陳海燕 張娟 劉小華

摘 要：為分析某市市售食品中環(huán)境雌激素（EEs）的污染狀況，本研究采用單純隨機抽樣方法——隨機對2個超市和2個農(nóng)貿(mào)市場中的肉類、水產(chǎn)品、蔬菜類和糧谷類食品進(jìn)行采樣，使用液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測樣品中的4種環(huán)境雌激素含量，包括雙酚A（BPA）、雌二醇（E2）、壬基酚（NP）和炔雌醇（EE2），并通過試驗比較4種食品中環(huán)境雌激素的檢出率和平均檢出量。結(jié)果顯示，4種常見食品中均有樣品檢出EEs，且4種食品中E2和BPA的檢出率比較差異與NP和E2的檢出量比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。因此得出結(jié)論，不同食物中環(huán)境雌激素的檢出率和檢出量存在一定差異，顯示出不同食物對EEs的蓄積作用存在一定的異質(zhì)性。

關(guān)鍵詞：環(huán)境雌激素 ?雙酚A ?雌二醇 ?壬基酚 ?炔雌醇

隨著現(xiàn)代社會的不斷發(fā)展，民眾愈發(fā)關(guān)注環(huán)境問題，近年來，食品中環(huán)境雌激素（environmemal estrogens，EEs）的污染狀況引起了人們的普遍重視[1]。EEs是指環(huán)境中一種具有類似生物體雌激素活性的內(nèi)分泌干擾物質(zhì)，其主要來源于農(nóng)業(yè)有機氯殺蟲劑的使用、日常生活垃圾的焚燒，以及醫(yī)療衛(wèi)生部門中己烯雌酚藥物的使用等[2]。低濃度的EEs可通過食物鏈等多種途徑進(jìn)入人體，并模擬內(nèi)源性雌激素樣生理、生化作用等干擾體內(nèi)正常的內(nèi)分泌系統(tǒng)功能，進(jìn)而對生殖系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)等造成嚴(yán)重?fù)p傷[3，4]。因此，調(diào)查食品中EEs的膳食暴露情況能夠為探討EEs的污染物種類和來源，以及進(jìn)行污染物的監(jiān)管和控制提供一定的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

C18色譜柱（2.1×100mm，1.7μm）;乙酸銨、甲醇，色譜級;雙酚A標(biāo)準(zhǔn)品，BPA;雌二醇（E2）標(biāo)準(zhǔn)品;壬基酚（NP）標(biāo)準(zhǔn)品;炔雌醇（EE2）標(biāo)準(zhǔn)品。

1.2 實驗方法

1.2.1 樣品采集

采用單純隨機抽樣方法在2個超市和2個農(nóng)貿(mào)市場進(jìn)行隨機采樣，采集肉類（雞肉、豬肉）、水產(chǎn)類（帶魚、蝦）、蔬菜類（白菜、西紅柿）及糧谷類（大米、面條）食品各3小份（0.5kg），避光保存。將食品洗凈后自然晾干，經(jīng)充分切碎研磨后制得初級樣品，置于4℃保存。

1.2.2 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取5.00g樣品置于50mL離心管中，分別加入pH值5.2的乙酸-乙酸鈉緩沖液10mL、β-葡萄糖醛酸酶/芳香基硫酸脂酶溶液100μL，渦旋混勻后于37℃過夜進(jìn)行酶解。次日取出進(jìn)行提取操作——加入乙酸乙酯溶液20mL，混勻后超聲20min，3500rpm離心10min，取上清液重復(fù)一次;利用氮吹儀對上清液進(jìn)行濃縮，以甲醇定容至2mL，旋渦混勻2min后靜置，備樣待測。

1.2.3 環(huán)境雌激素含量檢測

采用液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行檢測，流動相為乙酸銨和甲醇，將柱溫設(shè)置為35℃，進(jìn)樣速度為0.2mL/min，進(jìn)樣量為10μL。質(zhì)譜分析時，以ESI（-）為離子源，方式選擇多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），毛細(xì)管電壓為-2.5kV，離子源溫度為120℃，脫溶劑溫度為350℃。

