單晶，張慧，王竹，李宗新，薛艷芳，錢欣，王良，劉開昌，高英波

（1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，山東 青島 266109；2.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米研究所／小麥玉米國家工程實(shí)驗(yàn)室／農(nóng)業(yè)部黃淮海北部玉米生物學(xué)與遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東濟(jì)南 250100；3.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所，山東 濟(jì)南 250100）

受全球氣候變化影響，極端高溫天氣頻發(fā)，嚴(yán)重影響糧食生產(chǎn)和安全［1］。玉米是我國第一大糧食作物，對(duì)保障國家糧食安全至關(guān)重要。玉米是喜溫作物，但日最高溫超過32℃時(shí)，產(chǎn)量會(huì)顯著降低［2］。冬小麥-夏玉米一年兩熟種植是黃淮海區(qū)主要的種植模式，該種植模式下夏玉米在花期前后極易遭受35℃高溫?zé)岷Γ?］。因此，明確花期高溫脅迫對(duì)夏玉米物質(zhì)積累、光合特性及產(chǎn)量形成的影響，對(duì)實(shí)現(xiàn)玉米高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)、保障糧食安全具有重要意義。玉米在抽雄吐絲期前后對(duì)高溫最敏感［4］，該階段遭遇高溫脅迫會(huì)導(dǎo)致光合物質(zhì)積累減少，散粉受精過程受阻［5-7］，籽粒敗育率增加，果穗有效粒數(shù)減少，灌漿持續(xù)期縮短［8-10］，粒重降低，最終導(dǎo)致單位面積穗數(shù)、穗粒數(shù)及粒重三者失衡，產(chǎn)量損失嚴(yán)重［11-13］。作物干物質(zhì)積累有90%以上來源于光合作用［14，15］，高溫脅迫會(huì)顯著降低玉米穗位葉凈光合速率，進(jìn)而限制物質(zhì)積累和產(chǎn)量形成［11，16］。丙二醛（MDA）含量的多少標(biāo)志著膜脂過氧化程度，可溶性蛋白是重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和營養(yǎng)物質(zhì)，二者常用作篩選抗性的指標(biāo)［17］，逆境脅迫下植物體內(nèi)MDA含量增加，可溶性蛋白含量下降［11，16］。近年來，諸多研究集中在高溫對(duì)玉米苗期生長(zhǎng)發(fā)育及后期籽粒建成的影響等方面，關(guān)于花期高溫脅迫對(duì)不同耐熱型夏玉米品種光合物質(zhì)生產(chǎn)特性和品種間差異性等研究相對(duì)較少。因此，系統(tǒng)研究花期高溫脅迫對(duì)不同耐熱型夏玉米品種光合特性、花后干物質(zhì)積累、生理特性及產(chǎn)量形成的影響，明確不同耐熱型玉米品種耐高溫特性及品種間差異性，對(duì)實(shí)現(xiàn)夏玉米抗逆穩(wěn)產(chǎn)具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)于2017年和2018年6—10月在山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院龍山試驗(yàn)基地（117°32′E，36°43′N）進(jìn)行。該試驗(yàn)點(diǎn)地處溫帶大陸性季風(fēng)氣候區(qū)，年均降雨量693.4 mm，年均氣溫 13.6℃，年均日照時(shí)數(shù)2 558.3 h，無霜期209 d。土壤為棕壤，pH 7.4，有機(jī)質(zhì)含量 16.4 g／kg，堿解氮 57.3 mg／kg，速效磷29.0 mg／kg，速效鉀 125.8 mg／kg。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)以耐熱型品種鄭單958（ZD958）、熱敏感型品種魯單1108（LD1108）為供試材料。種植密度為67 500株／hm2，行距60 cm，行長(zhǎng)5 m。全生育期施用尿素折合純氮180 kg／hm2，按種肥（播種）和大喇叭口肥（12片展開葉期）4∶6施用；磷肥施用過磷酸鈣，折合P2O590 kg／hm2，鉀肥施用硫酸鉀，折合K2O 90 kg／hm2，均作為種肥一次施入。生長(zhǎng)期間保持充足的水分供應(yīng)。

