陳言亮，田來明，張 宇，王雨千，劉忠喜，田 鑫，李 男

長春市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，吉林長春 130000

1 前言

飼料費用約占雞肉生產(chǎn)成本的70%，降低飼料成本的重要途徑是提高飼料利用率，RFI是衡量家禽飼料效率的關(guān)鍵指標(biāo)。從群體遺傳學(xué)的觀點來看，飼料轉(zhuǎn)化率是一種適度遺傳的性狀，并被用作其他遺傳改良結(jié)果的指標(biāo)，在選擇指數(shù)中，性狀的權(quán)重是由它們期望的增益決定的。為了彌補FCR計算的缺陷，自20世紀(jì)70年代以來，RFI一直作為蛋雞生產(chǎn)性能評價指標(biāo)。

RFI是對牲畜飼料利用效率指數(shù)的衡量，首次提出于1963年。RFI是由生長速率和平均BW體重決定的實際動物FI與其EFI之間的差值。RFI將畜禽總能量分為生長能和維持能，能準(zhǔn)確反映個體間代謝差異，其中代謝差異由遺傳b決定。

腦-腸軸包括下丘腦、迷走神經(jīng)、胃和腸，調(diào)節(jié)飲食行為。膽囊收縮素(CCK)是腦-腸軸的調(diào)節(jié)肽，廣泛分布于中樞和外周神經(jīng)及消化系統(tǒng)，其主要作用是促進膽囊收縮和胰液分泌。然而，如果沒有膽囊收縮素受體(CCKR)，CCK就不能正常工作。CCKAR主要存在于外圍組織，負責(zé)調(diào)節(jié)和抑制飽腹感。中國地方雞具有肉質(zhì)好、適應(yīng)性強、耐粗飼料等優(yōu)良生產(chǎn)性狀。但其生長速度和飼料利用效率較低。本研究的目的是分析中國本地雞的這兩個參數(shù)，并通過選擇提高生長速度和飼料效率。我們計算了天祿烏雞群體的FCR和RFI，并對其遺傳參數(shù)和相對選擇效率進行了評價和識別。

2 研究方法

2.1 動物和喂養(yǎng)特性的測量

本研究以天祿烏雞純系N416為材料，對其生長和飼料轉(zhuǎn)化率性狀進行了測定。在孵育期(0～35日齡)，雞被關(guān)在封閉式雞舍中，以控制溫度和光照。35日齡后，將雞轉(zhuǎn)移至半開、垂直通風(fēng)的環(huán)形雞舍，將電子芯片放置于雞小腿中間。總共有921只雞在3個獨立雞舍飼養(yǎng)。每個雞舍有302只雄性雞和619只雌性雞。每個雞舍設(shè)有17個9ZC-5型智能喂養(yǎng)自動測量站。飼料中添加12.1 MJ/kg和190 gCP/kg。通過雞日常采食量，記錄每只雞從56～115日齡的體重。為了降低成本，我們從這921只個體中選擇了576只進行RFI和FCR的計算：RFI計算基于之前描述的模型。試驗期為動物快速生長期，個體體重與年齡呈線性相關(guān)?；貧w方程為BW=μ+α×DOT+e，其中μ是回歸系數(shù),DOT是當(dāng)日體重測試值，而e是殘差。將DOT值25代入Eq，得到中期試驗體重(MBW)和中期試驗代謝體重。

2.2 DNA操作和基因分型程序

使用 EZNA血液DNA試劑盒從全血中提取DNA。使用Primer Premier5.0軟件設(shè)計雞CCKAR的PCR引物。引物由上海潔瑞生物技術(shù)公司合成。設(shè)計5對引物進行混合池測序，初步篩選CCKAR中的SNPs(表S1)。為此，將排名前10%的RFI鳥(每組有48只個體)和排名后10%的RFI鳥(每組有48只個體)的數(shù)據(jù)隨機匯集到12個池中進行排序。PCR進行40-μL卷組成的10 pmol每個引物,SNP基因分型采用快照法。在初步SNP篩選的基礎(chǔ)上，對10個SNP設(shè)計了5對引物。P1為G176A,G219A,C334A,C448T,P2為G1290AP3為C5818T,G6058A,A6163G, P4為T3325C,P5為G6768A。PCR程序如下：94 ℃，3 min,94 ℃，15 s,55 ℃，36個循環(huán)最后一步，30 s和72 ℃持續(xù)30 s。

