中國輸血協(xié)會臨床輸血管理學委員會

《中華人民共和國傳染病防治法》規(guī)定新型冠狀病毒肺炎已納入乙類傳染病，并采取甲類傳染病的預防、控制措施。為了保障新型冠狀病毒肺炎防控工作期間實驗室生物安全，國家衛(wèi)生健康委員會組織制定了諸多新型冠狀病毒實驗室生物安全指南和防控方案等[1-5]，指導各級各類醫(yī)療機構規(guī)范開展相關實驗活動。通過對疾病認識的不斷深入和臨床輸血醫(yī)學經驗的積累，我們在已制定《2019新型冠狀病毒肺炎防控期間臨床輸血血型血清學實驗室生物安全防護指南（第一版）》[6]基礎上，結合中華醫(yī)學會其他專業(yè)分會[7]和國外SARS、MERS等其他急性呼吸道傳染病防控經驗[8，9]再次修訂形成第二版，旨在指導各級各類醫(yī)療機構輸血科（血庫）持續(xù)開展有效的生物安全防護。

1 病例確定 根據(jù)《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第七版）》[10]可分為感染患者（輕型、普通型、重型和危重型）和疑似患者；除感染患者和疑似患者之外其他一般患者。

2 安全原則

2.1 生物安全防護級別

2.1.1 按照《新型冠狀病毒實驗室生物安全指南（第二版）》[1]確定原則：實施血清學檢測操作時，應在生物安全二級實驗室（BSL-2）開展，盡可能在生物安全柜中進行。個人至少采用二級生物安全防護，定點收治醫(yī)院應采用三級生物安全防護。

2.1.2 按照《關于印發(fā)進一步加強新冠肺炎康復者恢復期血漿救治工作方案的通知》（聯(lián)防聯(lián)控機制發(fā)〔2020〕29號）[11]文件要求：設置捐獻血漿采集點，采集新冠肺炎康復者恢復期血漿工作人員至少采用二級生物安全防護。

2.2 血液成分儲存

2.2.1 常規(guī)使用血液成分儲存：按照國家衛(wèi)生健康委員會（原衛(wèi)生部）〔2000〕184號《臨床輸血技術規(guī)范》[12]要求執(zhí)行。

2.2.2 新冠肺炎康復者恢復期血漿儲存

（1）捐獻血漿采集點，應分別設置待檢-20℃儲血冰箱和合格品-20℃儲血冰箱。

（2）采集新冠肺炎康復者恢復期血漿應給予特殊標簽，中文名：新冠恢復期血漿，英文名：COVID-19CP（convalescent plasma）。

（3）采集后新冠肺炎康復者恢復期血漿（未檢測）須單獨存放于待檢-20℃儲血冰箱并醒目標識。（4）新冠肺炎康復者恢復期血漿按國家規(guī)定進行相關項目檢測。

（5）相關項目檢測結果合格后，將新冠肺炎康復者恢復期血漿移至合格品-20℃儲血冰箱單獨存放并醒目標識。

（6）執(zhí)行“專柜雙人雙鎖”與出入庫登記管理，資料保存?zhèn)洳椤?/p>

2.3 血漿成分融化

2.3.1 常規(guī)使用血漿成分融化按照操作規(guī)程執(zhí)行。

2.3.2 融化新冠肺炎康復者恢復期血漿應單獨設置融漿儀，用37℃水浴融化。

3 個人生物安全

一級生物安全防護：醫(yī)用外科口罩、乳膠手套、工作服、醫(yī)用防護帽，加手衛(wèi)生。適用于各級各類醫(yī)院內一般患者血標本檢測。

二級生物安全防護：醫(yī)用防護口罩或N95口罩、乳膠手套、工作服外隔離衣、醫(yī)用防護帽，加手衛(wèi)生。酌情（如有噴濺風險）可加護目鏡。適用于開設發(fā)熱門診醫(yī)院內疑似患者血標本檢測。

三級生物安全防護：醫(yī)用防護口罩或N95、單或雙層乳膠手套（條件許可，可以不同顏色）、面屏、護目鏡、工作服外防護服、單或雙層醫(yī)用防護帽，加手衛(wèi)生。必要時雙層口罩（外醫(yī)用防護口罩，內N95）。適用于定點醫(yī)院內感染患者血標本檢測。

佩戴和脫卸生物安全防護用品時，應按標準流程進行。正確進行手衛(wèi)生（六步洗手法）。

4 工作場所

4.1 室內空間

4.1.1 實驗室

（1）一般患者：保持良好采光與通風環(huán)境，嚴格執(zhí)行清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)相關流程，相關物品分區(qū)放置。紫外線消毒符合行業(yè)標準（紫外線殺菌燈GB 19258），定期檢測性能、完整記錄、累積使用不超過規(guī)定時限。實驗前后各消毒1次，消毒時間不少于30 min。

