夏新生 陳扣寶 章俊如

（1.合肥市食品藥品檢驗(yàn)中心 安徽合肥 230088；2.安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院）

1 前言

牡丹皮為毛茛科植物牡丹Paeonia Suffruticosa Andr的干燥根皮，味苦、辛，微寒。具有清熱涼血、活血化淤的功效，是一種常用藥材。2015年版《中國(guó)藥典》一部收載了牡丹皮藥材及飲片，但未規(guī)定重金屬及其他元素的測(cè)定方法[1]。本文對(duì)銅陵產(chǎn)牡丹皮（道地藥材）中11種金屬元素含量進(jìn)行測(cè)定，以期為日后制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)及指導(dǎo)藥材出口提供參考。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（ICP-MS）（BRUKER M90）；超純水系統(tǒng)（Mill-0 Advantage A110）；微波消解儀（萊伯泰科ETHOS UP）；電子天平（梅特勒XPE205）。

2.2 試劑

硝酸（HNO3）（UP 級(jí)，蘇州晶瑞化學(xué)公司）；去離子水；30%過(guò)氧化氫（H2O2）（優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司）。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與樣品

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液銦（115In）、鉍（209Bi）濃度為100 μg/L，批號(hào)分別為12A007、6610030400（德國(guó)布魯克公司）；11 種元素鈉（Na）、鎂（Mg）、鋁（Al）、鉀（K）、鉻（Cr）、銅（Cu）、鐵（Fe）、砷（As）、鎘（Cd）、汞（Hg）、鉛（Pb）標(biāo)準(zhǔn)溶液：編號(hào)分別為 GBW（E）080126、GBW（E）080219、GBW（E）080125、GBW（E）080118、GBW（E）080123、GBW（E）130079、GBW08611、GBW（E）080546、GBW（E）130079、GBW（E）080545、GBW08619，質(zhì)量濃度均為 1 000 μg/mL，含量均為100.0%（中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院）。

樣品：10批牡丹皮樣品（2018年8月購(gòu)自安徽亳州中藥材市場(chǎng)，經(jīng)合肥市食品藥品檢驗(yàn)中心中藥師鑒定，均產(chǎn)自安徽銅陵）。

3 方法與結(jié)果

3.1 儀器工作條件

3.1.1 ICP－MS工作條件

射頻功率為1400W；等離子體氣流速16.5L/min；載氣流速2.0 L/min；輔助氣流速為0.2 L/min；霧化室溫度為2℃；采樣深度為6.5 mm；樣品提升速率0.1 r/s；掃描方式：跳峰；測(cè)定點(diǎn)數(shù)/峰：1；重復(fù)次數(shù)：5。

3.1.2 微波消解程序

根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)，建立微波消解程序[2]，詳見(jiàn)表1。

表1 牡丹皮微波消解程序

3.2 樣品、標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

3.2.1 樣品的制備

取藥材粉碎，過(guò)200目篩，稱(chēng)取約0.5 g樣品于微波消解管中，加入6 mL HNO3放置過(guò)夜，再加2 mL 30%H2O2，按3.1.2程序進(jìn)行微波消解，待消解完全后，趕酸至紅棕色蒸汽揮發(fā)盡，放冷，用2%HNO3轉(zhuǎn)入25mL量瓶中，定容即得。同法得空白對(duì)照溶液。

3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

內(nèi)標(biāo)溶液的制備：標(biāo)液精密吸取內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液適量115In、209Bi濃度為 100 μg/L，用 2%HNO3稀釋成濃度為10 ng/mL的內(nèi)標(biāo)溶液進(jìn)行測(cè)定。

混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：精密吸取 Na、Mg、Al、K、Cr、Fe、Cu、As、Cd、Hg、Pb 11 種元素和內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液儲(chǔ)備液，用2%HNO3稀釋?zhuān)渲瞥珊袃?nèi)標(biāo)溶液的11種元素的5個(gè)不同質(zhì)量濃度混合系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。其中，含 Na、Mg、K 3 種元素的濃度為 1.0～5.0 μg/mL，Al的濃度為 1.0～10.0ng/mL，Cr的濃度為 1～5.0ng/mL，F(xiàn)e的濃度為0.5～3.0μg/mL，Cu 的濃度為 10～50ng/mL，As的濃度為 0.2～4.0 ng/mL，Cd 的濃度為 5～50 ng/mL，Hg的濃度為 10～40ng/mL，Pb的濃度為 0.2～2.0ng/mL。