設(shè)大田對(duì)照（CK）和高溫脅迫（HT）兩個(gè)處理。大田對(duì)照處理小區(qū)面積5.0 m×4.2 m＝21 m2，3次重復(fù)；高溫處理用鋼管搭建長(zhǎng)×寬×高為16.0 m×11.0 m×3.5 m的溫室框架，固定于田間，周圍用透光率95%的樹脂薄膜圍?。厥翼敳考爸車鷺渲∧ぞ芫砥穑岳跉怏w交換），吐絲期至吐絲后10 d每天9∶00—17∶00進(jìn)行塑料薄膜覆蓋形成高溫處理，處理結(jié)束后卷起頂部及周圍樹脂塑料薄膜，使玉米處于自然條件下生長(zhǎng)。高溫處理期間采用杭州路格科技有限公司生產(chǎn)的L95-8型全自動(dòng)溫濕度記錄儀對(duì)處理和對(duì)照的空氣溫度和相對(duì)濕度進(jìn)行實(shí)時(shí)測(cè)定，2017年棚外溫度平均32.4℃，棚內(nèi)溫度平均 35.6℃，2018年棚外溫度平均38.9℃，棚內(nèi)溫度平均41.8℃，高溫處理時(shí)段棚內(nèi)平均溫度比對(duì)照增加3.05℃，相對(duì)濕度增加10.19%（圖1）。

圖1 2017和2018年高溫處理期增溫棚內(nèi)外溫度和相對(duì)濕度變化

1.3 測(cè)定項(xiàng)目與方法

1.3.1 葉面積 分別于吐絲期、吐絲后 10、20、30、40、50 d，每個(gè)處理選取3株具有代表性的植株，測(cè)量綠葉面積。單葉葉面積＝長(zhǎng)×寬×0.75，LAI＝單株葉面積×單位土地面積株數(shù)／單位土地面積。葉面積衰老速率（cm2／d）＝相鄰兩個(gè)取樣時(shí)期單株葉面積之差（cm2）／間隔天數(shù)（d）。

1.3.2 干物質(zhì)積累 分別于吐絲期、吐絲后10、20、30、40、50 d，每個(gè)處理選取 3株具有代表性的植株，測(cè)量葉面積后，于105℃殺青30 min，然后80℃烘干至恒重。干物質(zhì)積累速率（g／d）＝相鄰兩個(gè)取樣時(shí)期單株干物質(zhì)量之差（g）／間隔天數(shù)（d）。

1.3.3 葉片光合特征 高溫脅迫結(jié)束前，于晴天上午9∶00—11∶00，采用 LI-6400測(cè)定穗位葉凈光合速率（Pn）和蒸騰速率（Tr）。

1.3.4 MDA、可溶性蛋白含量測(cè)定 分別于吐絲后10、20、30、40 d，每處理選擇3株具有代表性的植株，取其穗位葉放入液氮罐帶回實(shí)驗(yàn)室，置于-80℃冰箱保存，采用酶聯(lián)免疫分析（ELISA）法測(cè)定穗位葉中MDA和可溶性蛋白含量。

1.3.5 測(cè)產(chǎn)及考種 籽粒成熟期進(jìn)行測(cè)產(chǎn)取樣，主要考察果穗穗長(zhǎng)、禿尖長(zhǎng)、穗行數(shù)、行粒數(shù)及千粒重，同時(shí)測(cè)定籽粒含水率，計(jì)算實(shí)際產(chǎn)量（按14%含水率折算）。

1.4 數(shù)據(jù)分析

利用Microsoft Excel 2016進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，利用SAS 9.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，不同處理間用LSD法進(jìn)行多重比較，利用SigmaPlot 12.5軟件繪制圖表。

