何少玲 吳 爾 黃華容

1.廣州市番禺區(qū)第二人民醫(yī)院門(mén)診部，廣東廣州 511430；2.廣州市番禺區(qū)第二人民醫(yī)院院感科，廣東廣州 511430；3.廣州市番禺區(qū)第二人民醫(yī)院婦科，廣東廣州 511430

水痘是由感染水痘-帶狀皰疹病毒（VZV）所引起，即人類(lèi)皰疹病毒3型[1]。VZV病毒屬于皰疹病毒科的雙鏈脫氧核糖核酸病毒，VZV病毒在外界存活能力較弱，無(wú)法耐受熱合酸，可被乙醚等消毒劑殺滅，人類(lèi)是VZV的唯一宿主，亦是唯一傳染源。兒童由于免疫力低下，與VZV病毒接觸后，易引發(fā)發(fā)病[2]。報(bào)道[3-4]顯示，血清VZV抗體陰性的孕期母體暴露于VZV病毒條件下，可引發(fā)感染，感染后可增加胎兒先天性水痘綜合征發(fā)病率，引發(fā)胎兒體重下降、肌肉萎縮、白內(nèi)障、四肢畸形等，若孕晚期感染VZV，可顯著增加母體及新生兒死亡率。研究表明妊娠期感染水痘發(fā)生率為0.1%[5]，妊娠20周前罹患水痘引起的母兒間感染約有2%胎兒表現(xiàn)為四肢發(fā)育障礙、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎及白內(nèi)障等（稱(chēng)先天性水痘綜合征）。若分娩5d內(nèi)罹患水痘導(dǎo)致小兒發(fā)生水痘，由于患兒存在來(lái)自母體的移行抗體，癥狀較輕微。30%～40%垂直感染而又抗體不足者，易發(fā)生重度新生兒水痘[6-7]。水痘的確診可以通過(guò)病史及臨床診斷，但有時(shí)需要檢測(cè)VZV、IgM而確診[8]。母體血清中VZV病毒特異性抗體IgG、IgM可經(jīng)臍帶血傳遞至新生兒，使新生兒出生3～6個(gè)月內(nèi)血清中仍保留少量的VZV特異性抗體，以識(shí)別VZV病毒，發(fā)揮免疫保護(hù)及免疫反應(yīng)。在臨床上對(duì)母嬰間VZV特異性抗體研究鮮有提及，為更好了解母嬰間VZV特異性抗體IgG、IgM內(nèi)在聯(lián)系，為新生兒水痘預(yù)防提供參考，本課題檢測(cè)正常臨產(chǎn)母體血清及新生兒臍血中VZV特異性抗體IgG、IgM水平，分析了兩者的關(guān)聯(lián)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將我院產(chǎn)科2017年6月～2018年2月接收的正常健康產(chǎn)婦26例作為研究樣本，其中年齡22～38歲，平均（30.2±4.2）歲，孕周37～40周，平均（38.15±1.62）周，孕次1～4次，平均（1.68±1.22）次，產(chǎn)次1～ 3次，平均（1.26±0.53）次，既往水痘史4例，既往水痘疫苗接種史23例，接種次數(shù)1～2次，平均（1.22±0.46）次。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均為我院產(chǎn)科分娩的產(chǎn)婦；（2）知情知悉并同意本研究?jī)?nèi)容；（3）均為單胎妊娠。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）心、肝、腎臟器官病變、惡性高血壓、惡性血液病、惡性腫瘤；（2）神經(jīng)疾??；（3）精神異常；（4）自身抗體性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、系統(tǒng)性硬化癥、結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎等；（5）多胎妊娠；（6）拒絕本研究?jī)?nèi)容者。

1.3 檢測(cè)方法

采集母體外周靜脈血5mL，新生兒臍血5mL，分別標(biāo)號(hào)后，血液樣本采用3000r/min離心5min，分離血清，血清統(tǒng)一轉(zhuǎn)移至滅菌血清樣管中，置于-20℃冰箱中存放。VZV GMC及VZV IgM抗體檢測(cè)均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA法），VZV IgG抗體檢測(cè)試劑盒為國(guó)維潤(rùn)賽潤(rùn)公司生產(chǎn)的VZV-IgG抗體試劑盒，VZV IgM抗體為德國(guó)Serion公司產(chǎn)品。待測(cè)樣本分別以1∶100的稀釋比例接種于試劑盒中，試劑板置于37℃濕箱內(nèi)，孵育60min，主動(dòng)洗板及洗滌液漂洗微孔板，反復(fù)洗滌4次后拍干，微孔板內(nèi)加入100μL底物，置于37℃的溫箱內(nèi)，孵育30min后于每個(gè)孔內(nèi)加入100μL終止液，輕微震蕩微孔板混合均勻，讀取吸光度，VZV GMC抗體陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：血清幾何平均濃度（GMC）≥100mIU/mL；VZV IgM抗體陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：血清幾何平均濃度≥50mIU/mL[9]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料符合正態(tài)分布以（）表示，采用t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson法，|r|＜0.4為低度線性相關(guān)；0.4≤|r|＜0.7為顯著性相關(guān)；0.7≤|r|＜1為高度線性相關(guān)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 母嬰血清IgG GMC濃度比較

