熊雅紅 王 翠 李 彬 徐 剛

據(jù)相關(guān)資料顯示，喉癌的發(fā)病率在我國(guó)呈不斷增長(zhǎng)的趨勢(shì)，占全身惡性腫瘤的6%左右，在呼吸系統(tǒng)惡性腫瘤中排第2位[1]，具有較高的頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移傾向和局部侵襲性。已有研究證實(shí)，喉癌的發(fā)生、發(fā)展都與眾多細(xì)胞因子及基因存在一定的相關(guān)性[2]。Survivin是一種與多種腫瘤的發(fā)生具有密切關(guān)系的已知的功能最為強(qiáng)大的凋亡抑制因子[3]，Aurora-b是一種在多種腫瘤組織中高表達(dá)的，與細(xì)胞有絲分裂密切相關(guān)的絲氨酸/蘇氨酸激酶[4]。目前，Survivin和Aurora-b表達(dá)與喉癌發(fā)生、發(fā)展關(guān)系的研究報(bào)道較少。本文旨在探究Survivin和Aurora-b表達(dá)對(duì)喉癌診斷及病情評(píng)估的意義，具體內(nèi)容報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2011年1月至2014年6月期間于我院經(jīng)病理學(xué)確診為喉癌，采用手術(shù)治療(術(shù)前均未接受過(guò)任何化療、放療及生物治療)，且臨床資料完整的喉癌石蠟包埋標(biāo)本78例，其中男性73例，女性5例，平均年齡為(58.1±4.9)歲；在2012年3月至2015年8月期間于我院確診為喉室息肉或聲帶息肉的患者中，取20例正常喉增殖期組織石蠟包埋標(biāo)本。

1.2 試劑與方法

兔抗人Survivivin、Aurora-b多克隆抗體均由北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司提供。檢測(cè)步驟按說(shuō)明書進(jìn)行，材料進(jìn)行取材、固定、包埋及脫水脫蠟等操作；使用3%過(guò)氧化氫滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶；使用PBS沖洗樣品后滴加封閉液孵育15 min，加一抗，分別為兔抗人Survivin、Aurora-b多克隆抗體，4 ℃過(guò)夜；使用PBS沖洗樣品后滴加二抗，37 ℃孵育30 min；使用PBS沖洗樣品后滴加DAB顯色液，避光孵育5 min，純化水沖洗5 min，蘇木精復(fù)染10 min，純化水沖洗并經(jīng)PBS藍(lán)化，脫水干燥，再中性樹膠封片，用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，用已知陽(yáng)性組織切片作為陽(yáng)性對(duì)照。對(duì)喉癌患者進(jìn)行電話或門診復(fù)診隨訪，隨訪截止時(shí)間為2019年6月。

1.3 結(jié)果判定

Survivin和Aurora-b表達(dá)水平均分為陽(yáng)性(腫瘤細(xì)胞數(shù)≥15%)和陰性(陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞數(shù)<15%)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料(n/%)通過(guò)卡方檢驗(yàn)，以P<0.05代表差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Survivin，Aurora-b在喉癌和正常組織中的表達(dá)

經(jīng)檢測(cè)，Survivin和Aurora-b在喉癌組織中表達(dá)的陽(yáng)性率分別為75.6%、60.3%，顯著高于在正常組織中的陽(yáng)性表達(dá)率(10.0%、5.0%)，P<0.01。見表1。

表1 Survivin，Aurora-b在喉癌和正常組織中的表達(dá)(例，%)

2.2 不同臨床病理參數(shù)下喉癌患者Survivin、Aurora-b的表達(dá)

經(jīng)檢測(cè)，Survivin、Aurora-b在臨床分期Ⅳ、Ⅲ期的喉癌中陽(yáng)性率顯著高于Ⅱ、Ⅰ(P<0.05)；Survivin、Aurora-b在高分化的陽(yáng)性率低于低分化的陽(yáng)性率(P<0.05)；Survivin和Aurora-b在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者組的陽(yáng)性率高于非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者組的陽(yáng)性率(P<0.05)；聲門下型的Survivin和Aurora-b陽(yáng)性率顯著高于聲門上型和跨聲門型(P<0.05)。見表2。

2.3 喉癌組織Survivin、Aurora-b表達(dá)與患者的預(yù)后情況分析

經(jīng)檢測(cè)，Survivin、Aurora-b低表達(dá)者術(shù)后5年總生存率、術(shù)后生存時(shí)間均顯著高(長(zhǎng))于高表達(dá)者(P<0.01)。見表3。

3 討論

迄今為止喉癌的病因尚未完全闡明，目前認(rèn)為除基因因素外，長(zhǎng)期吸煙、飲酒、感染HPV等也是其重要引發(fā)因素[5]。據(jù)相關(guān)資料顯示，喉癌的發(fā)生和發(fā)展是一個(gè)多基因參與、多階段相互作用的過(guò)程[6]，因此，喉癌的基因研究也成為其病因?qū)W研究和病情評(píng)估的重中之重。

Survivin是一種位于染色體17q25 的凋亡抑制基因，除了胚胎組織外幾乎不表達(dá)于任何正常分化的組織，但在肺癌、宮頸癌、肝癌等多個(gè)腫瘤組織中高表達(dá)，且與該腫瘤化療抗性、腫瘤侵襲性、患者的預(yù)后密切相關(guān)[7]。Aurora-b在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌、卵巢癌等腫瘤組織中過(guò)量表達(dá)，且與腫瘤惡性程度有關(guān)[8-9]。本文研究結(jié)果顯示，經(jīng)檢測(cè)，Survivin和Aurora-b在喉癌組織中表達(dá)的陽(yáng)性率分別為75.6%、60.3%；在正常組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為10.0%、5.0%；表明Survivin和Aurora-b在喉癌組織中的表達(dá)水平高于正常組織中，可將其作為惡性腫瘤的早期診斷指標(biāo)。同時(shí)，本文研究結(jié)果還顯示，Survivin和Aurora-b在喉癌組織中表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于正常組織；經(jīng)檢測(cè)，Survivin、Aurora-b在臨床分期Ⅳ、Ⅲ期的喉癌中陽(yáng)性率顯著高于Ⅱ、Ⅰ；Survivin、Aurora-b在高分化的陽(yáng)性率低于低分化的陽(yáng)性率；Survivin和Aurora-b在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者組的陽(yáng)性率高于非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者組的陽(yáng)性率；聲門下型的Survivin和Aurora-b陽(yáng)性率顯著高于聲門上型和跨聲門型；Survivin和Aurora-b低表達(dá)者術(shù)后5年總生存率、術(shù)后生存時(shí)間均顯著高(長(zhǎng))于高表達(dá)者。表明，檢測(cè)Survivin和Aurora-b的表達(dá)水平可用來(lái)判斷腫瘤的分期、分化程度、預(yù)后等，對(duì)評(píng)估患者病情及制定臨床治療方案意義重大，與劉春玲等的研究結(jié)果相似[10]。

表2 不同臨床病理參數(shù)下喉癌患者Survivin、Aurora-b的表達(dá)(例，%)

表3 喉癌組織Survivin、Aurora-b表達(dá)與患者的預(yù)后情況分析(n=78)

綜上所述，檢測(cè)Survivin和Aurora-b表達(dá)可判斷喉癌的臨床分期、分化情況等，且對(duì)評(píng)價(jià)患者預(yù)后意義重大。