2 結(jié)果與分析

2.1 產(chǎn)量、產(chǎn)量構(gòu)成及穗部性狀

由表1可見，吐絲至吐絲后10 d高溫脅迫的LD1108和ZD958產(chǎn)量、穗粒數(shù)、行粒數(shù)顯著降低，禿尖長(zhǎng)顯著增加，穗粒數(shù)的降低主要是由行粒數(shù)降低引起。高溫脅迫對(duì)LD1108（熱敏感型）產(chǎn)量、產(chǎn)量構(gòu)成及禿尖長(zhǎng)的影響重于ZD958（耐熱型）。與對(duì)照相比，高溫脅迫下LD1108和ZD958的產(chǎn)量（2年平均）分別顯著降低25.62%和23.34%，穗粒數(shù)分別顯著降低22.95%和17.76%，行粒數(shù)分別顯著降低20.46%和 14.94%，禿尖長(zhǎng)顯著增加 84.26%和89.89%。高溫脅迫下，ZD958的產(chǎn)量、穗粒數(shù)和行粒數(shù)分別比 LD1108高11.94%、16.60%和19.28%，差異顯著（P＜0.05）。

表1 花期高溫脅迫對(duì)不同耐熱型夏玉米產(chǎn)量、產(chǎn)量構(gòu)成及穗部性狀的影響

2.2 干物質(zhì)積累速率

由圖2可見，從吐絲期到吐絲后50 d，不同處理玉米干物質(zhì)積累速率均隨著生育進(jìn)程的推進(jìn)呈先增加后降低的趨勢(shì)，高溫脅迫下2個(gè)玉米品種干物質(zhì)積累速率均低于對(duì)照。與對(duì)照相比，LD1108在吐絲期～吐絲后10 d、吐絲后10～20 d、吐絲后20～30 d、吐絲后30～40 d、吐絲后40～50 d期間的干物質(zhì)積累速率（2年平均）分別降低45.18%、12.87%、12.28%、10.50%和42.19%，ZD958的干物質(zhì)積累速率（2年平均）分別降低34.45%、6.16%、11.67%、14.89%和19.62%。高溫脅迫處理下耐熱型ZD958干物質(zhì)積累速率降低幅度低于熱敏感型品種LD1108。

圖2 花期高溫脅迫對(duì)不同耐熱型夏玉米花后干物質(zhì)積累速率的影響

2.3 葉片衰老速率

由圖3可見，從吐絲期到吐絲后50 d，不同處理玉米葉片衰老速率均隨著生育進(jìn)程的推進(jìn)呈指數(shù)曲線增加趨勢(shì)。吐絲期至吐絲后30 d，葉片衰老速率較低；吐絲后30～50 d，葉片衰老速率快速升高，高溫脅迫處理下2個(gè)玉米品種的葉片衰老速率顯著高于對(duì)照。與對(duì)照相比，LD1108在吐絲期～吐絲后10 d、吐絲后10～20 d、吐絲后20～30 d、吐絲后30～40 d、吐絲后40～50 d期間的葉面積衰老速率（2年平均）分別增加66.15%、42.70%、18.66%、23.44%和 32.23%，ZD958的葉片衰老速率（2年平均）分別增加53.57%、29.49%、21.31%、16.78%和 24.22%?？傮w來說，高溫脅迫處理下耐熱型ZD958葉片衰老速率降低幅度低于熱敏感型品種LD1108。

2.4 凈光合速率和蒸騰速率

由圖4可見，高溫脅迫下2個(gè)夏玉米穗位葉凈光合速率和蒸騰速率顯著降低，但下降幅度不同。與對(duì)照相比，熱敏感型品種LD1108的穗位葉凈光合速率和蒸騰速率分別下降了23.92%和16.75%，而耐熱型品種ZD958的穗位葉凈光合速率和蒸騰速率分別下降了19.92%和13.24%。耐熱型品種ZD958在高溫脅迫下穗位葉凈光合速率和蒸騰速率的下降幅度明顯小于熱敏感型LD1108。

圖3 花期高溫脅迫對(duì)不同耐熱型夏玉米花后葉片衰老速率的影響

圖4 花期高溫脅迫對(duì)夏玉米穗位葉凈光合速率和蒸騰速率的影響

2.5 丙二醛（MDA）和可溶性蛋白含量

由圖5可見，高溫脅迫下2個(gè)基因型夏玉米穗位葉MDA含量呈先降低后升高趨勢(shì)，對(duì)照處理則表現(xiàn)為一直升高趨勢(shì)，可溶性蛋白含量趨勢(shì)表現(xiàn)相反。與對(duì)照相比，熱敏感型品種LD1108在吐絲后10、20、30、40 d穗位葉 MDA含量分別增加 43.71%、6.24%、16.03%和 11.93%，可溶性蛋白含量分別降低 19.84%、12.29%、17.40%和12.37%；耐熱型品種ZD958在吐絲后10、20、30、40 d穗位葉 MDA含量分別降低22.44%、4.87%、13.16%和7.96%，可溶性蛋白含量分別降低 15.62%、8.86%、13.46%和 11.32%。耐熱型品種ZD958在高溫脅迫下穗位葉MDA含量增加幅度和可溶性蛋白含量降低幅度明顯小于熱敏感型LD1108。

