郭志偉 徐躍軍 唐迎春 車(chē)浩 陳艷 黃婷 孫易娜

摘要?目的：觀察腸炎1號(hào)中藥液對(duì)肝郁脾虛型潰瘍性結(jié)腸炎患者的療效。方法：選取2017年8月至2018年8月武漢市第八醫(yī)院收治的肝郁脾虛型潰瘍性結(jié)腸炎患者70例作為研究對(duì)象，按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組，每組35例。對(duì)照組于美沙拉嗪緩釋顆粒常規(guī)治療，觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用腸炎1號(hào)中藥液。治療后評(píng)估患者治療前后的臨床癥狀及療效。檢測(cè)并比較患者外周血清中T細(xì)胞相關(guān)炎性反應(yīng)遞質(zhì)的水平，比較2組治療前后免疫組織化學(xué)陽(yáng)性細(xì)胞分布面積。結(jié)果：治療后，對(duì)照組治療有效率為42.86%，明顯高于觀察組的65.71%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;2組患者白細(xì)胞介素-17（IL-4）和IL-4和IL-10水平較治療前升高，IL-17和γ干擾素（IFN-γ）水平降低，IFN-γ/IL-4和IL-17/IL-10的比值較治療前降低，但觀察組降幅更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。2組患者NLRP-6、Caspase-1、IL-18基因降低，觀察組比對(duì)照組降低更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：腸炎1號(hào)中藥液對(duì)肝郁脾虛型潰瘍性結(jié)腸炎具有較好的治療效果，并能夠促使T細(xì)胞Th1/Th2及Th17/Treg介導(dǎo)炎性反應(yīng)遞質(zhì)朝炎性抑制方向轉(zhuǎn)化。

關(guān)鍵詞?腸炎1號(hào)中藥液;肝郁脾虛型;潰瘍性結(jié)腸炎;癥狀積分;IFN-γ/IL-4比值;IL-17/IL-10比值;炎性抑制;治療效果

Abstract?Objective：To observe the effects of Traditional Chinese medicine （TCM） solution of enteritis No.1 on patients with ulcerative colitis of liver stagnation and spleen deficiency.Methods：A total of 70 patients with liver stagnation and spleen deficiency type ulcerative colitis treated in Wuhan No.8 Hospital from August 2017 to August 2018 were selected as the research subjects，and were divided into a control group and an observationgroup according to the random number table method，with 35 cases in each group.The control group received conventional treatment with mesalazine sustained-release granules，and the observation group was supplemented with enteritis No.1 TCM solution on the basis of the control group.After the treatment，the clinical symptoms and efficacy of patients before and after treatment were evaluated.The contents of T-cell-related inflammatory cytokines in the serum of peripheral blood of patients were detected and compared，and the distribution area of immunohistochemically positive cells before and after treatment was compared between the 2 groups.Results：After treatment，the effective rate of treatment was 42.86% in the control group，significantly higher than 65.71% in the observation group （P<0.05）.The levels of IL-4 and IL-10 in the serum of the 2 groups were higher than those before treatment，and the levels of IL-17 and IFN-γ were lower than those before treatment.The ratio of IFN-γ/IL-4 and IL-17/IL-10 in the 2 groups was lower than that before treatment，but the reduction in the observation group was more significant （P<0.05）.The NLRP-6，Caspase-1，and IL-18 genes were decreased in the 2 groups，but observation group was more significantly reduced than the control group （P<0.05）.Conclusion：Enteritis No.1 TCM solution has a good therapeutic effects on ulcerative colitis with liver stagnation and spleen deficiency，and can promote T1 / Th2 and Th17 / Treg-mediated transformation of inflammatory cytokines towards inflammatory inhibition.