1.3 回收率實驗

取高濃度的4種標(biāo)準(zhǔn)品，按色譜條件重復(fù)進(jìn)樣3次，計算標(biāo)準(zhǔn)品的回收率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

使用SPSS24.0，非正態(tài)分布的計量數(shù)據(jù)采用M（P25，P75）表示，多組間比較方法為秩和檢驗。計數(shù)資料用例數(shù)及率描述，組間比較利用卡方檢驗;α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 方法的回收率

各樣品的回收率在83.6%～96.7%之間，RSD在4.6%～10.0%之間，說明本方法能較好地滿足樣品測定要求，結(jié)果較為可靠。

2.2 常見食品中環(huán)境雌激素的檢出率

檢測結(jié)果顯示，4種常見食品中均有樣品被檢測出環(huán)境雌激素，但檢出率不盡相同。將4種食品中的NP和EE2的檢出率進(jìn)行比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;E2和BPA的檢出率進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），詳見表1。

2.3 常見食品中環(huán)境雌激素的檢出量

將4種常見食品的EE2和BPA檢出量進(jìn)行比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;NP和E2的檢出量進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），詳見表2。

3 討論

BPA是目前使用最廣泛的低毒性工業(yè)化合物之一，也是生產(chǎn)聚氯乙烯、環(huán)氧樹脂等多種高分子材料的重要原料[5]。E2和EE2因與天然雌二醇具有相同的藥理作用而在工業(yè)上被大量生產(chǎn)和使用，但二者皆為具有雌激素效應(yīng)的典型內(nèi)分泌干擾物質(zhì)[6，7]，且EE2是口服避孕藥的主要活性成分。NP是一種典型的內(nèi)分泌干擾物質(zhì)，其被廣泛應(yīng)用于紡織印染行業(yè)，并具有“精子殺手”的稱號[8]。此外，這4類環(huán)境雌激素與乳腺癌、性早熟、惡性腫瘤、免疫失調(diào)及神經(jīng)系統(tǒng)損害等疾病的發(fā)生率增加相關(guān)[9-11]。本研究對市售食品中的4類環(huán)境雌激素（BPA、E2、NP、EE2）的含量進(jìn)行了檢測，結(jié)果顯示，肉類、水產(chǎn)類、蔬菜類、糧谷類這4種常見食物中均有樣品檢測出環(huán)境雌激素，其中NP和E2的檢出率較高，最高可達(dá)100.0%。此外，4類食物中的E2和BPA的檢出率差異較大（P<0.05），EE2和NP的檢出率幾乎無差異（P>0.05）;4種食物中NP和E2的平均檢出量不同（P<0.05），EE2和BPA的檢出量幾乎無差異（P>0.05）。由此可見，不同食物中環(huán)境雌激素的蓄積作用存在一定的異質(zhì)性——肉類和水產(chǎn)類對NP和E2的蓄積作用較強，蔬菜類中NP、E2和BPA的蓄積中作用較為明顯，糧谷類中的NP和BPA檢出量較高。環(huán)境雌激素蓄積作用的差異與不同動植物生長過程中相關(guān)化學(xué)品的使用，以及其自身的吸收和利用率有關(guān)。例如，NP是殺蟲劑和生物殺傷劑的主要輔助成分，BPA主要用于增塑劑、農(nóng)藥等化工產(chǎn)品的生產(chǎn)中。

綜上所述，本研究采用液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀對食品中的4種環(huán)境雌激素進(jìn)行了檢測，該方法的回收率較高，可滿足食品檢測工作的需要。實驗結(jié)果表明，不同食品中4種環(huán)境雌激素的檢出率和平均檢出量有所差異。此外，想要深入探索環(huán)境雌激素的來源及是否會對人體造成危害則需要更多的環(huán)境流行病學(xué)及毒理學(xué)作用機制等資料，故可作為今后研究的方向。

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