母體血清IgG陽(yáng)性率顯著高于新生兒（P=0.032）；母體血清IgG GMC濃度顯著高于新生兒（P＜0.001）。見(jiàn)表1。

2.2 母嬰血清IgM GMC濃度比較

母體血清IgM陽(yáng)性率與新生兒間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；母體血清IgM GMC濃度顯著高于新生兒（P＜0.001）。見(jiàn)表1。

2.3 相關(guān)性分析

母體IgG GMC濃度與新生兒IgG GMC濃度呈 顯著正 相 關(guān)性（r=0.512，P=0.006），母體 IgM GMC濃度與新生兒IgM GMC濃度呈顯著正相關(guān)性（r=0.467，P=0.013）。

3 討論

VZV相關(guān)性抗體，如IgG、IgA、IgE、IgM檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)為膜抗原熒光抗體法（fluorescent antibody to membrane antigen，F(xiàn)AMA）[10]，但該方法檢測(cè)費(fèi)時(shí)、費(fèi)力，檢測(cè)成本較高，不適合在基層醫(yī)院開(kāi)展。ELISA是檢測(cè)VZV相關(guān)抗體的有效方式，其具有檢測(cè)耗時(shí)短、檢測(cè)費(fèi)用中等、檢測(cè)結(jié)果可靠等優(yōu)點(diǎn)[11]，有研究[12]對(duì)比了FAMA與ELISA檢測(cè)VZV IgG抗體的一致性系數(shù)Kappa為0.707，說(shuō)明ELISA檢測(cè)VZV特異性抗體是可靠的。

表1 母體和新生兒血清IgG、IgM的GMC濃度及陽(yáng)性率比較

本研究采用ELISA法檢測(cè)臨產(chǎn)產(chǎn)婦血清及新生兒肚臍血IgG、IgM GMC濃度，對(duì)比發(fā)現(xiàn)，母體IgG GMC濃度顯著高于新生兒，IgG陽(yáng)性率顯著高于新生兒（P＜0.05）；母體血清IgM GMC濃度顯著高于新生兒（P＜0.05）。說(shuō)明臍帶是新生兒獲取母體VZV特異性抗體的重要渠道。VZV IgG陽(yáng)性代表體內(nèi)對(duì)VZV病毒處于較高的防御水平，發(fā)揮抵御外源性VZV病毒的侵襲，VZV IgG陰性代表體內(nèi)對(duì)VZV病毒處于較低的防御水平，易受VZV侵襲[13]。VZV IgM為體液應(yīng)答最早出現(xiàn)的特異性抗體，是預(yù)防感染的“先頭部隊(duì)”，健康狀況下血清中IgM含量較低，若血清中VZV IgM檢測(cè)陽(yáng)性，則可提示有新近的VZV病毒感染。研究[14-15]發(fā)現(xiàn)，接種水痘疫苗或水痘感染史人群的VZV IgG在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)均處于較高水平，以發(fā)揮抵御VZV病毒入侵，VZV IgM水平在接種VZV疫苗或感染短期內(nèi)呈現(xiàn)升高，后逐漸下降；當(dāng)VZV IgG水平下降至不足以抵御VZV病毒侵襲引發(fā)感染后，VZV IgM水平則顯著上升，發(fā)揮免疫應(yīng)答，經(jīng)VZV IgM介導(dǎo)大量合成VZV IgG抗體，殺滅抗原。本研究結(jié)果顯示，母體IgG GMC濃度與新生兒IgG GMC濃度呈顯著正相關(guān)性，母體IgM GMC濃度與新生兒IgG GMC濃度呈顯著正相關(guān)性。說(shuō)明新生兒VZV IgG及VZV IgM抗體水平均與母體密切相關(guān)，母體中VZV IgG、VZV IgM水平越高，新生兒臍血中VZV IgG、VZV IgM亦越高。本組26例臨產(chǎn)婦婦女中2例VZV IgG陰性，1例VZV IgM陽(yáng)性，新生兒中VZV IgG陰性11例，VZV IgM陽(yáng)性0例，說(shuō)明至少1例產(chǎn)婦臨產(chǎn)期間受VZV病毒侵襲，且該例產(chǎn)婦分娩的新生兒VZV IgM陰性。母嬰間的VZV特異性抗體傳遞情況較為復(fù)雜，母體臨產(chǎn)期間VZV病毒侵襲時(shí)間不長(zhǎng)，新生兒可不伴有特異性表現(xiàn)，VZV IgM可表現(xiàn)為陰性；若母體免疫功能下降，IgG、IgG非正常應(yīng)答，VZV侵襲后可表現(xiàn)為VZV IgG陰性，VZV IgM陽(yáng)性，在新生兒中亦可表現(xiàn)為VZV IgG、VZV IgM陰性。

總之，母體與新生兒經(jīng)臍帶傳遞VZV IgG及IgM特異性抗體，母體與新生兒VZV IgG及IgM均表現(xiàn)為顯著正相關(guān)性，傳遞的VZV IgG及IgM特異性抗體有助于新生兒預(yù)防VZV病毒侵襲及作出免疫應(yīng)答，但臨產(chǎn)期間母體若受到VZV病毒侵襲，早期新生兒可不出現(xiàn)VZV IgM抗體增高，這增加了VZV IgG及IgM抗體在新生兒體內(nèi)保留的復(fù)雜性。由于本研究涉及的檢測(cè)樣本較少，需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本研究了解母嬰間VZV特異性抗體傳遞情況。