Keywords?Enteritis No.1; Traditional Chinese medicine liquid; Liver stagnation and spleen deficiency type; Ulcerative colitis; Symptom scores; IFN-γ / IL-4 ratio; IL-17 / IL-10 ratio; Inflammatory inhibition; Therapeutic effects

中圖分類(lèi)號(hào)：R289.5;R574.62文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.13.023

潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative Colitis，UC）好發(fā)于大腸黏膜層，臨床中患者常以腹痛、腹瀉、膿血便等作為首診癥狀[1]。研究表明UC的發(fā)病機(jī)制涉及到遺傳、免疫、生活環(huán)境及腸道菌群等多種方面，既往研究得出T細(xì)胞介導(dǎo)的Th1/Th2，Th17/Treg免疫平衡失調(diào)則被公認(rèn)為UC發(fā)病最重要的免疫因素[2]。UC患者在中醫(yī)中被歸屬為病變?cè)谀c的“痛”“瀉”范疇。中醫(yī)相關(guān)研究還表明，潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病多為脾腎虛弱，血瘀氣滯為標(biāo)，UC患者多有情志不暢，肝氣郁結(jié)[3]。腸炎1號(hào)中藥液方劑源自《傷寒論》加減，由白頭翁、黃柏、黃芪、金銀花、地榆炭、側(cè)柏葉、荊芥炭、枳殼、槐花、小薊、柴胡、黨參、升麻、當(dāng)歸、陳皮等組成，功效為清熱利濕，消腫止痛，益氣健脾，收澀止瀉，涼血止血，化腐生肌，促進(jìn)潰瘍愈合，治療效果較好[4-5]，其作用機(jī)制目前考慮為利用中醫(yī)藥來(lái)調(diào)節(jié)T細(xì)胞介導(dǎo)的炎性反應(yīng)。我們觀察腸炎1號(hào)中藥液對(duì)肝郁脾虛型潰瘍性結(jié)腸炎患者療效，及對(duì)T細(xì)胞Th1/Th2及Th17/Treg的影響。

1?資料與方法

1.1?一般資料

選取2017年8月至2018年8月武漢市第八醫(yī)院收治的肝郁脾虛型潰瘍性結(jié)腸炎患者70例作為研究對(duì)象，按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組，每組35例。對(duì)照組中男20例，女15例，年齡18～55歲，平均年齡（40.9±11.2）歲，病程0.5～6年，平均病程（3.4±1.3）年。觀察組中男23例，女12例，年齡19～56歲，平均年齡（41.9±13.8）歲，病程1～5.5年，平均病程（3.2±1.5）年。2組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究患者或家屬簽署知情同意書(shū)。并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理審批號(hào)：201708）。

1.2?診斷標(biāo)準(zhǔn)

UC的診斷依據(jù)《炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(jiàn)》[6];肝郁脾虛證的診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《潰瘍性結(jié)腸炎中西醫(yī)結(jié)合診療指南（草案）》[7]。

1.3?納入標(biāo)準(zhǔn)

1）符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn);2）無(wú)相關(guān)心腦肺等合并疾病;3）入選患者年齡范圍為17～56歲;4）試驗(yàn)取得患者本人及其家屬知情同意。

1.4?排除標(biāo)準(zhǔn)

1）除外UC的其他IBD，如克羅恩病、細(xì)菌性痢疾、腸結(jié)核等;2）一過(guò)性腸炎等疾病，如放射性腸炎、缺血性腸炎等;3）存在嚴(yán)重的循環(huán)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病等;4）既往有腸道手術(shù)病史;5）既往曾服用糖皮質(zhì)激素類(lèi)等藥物;6）妊娠哺乳期婦女。

1.5?脫落與剔除標(biāo)準(zhǔn)

脫落標(biāo)準(zhǔn)：研究對(duì)象簽署知情同意書(shū)并篩選合格進(jìn)入臨床試驗(yàn)但沒(méi)有完成臨床試驗(yàn)全程的觀察的病例（不良事件、患者失訪、患者主動(dòng)撤回知情同意書(shū)）。

