趙楠，李宗堯

(南陽市中心醫(yī)院 檢驗科，河南 南陽 473000)

肝纖維化是由多種致病因子導(dǎo)致的肝內(nèi)結(jié)締組織增生異常，最重要的致病因素為乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)[1]。HBV長期存在于機體內(nèi)可持續(xù)性損傷肝臟結(jié)構(gòu)和功能，繼而致使肝細胞嚴重壞死和肝臟內(nèi)纖維增生，從而發(fā)生肝纖維化，控制效果欠佳時易進展為肝硬化[2]。隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)肝纖維化可以逆轉(zhuǎn)，需進一步對肝纖維化病理生理、逆轉(zhuǎn)機制進行研究，以尋找更加有效的治療方案[3]。本研究探討不同肝纖維化程度乙型病毒性肝炎患者血清HBV DNA、Ⅲ型前膠原肽(type Ⅲ procollagen，PCⅢ)的表達意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年1月至2019年6月南陽市中心醫(yī)院收治的120例乙型病毒性肝炎患者。120例患者：男63例，女57例；年齡33～50歲，平均(41.52±4.22)歲；病程2～7 a，平均(4.53±1.20)a；肝纖維化分期為S0期32例，S1期30例，S2期29例，S3期29例；肝炎程度為輕度42例，中度39例，重度39例。本研究經(jīng)南陽市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核通過。告知患者及家屬本研究內(nèi)容后其簽署知情同意書。

1.2 選取標準(1)納入標準：①經(jīng)乙肝五項、穿刺活檢等綜合性檢查確診為乙型病毒性肝炎；②符合肝纖維化分期中S0～S3期；③臨床資料完整；④符合恩替卡韋的用藥適應(yīng)證者，其適應(yīng)證包括病毒復(fù)制活躍、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine transaminase，ALT)持續(xù)增加或者肝臟組織結(jié)果顯示有活動性病變等。(2)排除標準：①嚴重認知障礙；②合并精神疾??；③合并全身性免疫系統(tǒng)疾?。虎芎喜⑵渌腥拘约膊?；⑤對治療藥物甘草酸二銨、還原型谷胱甘肽以及恩替卡韋成分過敏。

1.3 治療方法給予所有患者甘草酸二銨[華潤雙鶴利民藥業(yè)(濟南)有限公司，國藥準字H20065108]、還原型谷胱甘肽(福安藥業(yè)集團湖北人民制藥有限公司，國藥準字H20183085)、恩替卡韋(正大天晴藥業(yè)集團股份有限公司，國藥準字H20100019)聯(lián)合治療。口服恩替卡韋，每次0.5 mg，每日1次。取150 mL甘草酸二銨溶于50 g·L-1的 250 mL葡萄糖溶液中，靜脈滴注，每日1次。取還原型谷胱甘肽1.2 g溶于50 g·L-1的250 mL的葡萄糖溶液中，靜脈滴注，每日1次。

1.4 檢測方法取晨起肘靜脈血5 mL，離心速度為1 500 r·min-1，持續(xù)15 min，取血清，利用深圳匹基生物工程股份有限公司生產(chǎn)的Roche Light Cycle熒光PCR熒光定量儀以及檢測試劑盒，對血清HBV DNA水平進行定量檢測，利用放射免疫分析法檢測血清PCⅢ水平。試劑盒由上海海研醫(yī)學(xué)生物科技有限公司提供，操作步驟嚴格按照說明書進行。

1.5 觀察指標(1)不同肝纖維化程度乙型病毒性肝炎患者的血清HBV DNA、PCⅢ水平。(2)血清HBV DNA水平與血清PCⅢ水平的相關(guān)性。(3)治療前和治療1、3、6個月的血清HBV DNA、PCⅢ水平。

2 結(jié)果

2.1 不同肝纖維化程度乙型病毒性肝炎患者的血清HBV DNA、PCⅢ水平與S0期比較，S1期、S2期、S3期血清HBV DNA、PCⅢ水平較高(P<0.05)；與S1期比較，S2期、S3期血清HBV DNA、PCⅢ水平較高(P<0.05)；S3期血清HBV DNA、PCⅢ水平高于S2期(P<0.05)。見表1。

表1 不同肝纖維化程度乙型病毒性肝炎患者的血清 HBV DNA、PCⅢ水平比較

2.2 血清HBV DNA水平與血清PCⅢ水平的相關(guān)性經(jīng)Pearson分析可知，HBV DNA與PCⅢ呈正相關(guān)(r=0.437，P=0.027)。