（2）疑似患者和感染患者：生物安全二級實驗室（BSL-2），按國家相關規(guī)定執(zhí)行。

4.1.2 捐獻血漿采集點：單獨設立，宜遠離實驗室，室內保持通風，相關物品分區(qū)放置，潔污分離，按時更換。紫外線消毒符合行業(yè)標準（紫外線殺菌燈GB 19258），定期檢測性能、完整記錄、累積使用不超過規(guī)定時限。每次采集前后各消毒1次，消毒時間不少于30 min。

4.2 工作臺面與地面：實驗室工作臺面宜采用易消毒且具有防滲透功能的材料。實驗前后各消毒1次，用75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀釋）濕巾擦拭消毒工作臺面、物品（電話機、電腦鍵盤和鼠標、記號筆、移液器、試劑瓶等）與地面。消毒液須新鮮配置，不超過24 h。

4.3 取血箱：應分別設置一般患者、疑似患者和感染患者取血箱；每次使用前后各消毒1次，用75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀釋）濕巾擦拭消毒。消毒液須新鮮配置，不超過24 h。

5 標本采集

5.1 一般患者血標本采集宜一級生物安全防護。

5.2 疑似患者血標本采集應二級生物安全防護，血標本應有特殊醒目標識。

5.3 感染患者血標本采集應三級生物安全防護，血標本應有特殊醒目標識。

6 標本運送接收

6.1 一般患者血標本運送接收按操作規(guī)程進行。

6.2 疑似患者和感染患者血標本

6.2.1 血標本和申請單用雙層黃色垃圾袋內密封后交至指定送檢人員運送。

6.2.2 輸血科（血庫）人員接收血標本時，與送檢人員距離間隔不少于1 m。

6.2.3 輸血科（血庫）人員對裝有患者血標本和申請單的雙層黃色垃圾袋表層用75%乙醇噴霧，打開后再對塑封袋表層、塑封袋內層、患者標本試管和申請單用75%乙醇噴霧消毒。

7 標本離心

7.1 一般患者血標本試管置入離心機（宜使用具有生物安全功能的自動脫蓋離心機）按操作規(guī)程進行。

7.2 疑似患者和感染患者血標本

7.2.1 從塑封袋取出血標本試管后，再用75%乙醇噴霧消毒。

7.2.2 血標本試管置入離心機（宜使用具有生物安全功能的自動脫蓋離心機）進行離心操作時，輸血科（血庫）人員盡可能不要離開離心機。離心停止后等待不少于15 min，打開離心機蓋，用75%乙醇噴霧消毒后，取出血標本試管。無自動脫蓋離心機，應將離心后的血標本試管移至生物安全柜（外排式）內進行去蓋。

如疑似離心過程有意外即停止離心。輸血科（血庫）人員應改為三級生物安全防護，停止離心后等待不少于30 min，小心打開離心機蓋，用75%乙醇噴霧消毒后進行處理。盡可能在生物安全柜（外排式）內將離心管放入和取出轉子。

7.2.3 不宜對感染患者血標本進行熱放散或乙醚放散等處理。

8 標本檢驗

8.1 手工方法

8.1.1 應單獨設置檢測一般患者、疑似患者和感染患者血標本的移液器。

8.1.2 在生物安全柜（外排式）內進行手工方法輸血前血型血清學檢測，包括但不限于ABO血型鑒定（正反定型）、RhD血型抗原鑒定、抗體篩查和交叉配血試驗。加樣后的試管或微柱卡用封口膠密閉后再離心。離心停止后等待不少于15 min，打開離心機蓋，用75%乙醇噴霧消毒后，取出試管或微柱卡進行正確判讀并記錄。

8.1.3 將血標本試管蓋上新的一次性試管蓋，用75%乙醇噴霧消毒。

8.1.4 操作人員手從生物安全柜（外排式）抽出前，用75%乙醇噴霧消毒后，抽出生物安全柜（外排式）后立即更換干凈手套。

8.1.5 盡可能減少進行手工檢測項目。

8.1.6 不同類型患者血標本宜分開進行實驗操作。

8.2 全自動方法

8.2.1 將血標本試管置入全自動血型檢測儀內進行檢測。

8.2.2 檢測完畢將血標本試管蓋上新的一次性試管蓋。

9 檢驗后處理

9.1 檢測完畢后的帶蓋的血標本試管，放置在雙層黃色垃圾袋內密封。用75%乙醇噴霧消毒垃圾袋表面后，按照國家衛(wèi)生健康委員會（原衛(wèi)生部）〔2000〕184號《臨床輸血技術規(guī)范》要求單獨放置7 d，存放期結束后高壓滅菌消毒，按國家規(guī)定醫(yī)療廢物處理規(guī)定執(zhí)行。