3 結(jié)果分析

3.1 中國本地雞的BW、ADFI、MBW和RFI

在喂養(yǎng)試驗開始時，56日齡時雌性和雄性個體的平均體重為802±86 g和671±73 g。平均頂峰為雄性115日齡為1 915±191 g，雄性為1632±雌性175 g，在研究期間雄性和雌性的ADFI分別為22.7±3.31 g和19.6±2.97 g。根據(jù)公式1，我們得到了MBW。雄性和雌性的平均MBW分別為1 426±142 g和1 182±123 g，

3.2 不同RFI值中國地方雞生長和飼料效率的表現(xiàn)

我們觀察了具有不同RFI值的雞的生長性能和飼料效率，并定義了兩組RFI值最低10%和最高10%的個體。我們發(fā)現(xiàn)ADG,MBW,EFI和兩組間15日齡體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義。而FCR與ADFI在高低RFI組差異顯著，F(xiàn)CR差異為0.90 g,ADFI差異為17.90 g。低RFI組8日齡體重顯著低于高RFI組(p＜0.05)(表1)。

3.3 FCR、RFI及相關(guān)性狀的遺傳力

我們研究了7個性狀的遺傳力。RFI遺傳率在0.21～0.49范圍內(nèi)為0.282，之前也有類似的結(jié)果報道。FCR遺傳力為0.312，在之前報道的值0.2～0.8之間(表2)。

表1 10% RFI最低和10% RFI最高個體的性狀

表2 遺傳力特征

4 結(jié)論

經(jīng)典育種指標(biāo)FCR在雞中得到了廣泛的研究。由于FCR不僅沒有真實的平均值或方差，而且隨著BWG方差的增加，F(xiàn)CR的非正態(tài)性也會提高，難以反映飼料利用的真實效率。RFI作為一種新的飼料利用效率指標(biāo)，已廣泛應(yīng)用于雞、羊和肉牛養(yǎng)殖。RFI是一種與代謝體重和BWG無關(guān)的表型測量方法。在本研究中，表型間的相關(guān)性RFI和MBW,ADG為零，與代謝體重和BWG基因無關(guān)，與其他研究一致。因此，RFI能較好地反映肉雞生長維持所需的能量水平。具有低維護性和高長性的個體可以用RFI作為選育性狀。

RFI作為一種新的飼料利用效率指標(biāo)，已廣泛應(yīng)用于雞、羊和肉牛養(yǎng)殖。RFI是一種與代謝體重和BWG無關(guān)的表型測量方法。在本研究中，RFI能較好地反映肉雞生長維持所需的能量水平。具有低維護性和高長性的個體可以用RFI作為選育性狀。FCR和RFI基因在雞55～56日齡群體中的遺傳力為中度。RFI表型與日增重和代謝體重?zé)o關(guān)，但有一定的遺傳相關(guān)性。FCR比RFI在權(quán)值上有更高的相對選擇效率。在CCKAR基因中發(fā)現(xiàn)51個snp，其中4個導(dǎo)致氨基酸變化。然而,只有C334A和G1290A與日采食量和日增重顯著相關(guān)。

本研究的主要新穎之處在于CCKAR基因變異與所測表型之間的關(guān)聯(lián)。雖然10個CCKARsnp與RFI或FCR均無顯著相關(guān)性，但C334A和G1290A與FI、EFI和ADG均有相關(guān)性。AA型顯著高于CC型，且在C334A位點ADG顯著高于CC型(p＜0.05)。AA型顯著高于FI位點G1290A處的GG型(p＜0.05)。此外，F(xiàn)CR對ADG有很強的負選擇性，對ADFI有輕微的負選擇性。RFI對ADFI有很強的正選擇性，而對ADG有輕微的負選擇性。