剔除標(biāo)準(zhǔn)：違反方案操作病例，違反方案合并用藥、資料不全影響療效及安全性判斷。

1.6?治療方法

對(duì)照組患者給于美沙拉嗪緩釋顆粒治療，每日早晚各2次，每次1袋。觀察組患者在常規(guī)用藥基礎(chǔ)加用腸炎1號(hào)中藥液（白頭翁30 g、秦皮20 g、黃柏20 g、黃連20 g、黃芪20 g、金銀花20 g、地榆炭20 g、側(cè)柏葉10 g、荊芥炭10 g、枳殼10 g、槐花10 g、小薊10 g、柴胡10 g、黨參10 g、升麻10 g、當(dāng)歸10 g、白術(shù)10 g、陳皮10 g）治療，中藥處方均由醫(yī)院中藥房提供，將中藥煎煮3次，第1次煮1 h，第2、3次各煎煮約40 min，各濾取煎液，合并濃縮，蒸餾水調(diào)至全量，分裝，115 ℃蒸汽消毒30 min，冷卻后貼簽即得。該品為棕褐色液體，100 mL/次，2次/d。所有患者均連續(xù)用藥2個(gè)療程，每個(gè)療程2周。

對(duì)照組所用美沙拉嗪緩釋顆粒為住院藥房提供，產(chǎn)地為上海愛(ài)的發(fā)制藥有限公司（500 mg×10袋）;觀察組用白頭翁、秦皮、黃連、黃芪、金銀花等腸炎1號(hào)中藥液藥材為中藥房提供。

1.7?觀察指標(biāo)

觀察患者腹痛、腹瀉、腹瀉次數(shù)、膿血便等，臨床癥狀積分評(píng)價(jià)依據(jù)《潰瘍性結(jié)腸炎中西醫(yī)結(jié)合診療指南（草案）》標(biāo)準(zhǔn)。腸鏡下黏膜積分評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)采用Baron評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)。治療前后采集2組患者離心外周血，利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）方法檢測(cè)患者外周血血清中白細(xì)胞介素-4（IL-4）、白細(xì)胞介素-10（IL-10）、白細(xì)胞介素-17（IL-17）和γ干擾素（IFN-γ）的水平，分析同一樣本的不同細(xì)胞因子的數(shù)據(jù)得出IFN-γ/IL-4，IL-17/IL-10的比值。T細(xì)胞介導(dǎo)4種炎性反應(yīng)遞質(zhì)及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。NLRP-6、IL-18及Caspase-1基因等利用PCR及免疫組織化學(xué)法檢測(cè)（HE染色法 ，石蠟切片染色法）。

1.8?療效判定標(biāo)準(zhǔn)

臨床療效評(píng)定：1）完全緩解：患者無(wú)相關(guān)臨床表現(xiàn)，腸鏡觀察黏膜損傷不可見(jiàn)或活動(dòng)指數(shù)降低不少于95%;2）顯效：患者臨床表現(xiàn)明顯好轉(zhuǎn)，腸鏡觀察黏膜損傷明顯減輕或活動(dòng)指數(shù)降低不少于70%;3）有效：患者臨床表現(xiàn)稍有好轉(zhuǎn)，腸鏡觀察黏膜損傷稍減輕或活動(dòng)指數(shù)降低不少于30%;4）無(wú)效：治療后較治療前各項(xiàng)指標(biāo)并無(wú)好轉(zhuǎn)或出現(xiàn)加重，或腸鏡觀察黏膜病變活動(dòng)指數(shù)降低<30%。

1.9?統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用秩和檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，符合正態(tài)分布采用t檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布采用非參數(shù)檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2?結(jié)果

2.1?2組患者臨床癥狀積分比較

2組治療后臨床癥狀積分較治療前降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組臨床癥狀積分比對(duì)照組降低更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2?2組患者臨床療效比較

對(duì)照組治療有效率為42.86%，觀察組為65.71%，治療有效率組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.859，P<0.05）。觀察組患者臨床療效優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-2.187，P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3?2組患者T細(xì)胞相關(guān)炎性反應(yīng)遞質(zhì)比較

治療前2組患者T細(xì)胞相關(guān)炎性反應(yīng)遞質(zhì)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療后，IL-4和IL-10水平較治療前明顯升高，IL-17和IFN-γ水平較治療前明顯降低，且觀察組較對(duì)照組變化更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2.4?2組患者腸鏡下Baron評(píng)分比較

2組患者治療前腸鏡下Baron評(píng)分無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;給與治療后評(píng)分均較前降低，觀察組降低更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表4。

