病毒研究進(jìn)展

（1）中藥單體抗病毒篩選的較多，但是突破較小。上世紀(jì)八十年代日本學(xué)者首次報(bào)道了甘草甜素抗艾滋病病毒的作用，曾引起轟動(dòng)。艾滋病病毒感染者的治療原則是阻止病毒增殖和增強(qiáng)機(jī)體免疫力。實(shí)驗(yàn)證明甘草甜素可明顯抑制增殖，并具有免疫激活作用。給小鼠感染病毒制成艾滋病模型后，觀察了治療效果，發(fā)現(xiàn)治療后的小鼠存活期明顯延長，并且這些小鼠脾、淋巴結(jié)腫大被明顯抑制，對(duì)肝細(xì)胞、脾細(xì)胞和淋巴細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)他們的增殖能力增強(qiáng)。臨床用于治療艾滋病患者也收到一定效果，但還有待于進(jìn)一步觀察。（2）苦參堿可減輕肝細(xì)胞的變性、壞死，促進(jìn)肝細(xì)胞的再生和修復(fù)，具有明顯的保肝作用，能迅速降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶，提高血清白蛋白，降低球蛋白，對(duì)乙型肝炎病毒復(fù)制有一定的抑制作用，用于慢性乙型肝炎抗病毒治療，適應(yīng)證同干擾素，治療效果與干擾素?zé)o顯著性差異，且無干擾素的副作用[20]

3 與西藥合用抗病毒應(yīng)用

大部分抗病毒獸用中草藥具有多靶點(diǎn)多組分協(xié)同作用動(dòng)物機(jī)體特點(diǎn)，一般有抗菌抗病毒及提高機(jī)體免疫功能多種性能，與西藥結(jié)合更具有互補(bǔ)藥理作用的優(yōu)勢(shì)。采用中、西藥結(jié)合治療犬瘟熱，以共奏解毒、涼血、養(yǎng)陰、抗病毒、退熱之效，促進(jìn)改善和恢復(fù)機(jī)體的新陳代謝，增強(qiáng)免疫機(jī)能，驅(qū)散邪毒，可收良效[16]。應(yīng)用雞新城疫高免卵黃、氨芐青霉素等與金銀花，連翹，板藍(lán)根等中藥組成的方劑聯(lián)合應(yīng)用治療新城疫，經(jīng)過及時(shí)的綜合治療措施，病情很快好轉(zhuǎn)。對(duì)于葡萄球菌與新城疫的混合感染的疾病，配合一定中藥治療，防治效果會(huì)更有效[17]。雙花、板蘭根和VE等中西藥組成中西藥復(fù)方制劑，能有效防治禽流感，中西藥臨床聯(lián)合應(yīng)用比病毒靈恩諾沙星效果更加顯著，同時(shí)還可以有效防治禽流感和減蛋綜合癥引起的產(chǎn)蛋下降，延長產(chǎn)蛋高峰時(shí)間[18]。中西藥合用治療其他疾病的應(yīng)用在治療豬無名高熱的研究中，采用中西藥結(jié)合的方法對(duì)此病進(jìn)行治療，效果顯著[19]。

4 復(fù)方中藥抗病毒研究進(jìn)展

在中藥學(xué)理論指導(dǎo)下，利用兩種或兩種以上中藥配伍組成復(fù)方，研究其在抗病毒方面的協(xié)同作用，亦是近十年的熱點(diǎn)之—，其中包括傳統(tǒng)方劑及其加減方，還有眾多新組配方，并有不少已被開發(fā)為新藥應(yīng)用于臨床。雙黃連粉針劑:由金銀花、連翹、黃芩組成，具有明顯抗流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、單純性皰疹病毒、柯薩奇B型病毒、新型腸道病毒71型的作用；對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒、麻疹病毒、水泡性口炎病也有一定的抑制作用[21]。在臨床病毒性疾病的治療中已有應(yīng)用。正柴胡飲:由柴胡、陳皮、防風(fēng)、赤芍、甘草、生姜組成，其提取液4 mg/ml對(duì)RNA病毒的副流感病毒、呼吸道合胞病毒、柯薩奇B 型病毒和DNA病毒的腺病毒、單純性皰疹病毒均具有較強(qiáng)的抑制作用；對(duì)流感病毒(FM1株)感染小鼠所致肺部損害具有保護(hù)作用[22]。麻杏甘石湯:由麻黃、杏仁、甘草、石膏組成，其水提液對(duì)流感病毒具較好的抑制作用；其醇提液可顯著減輕A3V感染小鼠的肺炎病變和降低致死率[23]。荊防口服液:雞胚法實(shí)驗(yàn)表明，對(duì)流感病毒(FM1株)有顯著的抑制作用；在體實(shí)驗(yàn)證明，10g/kg劑量的荊防口服液能有效抑制FM1株引起的小鼠肺炎病變的產(chǎn)生[24]。

綜上所述，隨現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，中獸藥抗病毒作用無論是基礎(chǔ)理論研究、應(yīng)用研究，還是新技術(shù)開發(fā)方面，均有較快發(fā)展。合理開發(fā)新的中獸藥尋找新的有效成分，對(duì)新化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾改造，必將會(huì)為我國動(dòng)物源性食品安全生產(chǎn)和畜牧業(yè)健康養(yǎng)殖技術(shù)的發(fā)展產(chǎn)生推動(dòng)作用，有效解決當(dāng)前病毒病流行的問題。

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（2020–08–06）

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