圖5 花期高溫脅迫對(duì)夏玉米穗位葉丙二醛和可溶性蛋白含量的影響

3 討論與結(jié)論

玉米的產(chǎn)量是由單位面積穗數(shù)、穗粒數(shù)及粒重共同決定，三者失衡則會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)量降低。前人研究表明，不同生育階段遭遇高溫脅迫均會(huì)導(dǎo)致玉米產(chǎn)量、粒重和穗粒數(shù)顯著降低［8，18，19］，高溫脅迫對(duì)玉米穗粒數(shù)的影響大于粒重［20］。本研究結(jié)果表明，吐絲至吐絲后10 d高溫脅迫顯著降低夏玉米籽粒產(chǎn)量和穗粒數(shù)，禿尖長(zhǎng)顯著增加，行粒數(shù)減少是穗粒數(shù)下降的主要原因，這可能是由于高溫脅迫影響玉米的花粉花絲活力，籽粒敗育率［7，18］增加導(dǎo)致。同時(shí)，高溫脅迫會(huì)引起光合作用受阻［16］，MDA含量增加［20，21］，物質(zhì)生產(chǎn)能力降低，從而使產(chǎn)量降低［16］。本研究通過吐絲至吐絲后10 d的高溫脅迫處理對(duì)夏玉米生理特性、干物質(zhì)積累速率、葉片衰老速率和產(chǎn)量構(gòu)成因素的分析發(fā)現(xiàn)，高溫脅迫降低了夏玉米穗位葉凈光合速率、蒸騰速率、干物質(zhì)積累速率、穗位葉可溶性蛋白含量，增加了葉片衰老速率和穗位葉MDA含量，造成頂部籽粒敗育率增加，禿尖增長(zhǎng)，穗粒數(shù)減少，進(jìn)而導(dǎo)致產(chǎn)量降低。

前人研究表明，高溫條件下，不同玉米品種在幼 苗 生 長(zhǎng) 發(fā) 育［22，23］、光 合 生 理［16］、受 精 結(jié)實(shí)［24，25］、籽粒建成［8］等方面均表現(xiàn)出顯著差異?；ㄆ谇昂蟾邷孛{迫下耐熱型玉米品種比熱敏感型玉米品種具有較高光合能力，產(chǎn)量受高溫影響較?。?6］，吐絲期和灌漿前期高溫脅迫對(duì)溫帶玉米種質(zhì)資源影響大于熱帶種質(zhì)資源［26］。耐熱型玉米品種在高溫脅迫條件下能夠維持較強(qiáng)的滲透調(diào)節(jié)能力和較少的 MDA積累［20，27］。本研究結(jié)果表明，與不耐熱型玉米品種LD1108相比，高溫脅迫下耐熱型玉米品種ZD958具有較好的光合能力、物質(zhì)生產(chǎn)能力和滲透物質(zhì)調(diào)節(jié)能力，葉片衰老速率低，產(chǎn)量及穗部性狀受高溫脅迫影響較小。且高溫脅迫下耐熱型品種ZD958的產(chǎn)量及產(chǎn)量構(gòu)成、干物質(zhì)積累速率、葉片衰老速率、穗位葉凈光合速率、MDA和可溶性蛋白含量變化幅度均小于熱敏感型品種LD1108。總體表明，在高溫脅迫下能夠保持較強(qiáng)的光合性能和物質(zhì)生產(chǎn)能力、較好的滲透調(diào)節(jié)能力和葉片持綠能力是耐熱玉米品種的重要特征，在夏玉米花粒期易發(fā)生高溫?zé)岷^(qū)域應(yīng)選用該類品種。