3.3 方法學(xué)考察

3.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

參考相關(guān)文獻(xiàn)[3]，測(cè)定11種金屬元素標(biāo)準(zhǔn)曲線，Y為質(zhì)荷比，X為濃度，二者線性關(guān)系良好，詳見(jiàn)表2。

3.3.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取樣品溶液，置于冰箱0℃～10℃保存，分別在 0、1、2、3、5d同法進(jìn)行測(cè)定，考察供試品溶液的穩(wěn)定性。測(cè)得相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.27%～2.19%，結(jié)果表明，各元素在5 d內(nèi)的穩(wěn)定性良好，詳見(jiàn)表3。

3.3.3 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱(chēng)取同一批樣品5份，按3.2.1制備供樣品溶液，測(cè)定樣品的金屬元素濃度，RSD為0.2%～2.2%（n=5），表明該方法重現(xiàn)性較好，詳見(jiàn)表4。

表2 牡丹皮11種金屬元素標(biāo)準(zhǔn)曲線

表3 牡丹皮穩(wěn)定性試驗(yàn)

表4 牡丹皮重復(fù)性試驗(yàn)

3.3.4 精密度試驗(yàn)

根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)[4]，取含11種元素的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中，Na、Mg、K 濃度為 5 μg/mL，F(xiàn)e 濃度為 2 μg/mL，Al濃度為 10 ng/mL，Cr濃度為 5 ng/mL，Cu 濃度為40 ng/mL，As濃度為 3.2 ng/mL，Cd 濃度為 30 ng/mL，Hg濃度為50 ng/mL，Pb濃度為2 ng/mL。在設(shè)定的儀器工作條件下重復(fù)測(cè)定 5次，計(jì)算各測(cè)定元素的 RSD為0.6%～2.1%，數(shù)據(jù)表明儀器精密度良好，詳見(jiàn)表5。

3.3.5 加樣回收率試驗(yàn)

根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)[5]，稱(chēng)取同一批樣品按3.2.1項(xiàng)中方法制備供試樣品溶液2份，其中1份用于測(cè)定樣品濃度，另1份加入11種元素的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用于測(cè)定加標(biāo)后樣品的濃度，樣品回收率為82.8%～109.1%，回收率良好，詳見(jiàn)表6。

表5 牡丹皮精密度試驗(yàn)

3.4 樣品含量測(cè)定

在上述儀器條件下，采用ICP-MS法對(duì)10批牡丹皮藥材中11種重金元素的含量進(jìn)行測(cè)定，每份樣品平行測(cè)定3次，檢測(cè)結(jié)果顯示，重金屬Pb、Hg、As、Cu含量最低； Cd未檢出；K、Mg元素含量豐富；Na、Fe含量一般；Al、Cu含量偏低，詳見(jiàn)表7。

表6 牡丹皮加樣回收率試驗(yàn)

表7 牡丹皮含量測(cè)定（單位：mg/kg）

4 討論

目前，我國(guó)大部分中藥材標(biāo)準(zhǔn)中尚未制定重金屬及其他金屬元素的含量檢測(cè)方法?，F(xiàn)行《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》[6]限量指標(biāo)為：重金屬總量≤20.0 mg/kg；Pb≤5.0 mg/kg；Cd≤0.3 mg/kg；Hg≤0.2 mg/kg；Cu≤20.0 mg/kg；As≤2.0 mg/kg。 根據(jù)對(duì)10批次銅陵產(chǎn)牡丹皮11種金屬元素研究，重金屬Pb、Cd、Hg、As、Cu 含量穩(wěn)定，均小于規(guī)定值，可以出口。ICP－MS—微波消解法測(cè)定牡丹皮中金屬元素的含量簡(jiǎn)單、快捷、穩(wěn)定、準(zhǔn)確，可以為制定重金屬質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。