新野縣畜牧局 王秋艷
高致病性豬藍(lán)耳病是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒高致病性毒株引起的豬的一種病毒性傳染病。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須報告的動物疫病,我國將其列為一類傳染病。為更好地應(yīng)對高致病性豬藍(lán)耳病,筆者對新野縣45 家規(guī)模養(yǎng)豬場進(jìn)行了為期2 年的抗體水平實驗室檢測。從整體上看,大多數(shù)豬場豬群的免疫效果較好,但部分豬場的少數(shù)豬只抗體水平偏低,不足以抵抗強(qiáng)毒侵襲而發(fā)病或成為帶毒豬,威脅易感豬群,必須采取綜合措施,防止高致病性豬藍(lán)耳病的發(fā)生。
樣品均采自新野縣年出欄量1500 頭以上規(guī)模豬場,其中漢城辦事處5 個場、漢華辦事處9 個場、城郊鄉(xiāng)7 個場、溧河鋪鎮(zhèn)8 個場、沙堰鎮(zhèn)9 個場、樊集7個場,共采集血清樣本1380 份。其中,母豬血清300 份、仔豬血清420 份、育肥豬660 份,采集血清后置于低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
診斷試劑豬藍(lán)耳病病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附法),具體做法是將濃縮液用純化水進(jìn)行20倍稀釋,充分搖勻后備用。每次試驗在包被板上設(shè)陰性對照孔和陽性對照孔。用加樣器在包被板的待檢樣品中加入樣品稀釋液,每孔100 uL;陰性對照孔和陽性對照孔不加樣品稀釋液。分別于各待檢樣品孔中加入待檢樣品10 uL,陰性對照孔中加入陰性對照血清100 uL,陽性對照孔中加入陽性對照血清100 uL。充分混勻,貼上封板膜,37 ℃溫育30 min。傾去內(nèi)容物,用洗液注滿反應(yīng)孔,靜置10 s 后棄去,在吸水紙上拍干。洗板重復(fù)5 次。各孔中加入酶標(biāo)結(jié)合物100 uL。貼上封板膜,37 ℃溫育30 min。傾去內(nèi)容物,用洗液注滿反應(yīng)孔,靜置10 s 后棄去,在吸水紙上拍干。洗板重復(fù)5 次。每孔加入顯色劑A50 uL,全部加完后再在每孔中加入顯色劑B50 uL,混勻。37 ℃顯色10 min。顯色完畢后立即于每孔中加50 uL 終止液,混勻。用酶標(biāo)儀在450 nm 波長處測定吸光值。
在酶標(biāo)儀上測各孔OD450 值。試驗成立的條件是陽性對照孔平均OD450 值與陰性對照OD450 值之差≥0.5。試劑盒Cut Off 值=0.1+陰性對照孔OD 平均值(陰性對照孔OD 平均值≥0.05,按實際值計算;陰性對照孔OD 平均值<0.05,按0.05 計算)。若待檢樣品OD 值<Cut Off 值,結(jié)果判陰性;若待檢樣品OD 值≥Cut Off 值,結(jié)果判陽性。
在所檢測的1380 份血清中,420 份母豬血清有43份血清樣品OD450 值<0.15,占10%,其余374 份血清樣品OD630 值>0.15,免疫抗體合格率89%;育肥豬960 份血清有768 份血清樣品OD450 值>0.15,免疫抗體合格率80%,母豬免疫抗體合格率高出育肥豬抗體合格率9 個百分點。在所檢測的45 個規(guī)模養(yǎng)殖場,有40 個豬場豬瘟免疫抗體合格率≥75%(其中,18 個豬場>90%,12 個豬場≥80%~≤90%,10 個豬場≥75%~<80%),有5 個豬場豬瘟免疫抗體合格率<75%,分別是72%、70%、63%、60%、57%。豬場與豬場之間的免疫效果相差很大,合格率為57%~95%。若以豬場豬藍(lán)耳病免疫合格率≥75%以上判為免疫合格,則有40 個豬場免疫合格占89%,5 個豬場免疫不合格占11%。
根據(jù)流行狀況和風(fēng)險評估結(jié)果,制定本區(qū)域切實可行的免疫方案,并做好免疫效果評價。目前,國內(nèi)已研制成功高致病性豬藍(lán)耳病滅活疫苗和高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗,通過幾年來的區(qū)域試驗證明,疫苗免疫是控制高致病性豬藍(lán)耳病傳播與蔓延的有效途徑?,F(xiàn)在普遍認(rèn)為弱毒疫苗存在同群感染、病毒重組返強(qiáng)的危險,雖然只是推測,未得到證實,但已有試驗證明高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗可以在同群豬中相互傳播,并且不能完全阻止強(qiáng)毒的潛伏感染。因此,我們提倡,種豬群和健康豬群全部應(yīng)用滅活疫苗免疫。
加大疫情監(jiān)測力度,及時準(zhǔn)確掌握病原分布和疫情動態(tài),科學(xué)評估發(fā)生風(fēng)險,及時發(fā)布預(yù)警信息。對免疫抗體合格率達(dá)不到70%的要及時補(bǔ)免,確保免疫效果;對凈化場按照“一場一策、一病一案”要求,根據(jù)各場實際,制定切實可行的凈化方案,有計劃地實施監(jiān)測凈化。同時,嚴(yán)把種豬引進(jìn)關(guān),種豬引進(jìn)之前必須進(jìn)行高致病性豬藍(lán)耳病檢測,嚴(yán)禁從疫場引進(jìn)種豬。
不斷加強(qiáng)生豬產(chǎn)地檢疫和屠宰檢疫,建立以實驗室檢測和動物衛(wèi)生風(fēng)險評估為依托的產(chǎn)地檢疫機(jī)制,不斷提升檢疫化科學(xué)水平。強(qiáng)化生豬移動監(jiān)管,做好跨省調(diào)運(yùn)種豬產(chǎn)地檢疫和監(jiān)管工作。做到跨省調(diào)運(yùn)電子出證,實現(xiàn)檢疫數(shù)據(jù)互聯(lián)互通。