2.5?2組患者NLRP-6、Caspase-1、IL-18免疫組織化學(xué)陽(yáng)性細(xì)胞分布面積比較

2組患者治療后NLRP-6、Caspase-1、IL-18基因及免疫組織化學(xué)陽(yáng)性細(xì)胞分布面積均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表5，圖1、2。

3?討論

中醫(yī)中將潰瘍性結(jié)腸炎的腹痛、腹瀉等歸為“泄瀉”范疇，起于脾胃腸，病因多與積食濕熱、腸氣郁結(jié)、脾失健運(yùn)相關(guān)，患者多有情志失調(diào)不暢，發(fā)為本病[8-10]。T細(xì)胞在人類(lèi)機(jī)體起到調(diào)節(jié)免疫的功效，Th1、Th2、Th17、Treg4種T細(xì)胞產(chǎn)生不同的細(xì)胞因子，Th1/Th2通過(guò)抵御各種細(xì)胞內(nèi)外致病因子參與細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)[11-13]，Th17通過(guò)抵御胞外細(xì)菌感染參與介導(dǎo)慢性炎性疾病，Treg細(xì)胞主要作用于機(jī)體免疫耐受，通過(guò)抑制免疫細(xì)胞的激活及作用發(fā)揮功效[14-17]。Th1/Th2、Th17/Treg細(xì)胞因子可以通過(guò)相互作用維持機(jī)體平衡，當(dāng)其相互之間的制約平衡被打破時(shí)，機(jī)體發(fā)生炎性反應(yīng)，導(dǎo)致疾病[18-20]。本研究發(fā)現(xiàn)，與正常機(jī)體相比，IBD患者外周血中Th17細(xì)胞比例升高，Treg細(xì)胞比例降低，且Th17及其分泌的細(xì)胞因子的高水平表達(dá)，與IBD患者的C反應(yīng)蛋白（CRP）等各項(xiàng)指標(biāo)均有關(guān)聯(lián)。Th17細(xì)胞可以分泌IL-17A，進(jìn)而導(dǎo)致IBD炎性反應(yīng)進(jìn)一步加重，由此可見(jiàn)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫調(diào)控機(jī)制與IBD類(lèi)疾病的發(fā)生密切相關(guān)。

腸炎1號(hào)中藥液由白頭翁、秦皮、黃柏、黃連、黃芪、金銀花、地榆炭、側(cè)柏葉、荊芥炭、枳殼、槐花、小薊、柴胡、黨參等組成，具有清熱利濕，消腫止痛，益氣健脾，收澀止瀉，涼血止血，化腐生肌，促進(jìn)潰瘍愈合之功效。腸炎1號(hào)中藥液用于治療UC的機(jī)制有兩方面，一是通過(guò)促進(jìn)血清中Treg比例升高，促使IL-10、TGF-β分泌增多從而保護(hù)腸黏膜[21]。二是通過(guò)促進(jìn)CD4+/CD8+T細(xì)胞的比值增高進(jìn)而發(fā)揮治療作用[22-25]。本研究發(fā)現(xiàn)，潰瘍性結(jié)腸炎在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用腸炎1號(hào)中藥液可以有效改善患者腹痛、腹瀉和黏液膿血便的癥狀，提高UC治療效果。研究T細(xì)胞分泌的相關(guān)細(xì)胞因子的水平可以發(fā)現(xiàn)，腸炎1號(hào)中藥液的調(diào)節(jié)機(jī)制是升高炎性抑制因子IL-4、IL-10的水平，降低炎性反應(yīng)遞質(zhì)IFN-γ、IL-17水平，從而抑制炎性反應(yīng)。腸炎1號(hào)中藥液在臨床中指導(dǎo)治療肝郁脾虛型UC，可以平衡T細(xì)胞介導(dǎo)的炎性反應(yīng)，控制腸黏膜炎性反應(yīng)的進(jìn)展，緩解患者的臨床癥狀。

綜上所述，腸炎1號(hào)中藥液能夠促使T細(xì)胞Th1/Th2及Th17/Treg介導(dǎo)炎性反應(yīng)遞質(zhì)平衡朝炎性抑制方向轉(zhuǎn)化。

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（2019-03-07收稿?責(zé)任編輯：張雄杰）