9.2 檢測所用的一次性試管、吸管和微柱卡等，放置在雙層黃色垃圾袋內密封。用75%乙醇噴霧消毒垃圾袋表面后高壓滅菌消毒，按國家規(guī)定醫(yī)療廢物處理規(guī)定執(zhí)行。

10 檢測后消毒

10.1 重復使用移液器應用75%乙醇噴霧和濕巾擦拭消毒。

10.2 全自動血型檢測儀的加樣針和加樣架用75%乙醇噴霧消毒。75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀釋）濕巾擦拭儀器內外面消毒。消毒液須現(xiàn)用現(xiàn)配，24 h內使用。

10.3 生物安全柜（外排式）內用75%乙醇噴霧和500 mg/L有效氯的消毒液（8 4消毒液，100倍稀釋）濕巾擦拭消毒。消毒液須現(xiàn)用現(xiàn)配，24 h內使用。

10.4 實驗室臺面、地面、離心機、顯微鏡等用75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀釋）濕巾擦拭消毒。消毒液須現(xiàn)用現(xiàn)配，24 h內使用。

10.5 實驗室檢測完畢后，室內空間用紫外燈消毒不少于30 min。

11 實驗室操作意外的處理

11.1 疑似患者和感染患者血標本造成生物安全柜（外排式）臺面污染，用有效氯含量為5 500 mg/L消毒液進行消毒，消毒時間不小于30 min；消毒液須現(xiàn)用現(xiàn)配，24 h內使用。

11.2 疑似患者和感染患者血標本造成實驗室污染，應保持實驗室空間密閉，用5 500 mg/L有效氯消毒液濕巾覆蓋污染區(qū)，消毒時間不少于30 min。大量溢灑時可用過氧乙酸加熱熏蒸實驗室，劑量為2 g/m3，熏蒸過夜；或20 g/L過氧乙酸消毒液用氣溶膠噴霧器噴霧，用量8 mL/m3，消毒時間（1～2） h。熏蒸時室內濕度60%～80%。

12 儲血冰箱消毒

12.1 常規(guī)放置血液成分的儲血冰箱消毒按照國家衛(wèi)生健康委員會（原衛(wèi)生部）〔2000〕184號《臨床輸血技術規(guī)范》要求執(zhí)行。

12.2 放置新冠肺炎康復者恢復期血漿的-20℃專用儲血冰箱，每月化霜1次，用75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀釋）濕巾擦拭消毒。消毒液須現(xiàn)用現(xiàn)配，24 h內使用。

13 融漿儀消毒

13.1 常規(guī)融化血漿成分的融漿儀按照操作規(guī)程執(zhí)行。

13.2 融化新冠肺炎康復者恢復期血漿的融漿儀使用前后各消毒1次，用500 m g/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀釋）進行消毒。消毒液須現(xiàn)用現(xiàn)配，24 h內使用。倘若在融化新冠肺炎康復者恢復期血漿時出現(xiàn)血漿外漏現(xiàn)象，須用有效氯含量為5 500 mg/L消毒液對融漿儀進行消毒，消毒時間不小于30 min；消毒液須現(xiàn)用現(xiàn)配，24 h內使用。

14 采漿設備消毒

每次使用采漿設備前后，須用75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀釋）濕巾擦拭采漿設備表面（采血椅等）進行消毒。消毒液須現(xiàn)用現(xiàn)配，24 h內使用。

15 取發(fā)血

15.1 定點收治醫(yī)院疑似患者和感染患者用血時，取血人員應持取血單和已消毒取血箱至輸血科（血庫）取血，輸血科（血庫）人員與取血人員間隔距離不少于1 m。

15.2 取發(fā)新冠肺炎康復者恢復期血漿應使用感染患者取血箱。

說明：中國輸血協(xié)會臨床輸血管理學委員會《2019新型冠狀病毒肺炎防控期間臨床輸血血型血清學實驗室生物安全防護指南（第一版）》2020年2月3日通過互聯(lián)網+發(fā)布，執(zhí)筆者：王娟，涂同濤（華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院）；審校者：魏晴（華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院）；宮濟武（北京醫(yī)院）；李志強（上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院）通信作者

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突