2.3 不同時間點血清HBV DNA、PCⅢ水平治療6個月，血清HBV DNA、PCⅢ水平低于治療前、治療1個月、治療3個月相應(yīng)的血清HBV DNA、PCⅢ水平(P<0.05)；治療3個月，血清HBV DNA、PCⅢ水平低于治療前、治療1個月相應(yīng)的血清HBV DNA、PCⅢ水平(P<0.05)；治療1個月，血清HBV DNA、PCⅢ水平低于治療前相應(yīng)的血清HBV DNA、PCⅢ水平(P<0.05)。見表2。

表2 不同時間點血清HBV DNA、PCⅢ水平比較

3 討論

乙型病毒性肝炎患者免疫功能失調(diào)，加上致病因素持續(xù)作用致使膠原蛋白等細胞外基質(zhì)沉積于肝內(nèi)，引發(fā)肝細胞纖維組織的異常增生，最終產(chǎn)生肝纖維化[4]。研究顯示，肝纖維化病理過程具有可逆性，早期給予患者及時的治療可有效阻滯肝纖維化的進展，從而緩解病情，提高患者的生存質(zhì)量[5]。臨床診斷肝纖維化的方式以肝組織病理活檢為主，其屬于創(chuàng)傷性檢查，部分患者無法耐受，故臨床運用時存在局限性，影響治療效果[6]。因此，需尋找更為安全以及有效的肝纖維化程度評估方法。

臨床診斷乙型病毒性肝炎的直接、靈敏、特異的指標為HBV DNA，可根據(jù)HBV DNA的水平對病情進行評估，具有快捷、操作簡單、無創(chuàng)等優(yōu)勢。PCⅢ水平可直接反映肝纖維化程度[7]。本研究結(jié)果顯示，隨著肝纖維化程度的加重，血清HBV DNA、PCⅢ水平逐漸升高。經(jīng)Pearson分析可知，HBV DNA水平與PCⅢ水平呈正相關(guān)，說明HBV DNA水平也可反映肝纖維化程度，為臨床評估肝纖維化提供可靠依據(jù)。HBV水平變化反映病毒復(fù)制程度，而病毒復(fù)制主要在肝臟內(nèi)進行，在大量復(fù)制過程中可激發(fā)機體正常免疫系統(tǒng)清除病毒，還可誘發(fā)機體發(fā)生一系列免疫病理反應(yīng)，致使肝細胞發(fā)生損傷，肝功能異常，繼而誘發(fā)肝纖維化。肝纖維化的重要機制為免疫損傷，在乙型病毒性肝炎緩慢進展的過程中，HBV感染所致免疫激活或者再激活是乙型病毒性肝炎相關(guān)性纖維化、肝硬化以及肝癌發(fā)生和進展的重要機制。隨著肝纖維化的進展，HBV感染時可通過肝臟內(nèi)的駐留細胞以及肝星狀細胞分化、轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致PCⅢ合成增加，PCⅢ水平升高[8]。如果發(fā)現(xiàn)PCⅢ合成速度提高，便可早期反映出肝臟內(nèi)有活躍性纖維形成，此時給予患者積極的治療可減緩疾病進展過程。但在臨床應(yīng)用時需注意當處于免疫清除期時，肝臟內(nèi)的炎癥活動較嚴重，此時部分病毒會被清除，導(dǎo)致HBV DNA水平降低。在耐受期間，病毒復(fù)制活躍性升高，HBV DNA水平較高，此時不易準確評估病情，進而影響治療方案的制定及治療效果，甚至引發(fā)不良事件。本研究結(jié)果顯示，血清HBV DNA、PCⅢ水平隨著治療時間的延長而降低，說明血清HBV DNA、PCⅢ水平可隨治療效果而發(fā)生變化，在臨床中具有較高的臨床價值。動態(tài)監(jiān)測患者的血清HBV DNA、PCⅢ水平，及時對臨床治療方案進行調(diào)整，以提高臨床治療效果。

隨著乙型病毒性肝炎患者肝纖維化程度的加重，血清HBV DNA、PCⅢ水平呈上升趨勢，可為臨床評估病情提供可靠依據(jù)。動態(tài)監(jiān)測血清HBV DNA、PCⅢ水平，對病情實時評估和治療方案的調(diào)整具有重要作用。